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人间充质干细胞无动物源培养基

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供应商信息

深圳市百恩维生物科技有限公司
商家诚信度:
成立时间:2010
入驻丁香通年限:8年
商家等级:金牌客户
产品信息完整度:50%
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产品详情

品牌: 百恩维
货号: BW110024
供应商: 百恩维
数量: 大量
规格: 500ml
人间充质干细胞无动物源培养基
    百恩维生物的人间充质干细胞无动物源培养基根据人间充质干细胞的生长需要,培养基包含必需和非必需氨基酸、维生素、有机和无机化合物、激素、生长因子、微量矿物质以及其他补给成分。非常适用于培养人脐带间充质干细胞,人骨髓间充质干细胞,人脂肪间充质干细胞等间充质干细胞。产品严格无菌,无病毒和支原体,性能稳定,使用该培养基能使人间充质干细胞在理想营养平衡状态下进行多代扩增而不发生分化(至少10代以内)。

★ 产品货号
BW110024

★ 产品内容
名称 规格 保质期 贮藏条件 运输
基础培养基(Basal Medium) 500ml 12个月 2-8℃ 避光保存 冰袋运输
间充质干细胞无动物源生长添加剂(MSCGS-sf) 20ml 12个月 -20℃ 避光保存
青霉素/链霉素溶液(P/S) 5ml 12个月 -20℃ 避光保存

★ 使用注意事项
1.在配制完全培养基前,请把间充质干细胞无动物源生长添加剂(MSCGS-sf)、青霉素-链霉素(P/S)放到2-8℃冰箱过夜解冻或37℃水浴中直到完全溶解,然后加入。
2.在使用完全培养基前,需要把培养基放到37℃恒温水浴中预热,注意温度不要超过37℃。
3.请把配制好的完全培养基放在4℃冰箱避光保存,并尽量在一个月内使用完。若培养基要分几次使用,请将间充质干细胞无动物源生长添加剂(MSCGS-sf)、青霉素-链霉素 (P/S)解冻按用量分装后保存。

★ 培养条件
37℃,5% CO2,无菌恒温培养箱培养。

★ 相关操作

间充质干细胞复苏
1.把人间充质干细胞无动物源培养基放入37℃水浴中预热;
2.从液氮中取出间充质干细胞迅速放入37℃水浴快速解冻(解冻后不要继续孵育细胞);
3.在超净台中加入5ml的人间充质干细胞无动物源培养基重悬细胞,1000rpm离心5min;
4.弃上清,加入5ml的人间充质干细胞无动物源培养基重悬细胞,转移到T-25培养瓶中(带滤芯);
5.将培养瓶置于37℃,5% CO2的无菌恒温培养箱中培养;
6.4-6小时后,用新鲜的人间充质干细胞无动物源培养基给细胞换液。

间充质干细胞传代培养
1.在显微镜下观察细胞(细胞生长在人间充质干细胞无动物源培养基中,且是次传代),当细胞融合度超过80%时,即可传代;
2.37℃水浴预热培养基;
3.在超净台中,弃掉T-25细胞培养瓶中的培养基,加入2ml PBS清洗,再加入1ml 0.25%胰酶-EDTA消化细胞;
4.在显微镜下观察到细胞变圆,有细胞开始脱离瓶壁时,即可加入5ml人间充质干细胞无动物源培养基终止消化;
5.用移液器轻轻吹打瓶壁上剩余的细胞,并轻轻吹打将细胞吹散;
6.将细胞转移到15ml离心管中,1000rpm离心5min;
7.弃上清,加入15-20ml的人间充质干细胞无动物源培养基重悬细胞后转入T-75细胞培养瓶中或按适当比例传到 T-25细胞培养瓶中。确保细胞贴壁后融合度在25-50%之间,细胞密度在1×104 cells/cm2 (2.5×105 cells/T-25 瓶),混合细胞悬液,确保细胞均匀分布;
8.将细胞培养瓶置于37℃,5% CO2的无菌恒温培养箱中培养;
9.每两天用新鲜、预热的人间充质干细胞无动物源培养基进行换液。

