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文献和实验剂,以供读者选用。1、4%多聚甲醛-0.1mol/L磷酸缓冲液(pH7.3)多聚甲醛 40g0.1mol/L磷酸缓冲液至1000ml配制方法:称取40g多聚甲醛,置于三角烧瓶中,加入500~800ml 0.1mol/L磷酸缓冲液(Phosphate Buffer以下简称PB),加热至60℃左右,持续搅拌(或磁力搅拌)使粉末完全溶解,通常需滴加少许1N NaOH才能使溶液清亮,最后补足0.1mol/L的PB于1000ml,充分混匀。该固定剂较适于光镜免疫细胞化学研究,最好是动物经灌注固定取材后,继续
满足以上步骤中对温度和时间的要求)。取出容器,室温冷却 10~20 分钟(注意:不可将切片从缓冲液中取出冷却,以便使蛋白能够恢复原有的空间构型)。 PBS 洗,下接免疫组化染色步骤。适用的抗原有:AR,Bax,Bcl-2,C-fos,X-jun,C-kit,C-myc,E-cadherin,Chromogranin A,Cyclin,ER,Heat shock protein,HPV,Ki-67,MDMZ,p53,p34,p16,p15,P-glycoprotein,PKC,PR,PCNA,ras
光显微镜 、乙醇(无水乙醇,95%,70%、50%),甲醇,冰醋酸,硫堇,1%结晶紫,1mol/L HCl。二甲苯、香柏油、擦镜纸、盖玻片、载片、15ml刻度离心管、牙签、吸水纸、小镊子、碘酒、酒精棉球、采血针、3%醋酸溶液、pH6~6.5缓冲液、0.5%盐酸阿的平染液。 (注:硫堇染液(工作液),①干液(硫堇):硫堇1g或2g溶于100mL 50%乙醇中,溶解后过滤备用;②醋酸钠缓冲液:醋酸钠·3H2O 9.7g,巴比妥钠14.7g,溶于500mL蒸馏水中;③0.1 mol/L盐酸;按①:②:③=40
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