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Polyfectine转染试剂

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供应商信息

深圳市百恩维生物科技有限公司
商家诚信度:
成立时间:2010
入驻丁香通年限:8年
商家等级:金牌客户
产品信息完整度:50%
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产品详情

品牌: 百恩维
货号: PL0001
数量: 大量
保存条件: 2~8℃
保质期: 12个月
供应商: Biowit
CAS号: PL0001
规格: 1ml

Polyfectine转染试剂

产品简介:
Polyfectine转染试剂是百恩维生物公司(Biowit Technologies)最新研发合成的新型纳米聚合物高效转染试剂,既可以转染分裂细胞也可以转染非分裂细胞。由于纳米技术的应用,Polyfectine在细胞转染过程中,表现了卓越的低毒、高效的性能,可用于悬浮细胞(如293-F、CHO-S等)的转染,更可用于In vivo动物体内的高效转染。
 
产品货号:PL0001
 
运输与储存:常温运输,储存于4℃,有效期12个月
 
贴壁细胞操作步骤:(以6孔板为例)
1.      在转染前一天按每孔3~5×105个细胞接种细胞。
2.      转染复合物的制备:
⑴取4μg DNA用250μl无血清稀释培养基(建议采用OPTI-MEM、无血清DMEM或RPMI1640)稀释,充分混匀,制成DNA稀释液。
⑵取8μl Polyfectine加入到DNA稀释液中,充分混匀,室温静置15分钟。
3.      转染:
将转染复合物加入到含有细胞和完全培养基的6孔板中,轻柔混匀,培养4~6小时后更换培养基,于37℃5% CO2培养箱中继续培养24~48h。
表格:不同细胞培养容器转染用量
 

细胞培养容器 细胞培养面积 需要培养基的量 稀释用培养基的量 DNA转染 RNAi转染
DNA Polyfectine RNA Polyfectine
96孔板 0.3cm2 100ul 25ul 0.2ug 0.4ul 5pmol 0.25ul
24孔板 2cm2 500ul 50ul 0.8ug 1.6ul 20pmol 1.0ul
12孔板 4cm2 1ml 100ul 1.6ug 3.2ul 40pmol 2.0ul
6孔板 10cm2 2ml 250ul 4.0ug 8.0ul 100pmol 5.0ul
60mm平皿 20cm2 5ml 0.5ml 8.0ug 16ul 200pmol 10ul
100mm平皿 60cm2 15ml 1.5ml 24ug 48ul 600pmol 30ul
 
悬浮细胞操作步骤:(以50ml培养液为例)
1.      在转染前一天按6~7×105个细胞/ml接种细胞,待转染时细胞密度应在1×106个细胞/ml。
2.      转染复合物的制备:
⑴ 取50μg DNA 用2ml无血清完全培养基稀释,充分混匀,制成DNA稀释液。
⑵ 取100μl Polyfectine加入到DNA稀释液中,充分混匀,室温静置15分钟。
3.      转染:
将转染复合物加入到含有48ml细胞和无血清完全培养基的125ml细胞培养摇瓶中,轻柔充分混匀,125rpm,37℃,8% CO2细胞培养摇床中继续培养24~48h。
 
