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昆虫杆状病毒技术服务

昆虫杆状病毒技术服务
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供应商信息

深圳市百恩维生物科技有限公司
商家诚信度:
成立时间:2010
入驻丁香通年限:8年
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产品详情

服务名称: 昆虫杆状病毒技术服务
简介: 技术服务
提供商: 百恩维生物
地区: 中国深圳
杆状病毒包装相关专题

杆状病毒是单一的、闭合环状的双链DNA分子,它的基因组可以在昆虫的细胞内进行复制和转录,因此杆状病毒常常被用于外源蛋白表达。

杆状病毒表达系统的特点:
1、外源基因克隆容量大:杆状病毒毒粒可以扩大,并能包装大的基因片段,目前尚不知杆状病毒所能容纳的外源基因长度的上限;
2、重组病毒易于筛选:重组了外源基因的Bacmid转染的昆虫细胞,可得到 100%阳性重组病毒;
3、具有完备的翻译后加工修饰系统:包括糖基化、磷酸化、酰基化、信号肽切除及肽段的切割和分解等;
4、高效表达外源基因的能力:与其它真核表达系统相比较,此系统最突出的特点就是能获得重组蛋白高水平的表达,最高可使目的蛋白的量达到细胞总蛋白的50%;
5、能同时表达多个基因:杆状病毒表达系统具有在同一细胞内同时表达多个基因的能力。

杆状病毒表达系统在很多方面都优于哺乳动物和细菌表达载体,因而被广泛应用,特别是一些在其它表达系统表达有困难的高价值蛋白质的表达,杆状病毒表达系统展现了广泛的发展前景。

百恩维生物在优化基因密码子、表达载体的设计和构建、融合对象和标签的选取等方面,拥有极其丰富的经验。百恩维生物杆状病毒蛋白表达系统包括杆状病毒载体构建、杆状病毒包装、蛋白表达的检测和大规模的蛋白生产,可为制药公司、生物技术公司和学术研究机构提供相应服务。

百恩维生物杆状病毒包装技术服务包含内容:
1、构建中间载体
2、重组Bacmid质粒
3、Bacmid质粒转染昆虫细胞
4、收获P1病毒;P2病毒扩增与收获
5、昆虫杆状病毒滴度测定、PCR鉴定

百恩维生物杆状病毒包装效果图,仅供参考:

