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    单细胞测序

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    单细胞测序

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      10 X Genomics单细胞mRNA测序是一种在单个细胞水平对mRNA进行高通量测序的新技术。10 X Genomics平台能够一次性分离500~10000个单细胞,并能够将分离的单个细胞中的微量mRNA通过高效扩增后再进行高通量测序,有效地解决了组织样本无法破解的细胞异质性难题,有助于发现新的细胞类型;其基于大量的单细胞基因表达数据,可以提供细胞表达特征聚类、亚群表达特征的分析、标志物筛选等方面的分析,是一种高效的细胞基因表达水平的检测技术,在生殖、免疫、干细胞分化、肿瘤发生发展等研究领域中有着广泛的应用。

       
      承启优势

      高通量:一次同时8个样本,每个样本可测500-10000个细胞;
      捕获效率高:捕获效率高达65%以上;
      应用范围广:动植物细胞、肿瘤细胞异质性、肿瘤微环境、免疫细胞群体检测等;
      成本低:单个细胞的费用从几千元降低到几十元。
      周期短:6分钟内完成上万个细胞封装,一天之内完成细胞悬液制备、单细胞捕获、扩增以及建库;

       项目流程:



      单细胞悬液要求:

      1. 细胞总量:细胞不低于106个;浓度不低于1000cell/μl,每个样本不少于100μl
      2. 细胞活性:细胞存活率大于90%(活性越高越好,至少80%);
      3. 细胞大小:细胞直径不超过40μm
      4. 悬浮液中细胞不能成团(显微镜),少碎片,不要存在反转录抑制剂及非细胞的核酸分子,尽量保证细胞的完整性。
      5. 培养基及缓冲液中不能含有Ca2+Mg2+等影响酶活性的物质。
       
      检测样品类型:

      1. 新鲜组织(不可冻存)
      Tips:由于福尔马林固定引起的化学变化,单细胞基因组测序技术目前仅限于新分离的组织样本。
      2. 贴壁或悬浮培养细胞,单细胞悬浮液,干细胞,浸润淋巴细胞等。
      3. 全血PBMC细胞悬液

      分析内容
      细胞表达特征聚类、亚群表达特征的分析、标志物筛选等方面的分析。


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