首页 » 试剂 » 克隆与表达 » 转染 » Polyfectine转染试剂

Polyfectine转染试剂

技术资料: 免费索取技术资料
 丁香通采购保障计划,让您的采购更放心。查看详情

供应商信息

深圳市百恩维生物科技有限公司
商家诚信度:
成立时间:2010
入驻丁香通年限:8年
商家等级:金牌客户
产品信息完整度:50%
联系人:易小姐 点击这里给我发消息

若您通过QQ未能联系到商家,您可以给商家发送站内信,与其取得联系。

扫一扫
微信联系商家

邮件: sales@biowit.com

手机:13652310186

电话:0755-26980323转802

地址:深圳市宝安区67区留仙一路高新奇战略新兴产业园1号孵化楼5楼

该商家已通过实名认证
 

产品详情

品牌: 百恩维
货号: PL0001
数量: 大量
保存条件: 2~8℃
保质期: 12个月
供应商: Biowit
CAS号: PL0001
规格: 1ml

Polyfectine转染试剂

产品简介:
Polyfectine转染试剂是百恩维生物公司(Biowit Technologies)最新研发合成的新型纳米聚合物高效转染试剂,既可以转染分裂细胞也可以转染非分裂细胞。由于纳米技术的应用,Polyfectine在细胞转染过程中,表现了卓越的低毒、高效的性能,可用于悬浮细胞(如293-F、CHO-S等)的转染,更可用于In vivo动物体内的高效转染。
 
产品货号:PL0001
 
运输与储存:常温运输,储存于4℃,有效期12个月
 
贴壁细胞操作步骤:(以6孔板为例)
1.      在转染前一天按每孔3~5×105个细胞接种细胞。
2.      转染复合物的制备:
⑴取4μg DNA用250μl无血清稀释培养基(建议采用OPTI-MEM、无血清DMEM或RPMI1640)稀释,充分混匀,制成DNA稀释液。
⑵取8μl Polyfectine加入到DNA稀释液中,充分混匀,室温静置15分钟。
3.      转染:
将转染复合物加入到含有细胞和完全培养基的6孔板中,轻柔混匀,培养4~6小时后更换培养基,于37℃5% CO2培养箱中继续培养24~48h。
表格:不同细胞培养容器转染用量
 

细胞培养容器 细胞培养面积 需要培养基的量 稀释用培养基的量 DNA转染 RNAi转染
DNA Polyfectine RNA Polyfectine
96孔板 0.3cm2 100ul 25ul 0.2ug 0.4ul 5pmol 0.25ul
24孔板 2cm2 500ul 50ul 0.8ug 1.6ul 20pmol 1.0ul
12孔板 4cm2 1ml 100ul 1.6ug 3.2ul 40pmol 2.0ul
6孔板 10cm2 2ml 250ul 4.0ug 8.0ul 100pmol 5.0ul
60mm平皿 20cm2 5ml 0.5ml 8.0ug 16ul 200pmol 10ul
100mm平皿 60cm2 15ml 1.5ml 24ug 48ul 600pmol 30ul
 
悬浮细胞操作步骤:(以50ml培养液为例)
1.      在转染前一天按6~7×105个细胞/ml接种细胞,待转染时细胞密度应在1×106个细胞/ml。
2.      转染复合物的制备:
⑴ 取50μg DNA 用2ml无血清完全培养基稀释,充分混匀,制成DNA稀释液。
⑵ 取100μl Polyfectine加入到DNA稀释液中,充分混匀,室温静置15分钟。
3.      转染:
将转染复合物加入到含有48ml细胞和无血清完全培养基的125ml细胞培养摇瓶中,轻柔充分混匀,125rpm,37℃,8% CO2细胞培养摇床中继续培养24~48h。
 