                      Bacmid转染SF9细胞24h图                                       Bacmid转染SF9细胞48h图


                P2代杆状病毒感染sf9细胞24h图                              P2代杆状病毒感染sf9细胞48h图

相关技术服务:
昆虫细胞蛋白表达与纯化
慢病毒包装
非整合型慢病毒包装
腺病毒包装
腺相关病毒包装
杆状病毒包装
稳转细胞株构建

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慢病毒包装技术服务        慢病毒具有宿主范围广、感染能力强、具有整合能力等特点,被广泛应用于如神经元细胞、肝细胞、心肌细胞、肿瘤细胞、内皮细胞、干细胞等多种类型的细胞的感染、构建稳转细胞株和制备转基因动物。        百恩维生物的慢病毒包装采用的是第三代四质粒包装系统。第三代系统只保留了HIV-1基因组中的3个基因(gag、pol和rev),比第二代系统更加安全、产生的病毒滴度更高。        百恩维生物可以提供基因过表达(6kb以下)、shRNA(单条或者多条串联)、miRNA(pre-miRNA或者pri-miRNA)、可诱导表达(过表达或干扰)的慢病毒包装服务。        百恩维生物慢病毒包装技术服务包含内容:1. 慢病毒载体的构建:将目的基因克隆构建到慢病毒载体,根据不同的研究需求,有用于基因过表达的慢病毒载体、用于RNAi的慢病毒载体、用于启动子活性研究的慢病毒载体等;2. 慢病毒包装:慢病毒载体与辅助载体一起转染293T细胞进行包装,将包装好的病毒超速离心收集;3.  慢病毒鉴定与质量控制:载体测序鉴定、滴度测定、感染活性测定             常用的过表达慢病毒载体                                     常用的基因干扰慢病毒载体百恩维慢病毒包装效果图,仅供参考:                           红色光荧光对照                                         含目的基因的带红色荧光的慢病毒百恩维所用的红色荧光蛋白是tdTomato,tdTomato比EGFP亮6倍。                               绿色光荧光对照                                      含目的基因的绿色荧光的慢病毒百恩维所用的绿色荧光蛋白是ZsGreen1,ZsGreen1比EGFP亮2.5倍相关技术服务:稳转细胞株构建非整合型慢病毒包装腺病毒包装腺相关病毒包装杆状病毒包装 
杆状病毒表达系统(Baculovirus Expression Vector System,BEVS)凭借其简易的流程、高表达水平及翻译后的修饰功能,可在短时间内制备大规模翻译后修饰的蛋白,被广泛应用于病毒疫苗开发(如流感病毒和HPV疫苗开发)、信号蛋白制备、细胞因子制备等。我们杆状病毒-昆虫细胞表达平台主要采用AcNPV(苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒)-sf9(草地夜蛾细胞系)细胞和BmNPV(家蚕核型多角体病毒)-BmN细胞两种表达系统, 多表达系统、多宿主、多载体的选择性极大的提高了蛋白表达的成功率;同时采用交配辅助遗传整合克隆(MAGIC)系统,只需简单的细菌混合,就可以快速构建重组杆状病毒质粒,阳性率高,周期短。1、多表达系统、多宿主、多载体的选择性极大的提高了蛋白表达的成功率;2、采用交配辅助遗传整合克隆(MAGIC)系统,只需简单的细菌混合,就可以快速构建重组杆状病毒质粒,阳性率高,周期短;3、可提供详细的表达纯化条件,实验数据以及高滴度的病毒毒株。 服务流程 方案沟通   接受订单   质粒构建   蛋白表达   蛋白纯化   成果交付客户提供目的蛋白信息或基因序列,质粒或cDNA(也可以选择由我们瑞提供);蛋白询价信息表。最终交付已构建好的pfastbac质粒,bacmid质粒,P1、P2及P3代病毒、纯化所得蛋白;表达产物质量检测报告,包括载体构建方案、克隆实验图片、蛋白表达、纯化图谱等。 服务名称 服务项目 服务内容 交付结果 服务周期 服务报价 杆状病毒-昆虫细胞蛋白表达服务 1.获得重组供体质粒 基因的获得 核酸电泳图片 2周 请询价 PCR扩增产物酶切连接到本公司改造过的pFastBac载体上  转化E.coliDH10β 获得测序正确的重组质粒 2.病毒扩大化培养 构建重组杆状病毒质粒 重组杆状病毒质粒电泳图片 3-4周 请询价 重组杆状病毒质粒转染昆虫细胞 高滴度的病毒贮液 获得高滴度的病毒贮液   3.优化表达 huayunhy0036
非整合型慢病毒包装技术服务非整合型慢病毒包装系统是百恩维的核心技术之一,非整合型慢病毒是根据普通的慢病毒(Lent virus)改造而来。 一方面,该病毒具有整合型慢病毒宿主范围广、感染能力强的特点可有效地感染神经元细胞、肝细胞、心肌细胞、肿瘤细胞、内皮细胞、干细胞等多种类型的细胞,可以将外源基因有效地转导到目的细胞上,在细胞质内达到瞬时表达的效果。另一方面,避免了整合型慢病毒中基因整合到宿主染色体造成的危害,具有低免疫性、低危害的特点。另外可以装载的外源基因比AAV大很多,插入片段可达6kb,是一种有潜力应用于基因治疗的载体。百恩维生物可以提供基因过表达(6kb以下)、shRNA(单条或者多条串联)、miRNA(pre-miRNA或者pri-miRNA)、可诱导表达(过表达或干扰)的非整合型慢病毒包装服务。百恩维生物非整合型慢病毒包装技术服务包含内容:1. 慢病毒载体构建:将目的基因克隆构建到慢病毒载体,根据不同的研究需求,有用于基因过表达的慢病毒载体、用于RNAi的慢病毒载体、用于启动子活性研究的慢病毒载体等;2. 非整合型慢病毒包装:慢病毒载体与辅助载体一起转染293T细胞进行包装,将包装好的病毒超速离心收集;3.  非整合型慢病毒鉴定与质量控制:载体测序鉴定、滴度测定、感染活性测定百恩维生物最常用非整合型慢病毒载体:               非整合型慢病毒基因过表达载体                            非整合型慢病毒基因干扰载体慢病毒包装效果图,仅供参考:                               绿色光荧光对照                                         含目的基因的绿色荧光的慢病毒百恩维所用的绿色荧光蛋白是ZsGreen1,tdTomato比EGFP亮2.5倍。 相关技术服务:稳转细胞株构建慢病毒包装腺病毒包装腺相关病毒包装杆状病毒包装

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