产品用于:
仅供研究使用,不适用于人或动物的体外诊断与治疗。
温馨提示:不可用于临床治疗。

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Polyfectine转染试剂产品简介:Polyfectine转染试剂是百恩维生物公司(Biowit Technologies)最新研发合成的新型纳米聚合物高效转染试剂,既可以转染分裂细胞也可以转染非分裂细胞。由于纳米技术的应用,Polyfectine在细胞转染过程中,表现了卓越的低毒、高效的性能,可用于悬浮细胞(如293-F、CHO-S等)的转染,更可用于In vivo动物体内的高效转染。 产品货号:PL0001 运输与储存:常温运输,储存于4℃,有效期12个月 贴壁细胞操作步骤:(以6孔板为例)1.      在转染前一天按每孔3~5×105个细胞接种细胞。2.      转染复合物的制备:⑴取4μg DNA用250μl无血清稀释培养基(建议采用OPTI-MEM、无血清DMEM或RPMI1640)稀释,充分混匀,制成DNA稀释液。⑵取8μl Polyfectine加入到DNA稀释液中,充分混匀,室温静置15分钟。3.      转染:将转染复合物加入到含有细胞和完全培养基的6孔板中,轻柔混匀,培养4~6小时后更换培养基,于37℃5% CO2培养箱中继续培养24~48h。表格:不同细胞培养容器转染用量  细胞培养容器 细胞培养面积 需要培养基的量 稀释用培养基的量 DNA转染 RNAi转染 DNA Polyfectine RNA Polyfectine 96孔板 0.3cm2 100ul 25ul 0.2ug 0.4ul 5pmol 0.25ul 24孔板 2cm2 500ul 50ul 0.8ug 1.6ul 20pmol 1.0ul 12孔板 4cm2 1ml 100ul 1.6ug 3.2ul 40pmol 2.0ul 6孔板 10cm2 2ml 250ul 4.0ug 8.0ul 100pmol 5.0ul 60mm平皿 20cm2 5ml 0.5ml 8.0u百恩维pl0001
Polyfectine转染试剂是百恩维生物公司(Biowit Technologies)最新研发合成的新型纳米聚合物高效转染试剂。Polyfectine在细胞转染过程中,表现了卓越的低毒、高效的性能。对多种细胞系具有较高的转染效率,尤其对于悬浮细胞(如293-F、CHO-S等)表现出卓越的性能,同时也可用于In vivo动物体内的高效转染。 Polyfectine对悬浮细胞(293F和CHO-S)具有非常高的转染效率。                Polyfectine转染293-F悬浮细胞                                                                                                            polyfectine转染CHO-S悬浮细胞Polyfectine因其高效和低毒的性能,可广泛用于哺乳动物的蛋白表达纯化。对比实验表明,polyfectine转染的细胞蛋白表达水平远远高于其他转染试剂,适合重组蛋白的大规模生产。                                                                       其它品牌和polyfectine转染悬浮细胞后蛋白表达水平对比 同时Polyfectine对贴壁细胞也具有良好的转染效率,下面是一些验证过的细胞及转染效率:Polyfectine是一款稳定性良好,较易保存的试剂。HET在37°C可保存4个月。储存于4℃,有效期12个月。 biowitpl0001
