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双荧光素酶启动子分析实验—服务
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辉骏生物
双荧光素酶报告基因实验服务选辉骏—经验丰富案例多
双荧光素酶报告基因实验原理-辉骏生物
荧光素底物在荧光素酶作用下会发光,且光强度能反应荧光素酶的蛋白表达量。而荧光素酶的蛋白表达量,又和启动子活性、mRNA的稳定性及翻译效率等有关。利用这个特点,将待测启动子、UTR等序列与荧光素酶ORF框融合表达,再检测其发光强度,就能判断这些序列对蛋白表达的影响。这就叫荧光素酶报告基因检测。为了减少实验误差,一般会同时转染一个能稳定表达荧光素酶的质粒作为内参,所以叫双荧光素酶报告基因检测。
双荧光素酶报告基因实验流程-辉骏生物
双荧光素酶报告基因实验技术应用-辉骏生物
1、检测启动子活性;2、检测转录因子与目标启动子的相互作用;3、检测miRNA对靶基因调控作用。
双荧光素酶报告基因实验*辉骏生物优势
1.近十年服务经验,众多服务案例,服务成果得到优秀期刊认可;2.对启动子、转录因子、miRNA影响荧光素酶表达的具体机制理解深刻,对DNA-蛋白互作方面有独到见解,擅长针对客户情况提出合适的方案建议;3.自有分子及细胞生物实验平台,能有效制定并执行优质的实验路线;4.售后技术支持将一直保持到客户发表文章,确保客户安心进行下游实验及投稿。
双荧光素酶报告基因服务信息-辉骏生物
项目名称
客户提供
结果交付
实验周期
启动子活性分析
细胞样本 实验信息表(待测启动子序列,细胞培养信息等)
1、报告基因载体(启动子不同截短形式) 2、双荧光素酶检测结果 3、实验报告
5-6周(不含细胞培养周期)
1、报告基因载体(野生和突变型) 2、转录因子表达载体 3、双荧光素酶检测结果 4、实验报告
双荧光素酶报告基因实验 客户文献
1. Tang W.W. et al: The p300/YY1/miR-500a-5p/HDAC2 signalling axis regulates cell proliferation in human colorectal cancer. Nature Communications. 2019,IF = 12.121. 【研究内容】:研究发现,miR-500A-5p在CRC组织中的低表达与恶性进展相关,可促进肿瘤的生长与转移。作者通过双荧光素酶报告分析实验证明miR-500A-5P可直接靶向HDAC2,抑制HDAC2介导的裸鼠大肠癌细胞增殖;此外,YY1与miR-500A-5P的启动子结合并负调控其转录。互作实验与异种移植实验进一步表明,miR-500A-5p通过靶向p300/YY1/HDAC2轴在结直肠癌中发挥肿瘤抑制作用,为结直肠癌治疗提供新的潜在候选基因。 使用相关技术:启动子活性检测、luciferase荧光素酶检测实验
2. Hou P.F. et al: KIF4A facilitates cell proliferation via induction of p21-mediated cell cycle progression and promotes metastasis in colorectal cancer. Cell Death Dis. 2018,IF = 6.304. 【研究内容】:研究表明BRCA1缺陷型细胞的有丝分裂受到影响,存在纺锤体检查点缺陷。客户检测和纺锤体检查点密切相关的几个基因,发现BRCA1缺陷型Mad2基因表达水平变化明显,由此推测BRCA1是通过影响Mad2的表达,从而影响有丝分裂的。DNA pull down及ChIP-qPCR实验证实了BRCA1可以和Mad2启动子结合,进一步研究发现BRCA1确实上调Mad2从而影响有丝分裂。 使用相关技术:双荧光素酶检测服务、启动子活性分析实验外包
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