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别名: pGEX-4T-1, pGEX4T1, pGEX 4T 1
产品货号:P0001
质粒类型:大肠杆菌蛋白表达载体
表达水平:高拷贝
启动子: Tac
克隆方法:多克隆位点,限制性内切酶
载体大小:4969 bp
5' 测序引物及序列:pGEX5': GGGCTGGCAAGCCACGTTTGGTG
3' 测序引物及序列:pGEX3': CCGGGAGCTGCATGTGTCAGAGG
载体标签:N-GST
载体抗性:Ampicillin 氨苄
备注: 复制子是pMB1
产品目录号:27-4580-01
稳定性: 瞬时表达 Transient
组成型: 诱导表达
病毒/非病毒:非病毒
产品简介:
pGEX-4T-1载体是一种常用的原核表达载体,具有Amp抗性,质粒大小为4.9 kb。该载体多克隆位点区域含有多个常用的内切酶位点序列,便于不同基因的克隆;且全序列中含有tac启动子、GST标签序列,是一种高效的蛋白表达载体。Tac启动子在没有诱导物存在的情况下,质粒上携带的lacIq基因产物可以有效抑制tac启动子的转录。可在BL21、Rosstea等表达菌株中高表达融合有GST标签的蛋白,且用凝血酶可将目的蛋白的GST标签切掉,便于下游蛋白纯化。
载体图谱及多克隆位点

标记序列点位:
质粒功能:
质粒具有自主复制能力,使其在子代细胞中也能保持恒定的拷贝数,并表达所携带的遗传信息。细菌质粒是DNA重组技术中常用的载体。载体是指把一个有用的外源基因通过基因工程手段,送进受体细胞中去进行增殖和表达的工具。将某种目标基因片段重组到质粒中,构成重组基因或重组体。然后将这种重组体经微生物学的转化技术,转入受体细胞(如大肠杆菌)中,使重组体中的目标基因在受体菌中得以繁殖或表达,从而改变寄主细胞原有的性状或产生新的物质。
质粒分类
根据质粒能否通过细菌的接合作用,可分为接合性质粒和非接合性质粒。接合性质粒带有与接合传递有关的基因。非接合质粒在一定条件下通过与其共存的接合质粒的诱动或转导而传递。
根据质粒在细菌内的复制类型可分为两类:严紧控制型和松弛控制型。严紧控制复制型质粒的复制酶系与染色体DNA复制共用,只能在细胞周期的一定阶段进行复制,当细胞染色体停止复制时,质粒也就不再复制。松弛控制复制型的质粒的复制酶系不受染色体DNA复制酶系的影响,在整个细胞生长周期中随时都可以复制,在染色体复制已经停止时质粒仍能继续复制。
根据质粒的不相容性,可分为不相容性和相容性。不相容性指结构相似、密切相关的质粒不能稳定地共存于同一宿主细菌内的现象,反之为相容性。常用于流行病学的调查。
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