间充质干细胞冻存
间充质干细胞冻存可用百恩维的“无DMSO无动物源细胞冻存液”,具体操作如下。
1. 细胞消化和计数,用胰酶对待冻存的细胞进行消化,并对细胞进行计数。
2. 1000rpm离心5分钟,去掉上清。
3. 根据细胞计数的情况,加入适量的冻存液,使细胞密度在1×106/ml左右(或根据自己希望达到的细胞密度)。
4. 轻轻地重悬细胞(务必重悬均匀),将重悬的细胞按等份加入到灭菌的冻存管(需提前做好标记或者贴上标签)中,旋紧冻存管盖。
5. 将冻存管放入程序降温冻存盒中,然后将冻存盒直接放入-80℃。
6. 第二天将细胞从-80℃转移到液氮中。

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◆产品描述 间充质干细胞培养基是专为人类间充质干细胞(包括脐带间充质、骨髓间充质、脂肪间充质、脐带血间充质等细胞)设计的无血清培养基。间充质干细胞培养基能维持间充质细胞的无分化生长,很好的保持细胞的形态特征,染色体核型等正常,并能够保证细胞的高增值率,及间充质干细胞的分化潜能。 ◆产品特点 1.明显的提高细胞生长率和存活率; 2.不干扰细胞代谢,不刺激细胞分化,多代扩增而不发生分化; 3.质量保证:按cGMP标准生产,配制用水符合国家药监局《人体细胞治疗研究和制剂质量控制指导原则》中注射用水标准。 ◆细胞增殖倍数对比 分别用翰林生物及进口品牌培养基培养牙龈间充质干细胞。第5天用台盼蓝染色计数。牙龈间充质干细胞在Coring基础培养基加10% FBS培养基中培养5天后细胞增殖了27倍;在翰林间充质干细胞培养基中培养的细胞5天后增殖了36倍。 ◆使用说明 在运输或储存(有效期内)过程中,如发现有浑浊现象,此为某些蛋白成分的析出,在使用前混匀即可,不影响细胞培养效果。石四药-翰林生物hs-sfm-10
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背景简介    青岛日水生物技术有限公司是一家高新科技生物技术企业,日水生物生产的模拟灌装产品主要包括硫乙醇酸盐流体培养基和胰蛋白胨大豆肉汤培养基,产品规格包括250g、1kg两种规格,也可以根据客户需求制成更大包装。大包装硫乙醇酸盐流体培养基和胰蛋白大豆肉汤培养基分别包括已辐照和未辐照两种。青岛日水生物严格控制产品质量,从干粉外观、pH、透明度、灵敏度、生长率、假阴性、假阳性、生长特征等方面严格把关。公司拥有成熟的研发团队和先进的生产设备,确保生产的日水牌培养基的技术先进性和质量稳定性。依据法规标准:2010版GMP附录一:无菌制剂    第四十七条无菌生产工艺的验证应包括培养基模拟灌装试验应根据产品的剂型以及培养基的选择性、澄清度、浓度和灭菌的适用性选择培养基。应尽可能模拟常规的无菌生产工艺,包括所有对产品的无菌特性有影响的关键操作,及生产中可能出现的各种干预和最差条件。培养基模拟灌装试验的首次验证,每班次应连续进行3次合格的试验。空气净化系统、设备、生产工艺及人员重大变更后,应重复进行培养基模拟灌装试验。培养基模拟灌装试验通常应按生产工艺每班次半年进行1次,每次至少一批。培养基的选择1.适应广谱微生物生长,包括细菌和真菌2.较好的澄明度,较小的粘度3.液体培养基易于除菌过滤4.常用培养基:大豆胰蛋白肉汤(TSB)5.厌氧培养基仅在特殊情况下使用(FTM)6.