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    RT-PCR

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    RT-PCR

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    • 上海市浦东新区张衡路200号3号楼3407J

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    • 提供商: 上海冷泉生物科技有限公司
      服务名称: RT-PCR检测技术服务
      Rt-PCR
      1.概念和原理
          RT-PCR称为逆转录PCR或反转录PCR,是指在体外将mRNA逆转录为互补cDNA后,再以此为模板通过PCR进行DNA扩增的技术。
      逆转录PCR(reverse transcription PCR)或者称反转录PCR(reverse transcription-PCR, RT-PCR),是聚合酶链式反应(PCR)的一种广泛应用的变形。在RT-PCR中,一条RNA链被逆转录成为互补DNA,再以此为模板通过PCR进行DNA扩增。

       

      RT-PCR,实验步骤包括RNA提取、反转录、PCR和琼脂糖凝胶电泳,以软件分析电泳条带的灰度值(IOD值),通过与内参基因的灰度值比较,判断目的mRNA的相对表达量。

      3复孔,1重复


      2.科研和临床应用
          主要用于特异基因mRNA表达水平的检测、病原体定性检测、获得特异基因的编码序列用于后期表达载体构建等领域。
      3.标本采集、保存、运输
      全血样本:用EDTA抗凝管收集2 ml全血,颠倒混匀抗凝管8-10次,-80℃保存,冷冻运输。组织样本:新鲜组织样本离体后,用预冷PBS或生理盐水快速将表面残留的血迹冲洗干净,切成黄豆大小,装入2 0mIEP管或体积更大的旋盖冻存管中,立即置于液氮中冷冻3-4 h以上,然后转移至-80℃或液氮中保存,冷冻运输。细胞样本:离心收集细胞(≥1×1 06个),加入适量(如使用TRIzol,通常为1 ml)细胞裂解液,反复吸打数次,直至看不见成团的细胞块,使之充分溶解于裂解液中形成清亮不粘稠的液体,-80℃保存,冷冻运输。

      RT-PCR实验服务内容:
      RNA的抽提与定量;
      引物设计及RT-PCR;
      琼脂糖电泳;
      图片分析;
      实验报告提交。

      实验交付:
      1、RNA浓度及荧光定量PCR原始数据;
      2、详细实验报告一份,含荧光定量PCR完整的实验步骤、使用仪器、软件设置参数等。


      收费标准/服务周期/提供结果:
      具体的实验费用以及实验周期欢迎咨询详谈,我们会依据您的方案及需求为您制定详细的实验方案与服务。
      【冷泉可以为您提供以下实验技术服务】

          我们将在免疫学,分子生物学,病理学,病理分子生物,代谢组学,生化技术,动物实验,蛋白组学实验,动物模型构建,细胞培养,基因组服务,病毒学,药物研究技术,核酸检测服务,芯片技术平台,微生物基因组测序……技术服务


      详情请咨询:  
      【公司网站】http//www.csbiopharma.com
      【公司电话】021-50409360
      【实验咨询】17521548073
      【公司邮箱】jiaoxing@csbiopharma.com
      公司地址】上海市浦东新区张衡路200号3幢3407J室



       

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