产品用于:
仅供研究使用,不适用于人或动物的体外诊断与治疗。
温馨提示:不可用于临床治疗。

相关产品

细胞内 FCM 试剂盒: sc-45063 丁香通标准抗体
品牌:santacruze  货号:sc-45063  价格:询价 
Polyfectine转染试剂产品简介:Polyfectine转染试剂是百恩维生物公司(Biowit Technologies)最新研发合成的新型纳米聚合物高效转染试剂,既可以转染分裂细胞也可以转染非分裂细胞。由于纳米技术的应用,Polyfectine在细胞转染过程中,表现了卓越的低毒、高效的性能,可用于悬浮细胞(如293-F、CHO-S等)的转染,更可用于In vivo动物体内的高效转染。 产品货号:PL0001 运输与储存:常温运输,储存于4℃,有效期12个月 贴壁细胞操作步骤:(以6孔板为例)1.      在转染前一天按每孔3~5×105个细胞接种细胞。2.      转染复合物的制备:⑴取4μg DNA用250μl无血清稀释培养基(建议采用OPTI-MEM、无血清DMEM或RPMI1640)稀释,充分混匀,制成DNA稀释液。⑵取8μl Polyfectine加入到DNA稀释液中,充分混匀,室温静置15分钟。3.      转染:将转染复合物加入到含有细胞和完全培养基的6孔板中,轻柔混匀,培养4~6小时后更换培养基,于37℃5% CO2培养箱中继续培养24~48h。表格:不同细胞培养容器转染用量  细胞培养容器 细胞培养面积 需要培养基的量 稀释用培养基的量 DNA转染 RNAi转染 DNA Polyfectine RNA Polyfectine 96孔板 0.3cm2 100ul 25ul 0.2ug 0.4ul 5pmol 0.25ul 24孔板 2cm2 500ul 50ul 0.8ug 1.6ul 20pmol 1.0ul 12孔板 4cm2 1ml 100ul 1.6ug 3.2ul 40pmol 2.0ul 6孔板 10cm2 2ml 250ul 4.0ug 8.0ul 100pmol 5.0ul 60mm平皿 20cm2 5ml 0.5ml 8.0u百恩维pl0001
Polyfectine转染试剂是百恩维生物公司(Biowit Technologies)最新研发合成的新型纳米聚合物高效转染试剂。Polyfectine在细胞转染过程中,表现了卓越的低毒、高效的性能。对多种细胞系具有较高的转染效率,尤其对于悬浮细胞(如293-F、CHO-S等)表现出卓越的性能,同时也可用于In vivo动物体内的高效转染。 Polyfectine对悬浮细胞(293F和CHO-S)具有非常高的转染效率。                Polyfectine转染293-F悬浮细胞                                                                                                            polyfectine转染CHO-S悬浮细胞Polyfectine因其高效和低毒的性能,可广泛用于哺乳动物的蛋白表达纯化。对比实验表明,polyfectine转染的细胞蛋白表达水平远远高于其他转染试剂,适合重组蛋白的大规模生产。                                                                       其它品牌和polyfectine转染悬浮细胞后蛋白表达水平对比 同时Polyfectine对贴壁细胞也具有良好的转染效率,下面是一些验证过的细胞及转染效率:Polyfectine是一款稳定性良好,较易保存的试剂。HET在37°C可保存4个月。储存于4℃,有效期12个月。 biowitpl0001