干粉工艺:具备与干粉产品流动性能相似的无菌TSB干粉或无菌安慰剂粉末(PEG,乳糖,甘露醇…)培养温度20-35℃,目标值±2.5℃,不少于14天;如选择两个温度,则每一温度下至少培养7天,从低温开始。风险控制�如果培养基中含有动物源性成分,可能导致朊蛋白污染(BSE)。那么很重要的是,培养基供应商能够提供证明,确认相关物质来源于没有牛海绵状脑病(BSE-free)的国家。�另一种方法是可以使用从植物中提取的TSB培养基。�TSB粉末通常遭受支原体的污染,并且无法在无菌过滤中去除。在这种情况下,可以在粉末灌装前,对粉末进行灭菌(使用γ射线)。�客户担心培养基原材料诸如牛肉浸膏,牛肉浸粉,肉蛋白胨,这些原材料可能是疯牛病BSE/TSE的风险来源。世界动物卫生组织(OIE)将各国发生疯牛病(BSE)和口蹄疫(FMD)疫情的风险划分为不同级别。澳大利亚、新日水11007
背景简介    青岛日水生物技术有限公司是一家高新科技生物技术企业,日水生物生产的模拟灌装产品主要包括硫乙醇酸盐流体培养基和胰蛋白胨大豆肉汤培养基,产品规格包括250g、1kg两种规格,也可以根据客户需求制成更大包装。大包装硫乙醇酸盐流体培养基和胰蛋白大豆肉汤培养基分别包括已辐照和未辐照两种。青岛日水生物严格控制产品质量,从干粉外观、pH、透明度、灵敏度、生长率、假阴性、假阳性、生长特征等方面严格把关。公司拥有成熟的研发团队和先进的生产设备,确保生产的日水牌培养基的技术先进性和质量稳定性。依据法规标准:2010版GMP附录一:无菌制剂    第四十七条无菌生产工艺的验证应包括培养基模拟灌装试验应根据产品的剂型以及培养基的选择性、澄清度、浓度和灭菌的适用性选择培养基。应尽可能模拟常规的无菌生产工艺,包括所有对产品的无菌特性有影响的关键操作,及生产中可能出现的各种干预和最差条件。培养基模拟灌装试验的首次验证,每班次应连续进行3次合格的试验。空气净化系统、设备、生产工艺及人员重大变更后,应重复进行培养基模拟灌装试验。培养基模拟灌装试验通常应按生产工艺每班次半年进行1次,每次至少一批。培养基的选择1.适应广谱微生物生长,包括细菌和真菌2.较好的澄明度,较小的粘度3.液体培养基易于除菌过滤4.常用培养基:大豆胰蛋白肉汤(TSB)5.厌氧培养基仅在特殊情况下使用(FTM)6.干粉工艺:具备与干粉产品流动性能相似的无菌TSB干粉或无菌安慰剂粉末(PEG,乳糖,甘露醇…)培养温度20-35℃,目标值±2.5℃,不少于14天;如选择两个温度,则每一温度下至少培养7天,从低温开始。风险控制�如果培养基中含有动物源性成分,可能导致朊蛋白污染(BSE)。那么很重要的是,培养基供应商能够提供证明,确认相关物质来源于没有牛海绵状脑病(BSE-free)的国家。�另一种方法是可以使用从植物中提取的TSB培养基。�TSB粉末通常遭受支原体的污染,并且无法在无菌过滤中去除。在这种情况下,可以在粉末灌装前,对粉末进行灭菌(使用γ射线)。�客户担心培养基原材料诸如牛肉浸膏,牛肉浸粉,肉蛋白胨,这些原材料可能是疯牛病BSE/TSE的风险来源。世界动物卫生组织(OIE)将各国发生疯牛病(BSE)和口蹄疫(FMD)疫情的风险划分为不同级别。澳大利亚、新日水13021

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