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    人白介素4(IL-4)Elisa试剂盒

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    人白介素4(IL-4)Elisa试剂盒

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      • 货号:

        C01131B

      • 样本:

        血清

      • 标记物:

      • 适应物种:

      • 应用:

        仅供科研

      • 检测方法:

        ELISA

      • 检测限:

        6个月

      • 供应商:

        上海彩佑实业有限公司

      • 数量:

        大量

      • 规格:

        48T/96T

      规格: 48T 产品价格: ¥600.0
      规格: 96T 产品价格: ¥2200.0
      试剂准备
      a、使用前所有试剂应置于室温平衡至少30分钟。
      b、本试剂盒可以直接加样,如浓度过高,可以进行适当比例的稀释,计算时应将结果乘以稀释的倍数建议先做预实验,以确定稀释倍数)
      c、洗涤液为25倍浓缩液,使用前将所有洗涤液倒入500ml1L的烧杯中,用双蒸水定容到500ml即为工作液。
      d标准品的稀释:先用标准品/样品稀释液浆标准品冻干粉定容到150μl,然后漩涡混匀30秒即为标准品原液(24小时内用完)5支干净的Eppendorf管,每管加150μl的标准品稀释液,分别标记上32ng/ml16ng/ml8ng/ml4ng/ml2ng/ml。取150μl标准品原液加入标记32ng/ml 的管中,混匀后同样取出150μl,加入下一管,以此类推直至最后一管。] (见下图)
      零孔:直接加标准品/样品稀释液。

      原液64ng/ml      32ng/ml     16ng/ml     8ng/ml      4ng/ml      2ng/ml
      e、生物素抗原的稀释低速离心,然后抽取生物素抗原稀释液1ml浓缩型生物素抗原中,漩涡混匀15,至冻干粉完全溶解,然后将所有液体倒入稀释液瓶中漩涡混匀后即为生物素抗原工作液(一周内用完)
      f亲和素-HRP的稀释低速离心,使浓缩液全部沉到管底,浓缩亲和素-HRP全部转移到稀释液瓶中漩涡混匀后即为亲和素-HRP工作液(一周内用完)
      6、样本前处理
      a标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20保存,但应避免反复冻融。
      b、血清:室温血液自然凝固10-20分钟,2000-3000/离心 20分钟左右。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
      c血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,2000-3000/离心 20分钟左右。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
      d尿液:用无菌管收集,2000-3000/离心 20分钟左右。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
      e细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。2000-3000/离心 20分钟左右。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS (PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。2000-3000/离心 20分钟左右。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
      f组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBSPH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。2000-3000/离心 20分钟左右。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
      7、洗板方法
      a、手工洗板:先洗去酶标孔中的的液体,在吸水纸上拍干,然后每孔加入300μl稀释好的洗涤液,轻轻摇晃30秒,然后甩掉,在吸水纸上拍干,重复4-5次。
      b、洗板机洗板:洗板机洗板比较便捷,但应操作熟练后使用。
      8、详细操作程序
      a、使用前请先将试剂盒在室温下平衡半小时。
      b、空白孔不加样,只加显色剂AB和终止液用于调零。
      c、标准品孔:每孔加入稀释好的标准品50μl,零孔加入标准品/样品稀释液50μl,然后加入生物素抗原工作液50μl
      d、样品孔:加入样品50μl,然后加入生物素抗原工作液50μl
      e、轻轻摇晃,盖上封板膜,37℃培养箱中孵育30min
      f、将25倍浓缩洗涤液用蒸馏水25倍稀释后备用。
      g、第一次洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
      h、加入50μl亲和素-HRP到标准品孔和样品孔中,轻轻摇晃,盖上封板膜,37℃培养箱中孵育30min
      i、第二次洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干

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    上海彩佑实业有限公司

    • 联系人:

      杨凤

    • 所在地区:

      上海市闵行区元江路5500号第1幢E143室

    • 业务范围:

      细胞库 / 细胞培养,试剂

    • 经营模式:

      生产厂商,代理商,科研机构

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