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Biomics Biotech
microRNA技术服务(化学合成,载体构建,慢病毒包装,,PCR检测及引物,靶基因报告载体构建)
产品名称 |
规格
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纯化方式
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价格
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交货日期
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Mimics
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2OD
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HPLC
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350
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5-7个工作日
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Inhibitors
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2OD
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HPLC
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350
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5-7个工作日
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Mimics negative control
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1OD
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HPLC
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118
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现货
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Inhibitors negative control
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1OD
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HPLC
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118
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现货
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FAM Mimics NC
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1OD
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HPLC
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148
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现货
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注::产品冻干粉,呈白色干粉。在DEPC水溶液中即可溶解,储存于-20℃。本规格按照一般实验需要的量。如大量合成,价格另议。
具体请参照:http://www.biomart.cn/infosupply/1065390.htm
载体名称 | 启动子 | 筛选基因 | 标记基因 |
pRNAi-U6.1/Neo | U6 | Neomycin | GFP |
pRNAi-CMV3.2/Neo | CMV | Neomycin | GFP |
pRNAi-CMV4.1/Neo (pSilencer4.1) |
CMV | Neomycin |
A. 优点:
MiRNA 荧光素酶报告载体具有以下优点:
· 功能性检测:是一种功能性的分析方法,用于监测细胞内miRNA介导的靶基因的调控
· 可定量分析: miRNAs介导的调控可以通过荧光素酶基因的表达进行定量监测
· 可构建稳定细胞系–载体可用于构建表达报告基因的稳定细胞系.
B. 原理:
pLuc-3UTR报告载体是一系列基于荧光素酶报告的构建体,用于监测miRNA介导的细胞内靶基因调控。每个载体含有CMV启动子、荧光素酶基因、3 ' UTR 靶基因和SV40终止子序列。MiRNA的表达并与3 ' UTR结合,导致荧光素酶基因表达的抑制。因此miRNA介导的特异靶的调控可通过荧光素酶活*进行监测。比较二个样本荧光素酶活性可解析调控,明确差异。
本公司的可免费提供的microRNA靶基因报告载体 有:
载体名称 | 启动子 | 标记基因 |
pGL4.17 | CMV | 荧光素酶基因 |
pGL-Basic | CMV | 荧光素酶基因 |
pGL3-Control | CMV | 荧光素酶基因 |
pRL-TK | CMV | 荧光素酶基因 |
产品名称 |
产品特点
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交货日期
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价格
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Pre-lenti-miRNA
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U6、GFP、neo筛选标记
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20个工作日
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2000
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Pre- lenti -miRNA NC
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U6、GFP、neo筛选标记
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15个工作日
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1000
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注: 所得质粒已溶解在Buffer中,应放在-20℃冰箱保存;已转化质粒菌液应加50%甘油,-80℃冰箱保存
microRNA慢病毒包装系统具体讲参照:《ViraPowerTM Packaging Mix pLenti expression plasmid DNA》 (Invitrogen)
详细参照:http://www.biomart.cn/infosupply/327076.htm
4.microRNA实时荧光定量PCR检测
实时荧光定量PCR(Real Time PCR,qRT-PCR)避免了传统PCR 以终产物检测定量产生的偏差,提高实验的重复性。与常规PCR 相比,实时荧光定量PCR 具有特异性更强、有效解决PCR 污染问题、自动化程度高等特点,已成为国际公认的核酸分子定量的标准方法。该技术已被广泛用于检测细胞mRNA 表达量的变化;比较不同组织的mRNA 表达差异;验证基因芯片,siRNA 干扰的实验结果。它涉及到DNA或RNA 样品制备,反转录及PCR 反应等一系列重要的分子生物学过程。
配套产品:qPCR实时荧光定量一步法试剂盒 BK2100BK BK2100
设计目的片段和内参基因的qPCR引物:利用Primer5.0 等软件设计PCR引物及探针。我们公司免费为客户设计引物和探针。
详细参照:http://www.biomart.cn/infosupply/ff8080811b3b755e011b44285bd50287.htm http://www.biomart.cn/infosupply/324859.htm
5.microRNA特异引物(部分产品有现货,具体见microRNA产品说明)
microRNA(miRNA)是一类有大约22 个核苷酸组成的非编码小分子RNA,其广泛存在于真核生物中。miRNA 在个体发育的不同时期及不同组织中有不同的表达模式,都表明了其在发育和分化中起有重大的调控作用。迄今为此,对miRNA 的检测方法主要有Northern Blot 等基于分子杂交的方法,这些方法敏感度低、耗时长、RNA 的用量较大。miRNA Q-PCR DetectionKit 采用了国际上公认的核酸检测标准技术――Real-Time PCR 技术来对miRNA 进行检测,其具有快速、特异性强、灵敏度高等优点。
EzOmicsTM miRNA qPCR Detection Primer Set包含了miRNA特异的逆转录引物,以及qPCR正、反向引物套装。其中茎凸环结构状的miRNA特异逆转录引物可特异性的转录成熟的miRNA。再利用高度特异的正反向引物,使miRNA定量即灵敏又高度特异。EzOmicsTM miRNA qPCR Detection Primer Set 提供了一种最低能检测到5 个拷贝目标miRNA 的高灵敏度的检测方法,并且具有一个7 个数量级的动态变化范围,反应的模板可以是总RNA 或者已纯化的小RNA等。
名称 | 介绍 | 量 |
RT Primer | miRNA Reverse Transcription Primer | 2 nmol |
Forward Primer | miRNA Forward Primer | 2 nmol |
Reverse Primer | miRNA Reverse Primer | 2 nmol |
DEPC-H2O | DEPC-treated, DNase and RNase-free water | 1.5ml |
配套产品:miRNA引物检测试剂盒 BK1010
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siRNA&miRNA技术手册(百奥生物).pdf 附 (下载 268 次)