本试剂盒提供10×T4 DNA Ligation和2×T4 DNA Rapid Ligation两种buffer,切勿将两者加入到同一离心管中。
3.轻轻弹动离心管以混合内容物,短暂离心。如果选择10×T4 DNA Ligation Buffer,请将混合反应液置于22-26℃水浴反应1-2h(如室温在此范围内,可置于室温放置1-2h)或16℃过夜;如果选择2×T4 DNA Rapid Ligation Buffer,请将混合反应液置于22-26℃反应5-10 min(反应时间不要超过15 min,否则会降低连接效率)。反应结束后,将离心管置于冰上。
注意:我们推荐您使用10×T4 DNA Ligation Buffer,16℃过夜连接。