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Y2手性色谱柱(OJ)
100
1年
广州研创
涂敷型多糖类手性色谱柱操作说明书
1、使用前注意事项
1) 出厂的色谱柱保存在正己烷/异丙醇=9/1中,进样前建议用流动相低流速(建议0.5 mL/min)冲洗一个小时以上;
2) 接入本色谱柱前,必须先用合适的溶剂冲洗流路(包括流通阀、定量环和自动进样器)。有些溶剂(如丙-酮、氯仿、DMF、二甲基亚砜、乙酸乙酯、二-氯-甲-烷和THF)会破坏手性固定相的结构,不得使用它们作为流动相或溶剂溶解样品;
3) 本色谱柱仅适用于正相模式。
2、参考操作条件
柱 型
150 ´ 4.6 mm ,分析柱
250 ´ 4.6 mm ,分析柱
流动相方向
参照色谱柱标签上的箭头
典型流速
1.0 mL/min,不要超过1.5 mL/min
柱压范围
< 5.0 MPa (约750 psi),不要超过8.0 MPa (约1200 psi)
温 度
10 ~40 ℃
3、流动相
烷烃/异丙醇
烷烃/乙醇
烷烃/甲醇
甲醇
100/0到0/100
100/0到95/5
甲醇中可含0到100的醇类
C2H3N中可含0到100的醇类
1) 上表中,烷烃为正己烷、异-己-烷或正戊-烷;乙醇的洗脱能力强于异丙醇,且随着流动相中醇的含量增加,样品的保留时间缩短;
2) 正己烷中甲醇的含量不高于5%;同时需添加适量乙醇以增强溶剂的互溶性;
3) 本色谱柱可使用100%的甲醇或C2H3N。但在更换不同极性的溶剂(如正己烷更换为甲醇或C2H3N)时,强烈建议先使用100%的异丙醇在低流速下过渡;
4) 根据待测样品的酸碱性,在流动相中添加酸或碱性添加剂。对于碱性化合物,常用二-乙-胺、丁胺和乙-醇-胺等作为碱性添加剂;对于酸性样品,可加入三氟-乙-酸、乙酸和甲酸等作为酸性添加剂。加入量一般为0.1%,不宜超过0.3%。
4、色谱柱保养
1) 强烈建议使用保护柱;
2) 必须使用色谱纯试剂配制流动相,使用前需经0.45 μm滤膜过滤和超声脱气处理;
3) 在进样前需过滤样品溶液;
4) 在使用含酸/碱添加剂的正相流动相后,需使用正己烷/异丙醇=9/1(长柱 ≥50 mL,短柱≥ 40 mL)冲洗色谱柱后封存;
5)建议不要长期在极端条件下使用色谱柱,以避免色谱柱使用寿命变短。
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