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    GD-151 液体miRNA测序提取试剂盒

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    GD-151 液体miRNA测序提取试剂盒

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      • 货号:

        GD-151A

      • 保存条件:

        常温

      • 供应商:

        深圳艾德旺斯

      • 保质期:

        6个月

      • 英文名:

        GeneDo miRNA extraction kit for NGS (Liquid sample)

      • 数量:

        50ml/100ml

      • 规格:

        50ml

      GD-151 液体miRNA测序提取试剂盒


      规格:       50ml / 100ml
      产品号:   GD-151
      产品名称:GeneDo miRNA extraction kit for NGS (Liquid sample)
      生产商:    GeneDoTM
      储存条件: 常温
      有效期:     6个月

      用途:从血清、血浆、尿液及其他体液中提取miRNA,可以用于miRNA测序。

      说明:
      本产品可以从几乎所有类型的体液中获得高质量的miRNA同时利用非核酸助提取剂,增加测序后内源性miRNA的测序深度。

      步骤:
      血浆样品准备:
      1. 使用EDTA处理过的采血管收集约2ml的的全血两管,一管用于实验,另一管备用防止采血管渗漏 (请勿使用肝素处理的采血管)
      2. 1,600g 离心 10 分钟,分离血浆和细胞组分,将采集好的血浆转移至专门的冻存管中,按照每管200 μl 分装好,短期保存可放入- 20°C冰箱,长期保存请放入- 80°C冰箱或者液氮中。
      注意: :建议用非冷藏的新鲜的全血标本,采集后4小时内进行处理。
      血清样品准备:
      1.收集全血后,让血液在非促凝管中静置凝结。通常需要15-30分钟。
      2.在冷冻离心机中以1,600g离心10分钟除去凝块。所得上清就是血清,长期保存请放入- 80°C冰箱或者液氮中。

      尿液及其他体液准备:
      1.收集尿液及其他体液后,需去除游离的细胞。
      2.在冷冻离心机中以3000g离心5分钟除去游离细胞。所得上清用于提取microRNA或者冻存在-80度冰箱。

      助提取剂Solution GE的添加
      1. 向分装的好的200μl血浆样本中加入800μl的裂解液PLS,震荡混匀15秒至匀浆,颠倒混匀3-5次。
      (冻存的血浆样本在融化后, 3000g 离心 5 分钟,将上清转移至的新的离心管中)
      3.完全匀浆后,加入 2μl 助提取剂Solution GE
      如需后期测序质控对照,可加入GD-152 miRNA测序质控试剂盒产品)。
      RNA提取
      1.向上一步匀浆好的EP管中加入200ul蛋白沉淀液PD,并将其盖住。涡旋或剧烈摇动15s,充分混合。
      2.在室温(15-25°C)下,将EP管放置在实验台上静置2-3分钟。
      3.4℃以12,000g离心15分钟。离心后,样品分成3层:上层是含有RNA的无色水层,白色含有蛋白的中间层,和较低的红色有机层。
      3.将上层水相(~500 μl)转移到新的EP管中。避免接触到其他层。加入等体积的RNA 沉淀液 RD,使用移液枪上下吸取几次来彻底混匀。室温放置10-15min
      4. 将上一步中混合液取500 μl转入RNase-free吸附柱中,8,000 g, 离心30,弃掉流出液,再将剩余混合液转入RNase-free吸附柱中,8,000 g, 离心30,弃掉流出液。
      5.RNase-free吸附柱中加入750μl 的已经加入乙醇的清洗液WD 8,000  g, 离心30, 轻轻倒掉上流出液。
      6. 加入500μl 的清洗液WD 8,000  g, 离心2分钟, 轻轻倒掉上流出液。
      7. 12,000  g, 离心2分钟,去掉RNase-free吸附柱中残留的溶剂,弃掉2ml收集管。
      8.RNase-free吸附柱放入新的1.5 ml EP管,向吸附柱中加入15μl无核酸酶水,室温静置1 min12,000  g, 离心1分钟,弃掉吸附柱,测量RNA浓度后,将样品放于-80℃冰箱保存。

      本公司生产的GD-151 液体miRNA测序提取试剂盒,具备以下优势:
      1)适用范围广,可以从多种体液中提取microRNA
      2RNA产量高,可用于下游PCR实验,以及miRNA测序,可配合我公司GD-152 miRNA测序质控试剂盒产品


                                 




      详情请咨询艾德旺斯技术人员,email标题请标明产品号 GD-151 : tech@genedo.cc
      温馨提示:不可用于临床治疗。

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