I型胶原蛋白是细胞外基质(ECM)的主要结构成分。因此,这种纤维蛋白通常用于三维(3D)胶原凝胶,其比传统的2D系统更好地模拟体内细胞环境。此外,胶原蛋白I是涂层表面的理想选择,因为它可以形成用于培养细胞的薄层。
ibidi的I型胶原蛋白是一种从鼠尾肌腱中提取的的纯化蛋白,没有胃蛋白酶消化。它专为ibidi基于细胞的分析而设计(例如,3D凝胶中的趋化性分析,或实验室培养器皿的2D涂层)。
材料
胶原蛋白是一种纤维蛋白,由三条α-链组成,可以组合形成绳状三螺旋,从而为细胞外基质(ECM)提供拉伸强度。α-链含有GXY重复:甘氨酸
是一种适合三螺旋的氨基酸。通常,X和Y代表羟脯氨酸和脯氨酸,它们是胶原蛋白稳定性的关键组分。
I型是最常见的纤维状胶原蛋白,主要存在于皮肤,骨骼,肌腱和其他结缔组织中。由于酸提取和蛋白质纯化,这种胶原蛋白被认为不含任何生长因子。
应用
在中性pH和37℃下,I型胶原蛋白将形成3D凝胶,类似于动物细胞外基质。3D凝胶可让您研究ECM的机械性质对细胞发育,趋化性,迁移和形态的影响。与2D系统不同,3D环境允许细胞延伸同时在背侧和腹侧细胞表面上利用整合素。这导致特定信号传导途径的激活。凝胶硬度或刚性在3D中比在2D环境中不同地影响细胞迁移。此外,由于基质原纤维与细胞延伸的缠结而产生的整联蛋白非依赖性机械相互作用在3D系统中是可能的,但在细胞附着于平坦表面的2D系统中是不可能的。
此外,胶原蛋白I是2D环境中表面薄涂层的理想选择。它促进2D培养中众多细胞类型的细胞粘附。
2D和3D应用都包括肿瘤细胞侵袭,迁移和巨噬细胞和/或单核细胞趋化性的研究。
规格
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Collagen I,Rat Tail
(50201,50202,50203
50204,50205,50206)
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Collagen I, Bovine (50301, 50302, 50303) |
源材料 |
大鼠尾腱 |
牛真皮 |
外观 |
光学透明粘稠液体 |
萃取 |
酸,非胃蛋白酶消化 |
无菌 |
无菌,用于细胞培养 |
质量 |
细菌和真菌污染监测呈阴性 |
生长因子 |
无 |
配方 |
以17.5mM乙酸形式提供 |
以0.1M乙酸形式提供 |
酸碱度 |
3.4-4.2 |
3.3-3.7 |
功能控制 |
细胞培养中的3D胶凝和2D涂层测试 |
存储 |
-20℃,避免多次冻融循环 |
2-8℃ |
技术特点
- 从大鼠肌腱或牛皮中提取的高质量纯化蛋白质
- 高度标准化的制造工艺和严格的质量控制
- 温和的制造工艺,实现最高水平的耶稣诞生
- 应用笔记26中提供了易于操作的详细实验方案:“I型胶原蛋白的制备” (PDF)
- 使用冷藏包装运输,确保明确的质量和可重复性
- 提供 2 种浓度:5 mg/ml 用于标准应用,高浓度溶液 10 mg/ml 用于特殊应用
- 市场上最高水平的天然交联(最高质量等级)
- 高粘度:建议使用用于高粘度溶液的特殊移液器
- 低自发荧光
涂层协议
确定要涂层的盘子或通道的体积。
确定涂层面积A涂层 (即与流体接触的完整区域)。
计算所需的胶原蛋白浓度:
使用,将胶原蛋白稀释至计算浓度
517.5mM乙酸。胶原蛋白在中性pH下不溶。
填充盘子或通道。
在室温下孵育一小时。
完全吸入通道或孔体积。
用PBS或无血清培养基小心冲洗。
井或渠道现在可以使用了。可选地,在室温下风干。
储存在无菌条件下并尽快使用。
重要信息:
由于胶原分子的刚性和长的三螺旋构象,胶原溶液的粘度极高,超过4mg / ml,并且在较高浓度下难以处理。
使用胶原蛋白作为体内样基质进行3D细胞培养
胶原蛋白是结缔组织的主要成分,在哺乳动物体内含量丰富。广泛用于3D细胞培养中,用于模拟生物细胞外基质,或作为促进细胞附着的涂层
许多细胞在三维环境中自然生长。体外培养时,细胞附着在平坦的2D表面上,其行为可能与3D凝胶基质内的行为不同。在许多情况下,3D环境更接近体内情况,在计划细胞培养测定时应考虑这一点。
1080D 表面上贴壁 HT-2 癌细胞的显微镜和示意图(左),并嵌入到 3D I型胶原蛋白牛基质中(右)
订购信息
描述
50201 I型胶原蛋白,大鼠尾巴,5mg / ml,1×5ml:非胃蛋白酶原
50202 I型胶原蛋白,大鼠尾巴,5mg / ml,4×5ml:非胃蛋白酶原
50203 I型胶原蛋白,大鼠尾巴,5mg / ml,1×100ml:非胃蛋白酶原
50204 I型胶原蛋白,大鼠尾巴,10mg / ml,1×5ml:非胃蛋白酶原
50205 胶原蛋白I型,鼠尾,10mg / ml,4×5ml:非胃蛋白酶原
50206 I型胶原蛋白,大鼠尾巴,10mg / ml,1×100ml:非胃蛋白酶原