一.简介慢病毒(Lentivirus)载体是以HIV-1为基础发展起来的基因治疗载体。区别一般的逆转录病毒载体,它对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力,较逆转录病毒载体有更广的宿主范围,慢病毒能够有效感染非周期性和有丝分裂后的细胞。慢病毒载体能够产生表达shRNA的高滴度的慢病毒,在周期性和非周期性细胞、干细胞、受精卵以及分化的后代细胞中表达shRNA,实现在多种类型的细胞和转基因小鼠中特异而稳定的基因表达的功能性沉默,为在原代的人和动物细胞组织中快速而高效地研究基因功能,以及产生特定基因表达降低的动物提供了可能性。慢病毒作为siRNA的携带者,不但具备特异性地使基因表达沉默的能力,而且充分发挥了慢病毒载体自身所具备的优势,为基因功能的研究提供了更强有力的工具。慢病毒表达载体包含了包装、转染、稳定整合所需要的遗传信息。慢病毒包装质粒可提供所有的转录并包装RNA 到重组的假病毒载体所需要的所有辅助蛋白。为产生高滴度的病毒颗粒,需要利用表达载体和包装质粒同时共转染细胞,在细胞中进行病毒的包装,包装好的假病毒颗粒分泌到细胞外的培养基中,离心取得上清液后,可以直接用于宿主细胞的感染,目的基因进入到宿主细胞之后,经过反转录,整合到基因组,从而高水平的表达效应分子。二.简要步骤:1、慢病毒转染贴壁细胞实验方法 (1)慢病毒转染前18-24h,将贴壁细胞以1×105个/ml铺到6孔板中。使细胞在慢病毒转染时的数量为2×105个/ml左右。 (2)次日,用含有6 μg/ml polybrene的1ml新鲜培养基替换原培养基,加入适量病毒悬液。37℃孵育。(3)(对polybrene毒性敏感的细胞选作此步骤)8h-16h后,观察转染情况,更换新鲜培养基1ml/孔,37℃培养。(4)如果慢病毒含有荧光蛋白,一般转染48小时后可见明显荧光表达,72小时后更加明显。如需FACS检测转染效率,可在转染后72-96小时进行。如果慢病毒含有抗性基因并且需要加药筛选,可以在转染3-4天后开始加药。2、慢病毒转染悬浮细胞实验方法  (1)在2×105个/ml悬浮细胞中加入polybrene至6 μg/ml和适量病毒,充分混匀。37℃孵育。 如果该细胞株不易受慢病毒感染,可以使用离心孵化的方法。即在细胞培养板上加入病毒感染液后在离心机上以2500rpm(1000-1500g)在3
产品简介:慢病毒(Lentivirus)载体是以HIV-1为基础发展起来的基因治疗载体。区别一般的逆转录病毒载体,它对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力,较逆转录病毒载体有更广的宿主范围,慢病毒能够有效感染非周期性和有丝分裂后的细胞。慢病毒载体能够产生表达shRNA的高滴度的慢病毒,在周期性和非周期性细胞、干细胞、受精卵以及分化的后代细胞中表达shRNA,实现在多种类型的细胞和转基因小鼠中特异而稳定的基因表达的功能性沉默,为在原代的人和动物细胞组织中快速而高效地研究基因功能,以及产生特定基因表达降低的动物提供了可能性。慢病毒作为siRNA的携带者,不但具备特异性地使基因表达沉默的能力,而且充分发挥了慢病毒载体自身所具备的优势,为基因功能的研究提供了更强有力的工具。慢病毒表达载体包含了包装、转染、稳定整合所需要的遗传信息。慢病毒包装质粒可提供所有的转录并包装RNA 到重组的假病毒载体所需要的所有辅助蛋白。为产生高滴度的病毒颗粒,需要利用表达载体和包装质粒同时共转染细胞,在细胞中进行病毒的包装,包装好的假病毒颗粒分泌到细胞外的培养基中,离心取得上清液后,可以直接用于宿主细胞的感染,目的基因进入到宿主细胞之后,经过反转录,整合到基因组,从而高水平的表达效应分子。二.简要步骤:1、慢病毒转染贴壁细胞实验方法 (1)慢病毒转染前18-24h,将贴壁细胞以1×105个/ml铺到6孔板中。使细胞在慢病毒转染时的数量为2×105个/ml左右。 (2)次日,用含有6 μg/ml polybrene的1ml新鲜培养基替换原培养基,加入适量病毒悬液。37℃孵育。(3)(对polybrene毒性敏感的细胞选作此步骤)8h-16h后,观察转染情况,更换新鲜培养基1ml/孔,37℃培养。(4)如果慢病毒含有荧光蛋白,一般转染48小时后可见明显荧光表达,72小时后更加明显。如需FACS检测转染效率,可在转染后72-96小时进行。如果慢病毒含有抗性基因并且需要加药筛选,可以在转染3-4天后开始加药。2、慢病毒转染悬浮细胞实验方法  (1)在2×105个/ml悬浮细胞中加入polybrene至6 μg/ml和适量病毒,充分混匀。37℃孵育。 如果该细胞株不易受慢病毒感染,可以使用离心孵化的方法。即在细胞培养板上加入病毒感染液后在离心机上以2500rpm(1000-1500g)在

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