慢病毒包装介绍       慢病毒包装指携带外源基因的慢病毒质粒和慢病毒包装质粒共转染细胞,在细胞中进行病毒包装,包装好的假病毒颗粒分泌到细胞外的培养基中,离心获取含有假病毒颗粒上清液的过程。 利用慢病毒转染细胞的优势       慢病毒宿主范围广、感染能力强,对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力,可有效地感染神经元细胞、肝细胞、心肌细胞、肿瘤细胞、内皮细胞、干细胞等多种类型细胞。而且慢病毒能够将外源基因有效地整合到宿主染色体中,从而达到持久性表达。因而慢病毒是一种强大的基因转导工具,广泛用于细胞的转染、稳定表达细胞株的构建、稳定表达细胞株成瘤实验和转基因动物的制备,特别是难以转染的细胞的转染,如原代神经细胞、干细胞和肿瘤细胞,以及转基因大鼠的制备。 慢病毒包装的原理       HYY采用第3代重组慢病毒包装系统制备病毒颗粒。第三代慢病毒包装系统由4个质粒构成,分别是:1、1个表达目的基因的慢病毒质粒。表达质粒包含了包装、转染、稳定整合所需要的遗传信息。目的基因两侧各有一个LTR(long terminal repeat)序列,LTR序列促使目的基因整合到目的细胞基因组里。为了提高安全性能,表达质粒的3’LTR缺失了部分序列,使得整合后的病毒基因组失去自我复制能力。2、2个包装质粒。其中一个质粒编码Rev,另外一个质粒编码Gag和Pol。3、1个编码包膜蛋白VSV-G的质粒。       将上述4个质粒共转染细胞。GAG基因编码约500个氨基酸组成的p55蛋白前体,经蛋白酶裂解形成病毒的核衣壳蛋白(p7)、内膜蛋白(p17)和衣壳蛋白(p24)。POL基因编码聚合酶前体蛋白,经切割形成蛋白酶、整合酶、逆转录酶、核糖核酸酶H。REV基因编码Rev蛋白。表达质粒经转录产生慢病毒基因组RNA,Rev蛋白与基因组RNA中的RRE结合,将基因组RNA从细胞核转运到细胞质中。基因组RNA与衣壳蛋白、逆转录酶、整合酶、包膜蛋白等组装成假病毒颗粒。 慢病毒包装流程1、将表达质粒、包装质粒和包膜蛋白质粒转染到293T细胞中。2、更换新鲜的培养基后,继续培养48~72小时。3、收集培养液,进行离心浓缩,得到转导细胞级别的病毒颗粒。如果想获得注射动物级别的超纯病毒颗粒,可以利用蔗糖超速离心进一步去除杂质,从而获得纯度更高的病毒颗粒。4、用高质量
慢病毒为RNA病毒,具有可感染分裂细胞,且能感染终末分化细胞和非分裂细胞,病毒滴度高,转染效率高,转移基因片段容量较大,目的基因整合于靶细胞基因组,可在宿主细胞中长时间稳定表达,无毒性且不易诱发宿主免疫反应等优点,是近年来受到广泛关注的一种逆转录病毒,已成为当前基因治疗中基因转移载体研究的热点,也成为基因药物治疗领域的研发热点,在转基因动物、基因治疗、细胞治疗、RNA干扰研究方面有着广阔的应用前景。源兴基因专业提供慢病毒产品扩增及纯化服务,包括生产、纯化、质检、分装等一系列服务。源兴基因建立了成熟的细胞培养和病毒扩增的方法;建立了分子筛柱层析等纯化工艺方法;建立了慢病毒质量控制和检定方法及流程,品种涵盖HIV、SIV,能为实验室研究者及药物开发单位提供在GMP条件下生产的可用于基础研究、临床前研究、临床研究的高滴度、高纯度重组慢病毒制品。服务内容:提供一整套的重组慢病毒载体药物的研发技术服务,包括细胞培养工艺研究、细胞主库和工作库建立、毒种评估、毒种筛选、病毒扩增工艺研究、病毒主库和工作库建立、纯化、制备工艺研究、临床前药理毒理动物实验样品的制备、申报临床试验及临床试验样品的制备、药学研究、大规模生产工艺开发和GMP服务、CRO-基因治疗药物临床申报。服务流程:有意合作者欢迎致电咨询。

数据正在加载,请稍候...

电话: 0755-26980323转802 联系人: 易小姐 (联系我时请说在丁香通看到的)

30秒填写信息,方便商家与您及时沟通

您未登录,马上登录 注册,即可保存询价历史
换一个



询价发送成功

深圳市百恩维生物科技有限公司 会在1个工作日内联系您!

马上登录注册,即可保存询价历史

你可能感兴趣的产品

生物学霸
帮助你升级成为学霸。
查看