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全基因敲除(Conventio
百奥赛图
全基因敲除(Conventional Knockout)小鼠模型
1.概念
指利用同源重组技术,将目的基因的所有外显子或几个重要的外显子或功能域用一段外源DNA序列替代,获得在整个发育时期(从单细胞胚胎期到成年期)的全身所有组织和细胞中都不表达该基因的小鼠模型。
2.优缺点
优点:打靶策略的设计及打靶载体构建简单;
缺点:目的基因的敲除可能引起胚胎致死或导致其他基因的表达失调。如果预测存在这种风险,可以使用条件性基因敲除设计策略。
3.原理
常规基因敲除策略是以筛选基因新霉素(Neo)取代目的基因的一个或多个外显子来实现目的基因的敲除。该基因敲除发生在全身所有的细胞及组织中,可能存在胚胎致死风险,条件性基因敲除策略能够规避这一风险。
打靶策略如下图:
4.应用
研究某个基因在全身水平上的生理或病理功能;
药物的靶标确认;
药物的毒理学研究
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