北京现货DyLight594标记山羊抗人IgG(H+L)优惠

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名称：北京现货DyLight594标记山羊抗人IgG(H+L)优惠
编号：WE0358
规格：100μl
品牌：百奥莱博
英文名：Goat Anti-Human IgG, DyLight 594 Conjugated
本产品为DyLight 594标记的经抗原亲和纯化的山羊抗体，特异识别人IgG，最大吸收光谱为591nm，最大发射光谱为616nm。使用本产品检测灵敏度高，本底低，对其他种属IgG无明显交叉反应，常用于免疫荧光和流式细胞等标记检测。DyLight 594是近年来新开发的一种荧光素，较普通的荧光素具有较高的荧光强度和耐光性，在pH4-9的范围内均具有较高的荧光信号，被激发后产生明亮的橙红色荧光。

免疫原：人IgG
缓冲液：0.01M PBS，50%甘油，pH7.6
稳定剂：15 mg/ml BSA(不含IgG和蛋白酶)
防腐剂：0.05%叠氮*
荧光团：Amax=591; Emax=616
应用范围：对于大多数实验(1：100-800)

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·无内毒素质粒中提试剂盒
编号：WE0166
英文名称：NoEndo Plasmid Midi Kit
规格：50次
  内毒素是质粒提取中常见的污染物，由于真核细胞对内毒素非常敏感，因此，如果质粒中含有内毒素会大大降低真核细胞转染效率。本试剂盒提供一种简单、快捷、高效提取无内毒素质粒的新方法，提取的质粒最大限度去除内毒素，并能有效去除基因组DNA、RNA、蛋白等污染。

  本试剂盒通过碱裂解法裂解细胞，新型硅基质膜高效专一的结合质粒DNA，同时采用特殊的缓冲液系统和除内毒素过滤柱，有效去除内毒素、蛋白等杂质。由本试剂盒所得质粒纯度高、质量稳定，特别适用于细胞转染，同时也可用于DNA测序，PCR，基于PCR的突变，体外转录，转化细菌，内切酶消化等下游实验。

试剂盒组成：

 

组份	50次
Buffer P1	30ml
Buffer P2	30ml
Buffer E3	30ml
Buffer PS	15ml
Buffer PW(浓缩液)	10ml
Endo-Free Buffer EB	10ml
RNase A(10 mg/ml)	600μl
过滤柱FM及收集管	50套
吸附柱DL及收集管	50套

自备试剂：无水乙醇、异丙醇。

实验前准备及重要注意事项/strong>：
1、所有组分可在干燥、室温(15～30℃)环境稳定保存1年，更长时间保存可置于2～8℃，加入RNase A的Buffer P1 置于2～8℃可稳定保存6个月。
2、第一次使用前，将RNase A溶液全部加入到Buffer P1中，混匀，置于2–8℃保存，使用前需在室温中放置一段时间，恢复至室温后使用。
3、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明在Buffer PW中加入无水乙醇。
4、使用前请先检查Buffer P2 和Buffer E3是否出现结晶或沉淀，如有结晶或沉淀现象，可在37℃水浴几分钟，即可恢复澄清。
5、注意不要直接接触Buffer P2和Buffer E3，使用后应立即盖紧盖子。
6、提取质粒的量和纯度与细菌培养浓度、菌株种类、质粒大小、质粒拷贝数等因素有关。

操作步骤：
1、取5-15ml过夜培养的菌液，加入离心管(自备)中，13000rpm(~～～16200×g)离心1分钟收集细菌，尽量吸弃全部上清。
2、向留有菌体沉淀的离心管中加入500μl Buffer P1(请先检查是否已加入RNase A)，使用移液器或涡旋振荡器充分混匀，悬浮细菌沉淀。
注意：如果菌块未彻底混匀，将会影响裂解效果，使提取量和纯度偏低。
3、向离心管中加入500μl Buffer P2，温和地上下颠倒混匀8-10次，使菌体充分裂解，室温放置3-5分钟。此时溶液应变得清亮粘稠。
注意：温和混匀，不要剧烈震荡，以免打断基因组DNA，造成提取的质粒中混有基因组DNA片段。如果溶液未变得清亮，提示可能菌量过大，裂解不彻底，应减少菌体量。
4、向离心管中加入500μl Buffer E3，立即上下颠倒混匀8-10次，此时出现白色絮状沉淀，室温放置5分钟。13000rpm离心5分钟，吸取上清，将上清加入过滤柱FM中(已装入收集管)，13000rpm离心1分钟过滤，将收集管中的滤液转移到离心管(自备)中。
注意：
1)Buffer E3 加入后应立即混匀，避免产生局部沉淀。
2)吸附柱的最大容积为750μl，所以上清液请分两次过滤，并混合于同一自备离心管中。
5、向滤液中加入450μl异丙醇，上下颠倒混匀。
6、柱平衡：向已装入收集管的吸附柱中加入200μl Buffer PS，13000rpm离心2分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
7、将步骤5中滤液与异丙醇的混合溶液转移到平衡好的吸附柱(已装入收集管)中。
8、13000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
注意：吸附柱的最大容积为750μl，所以第5步中所得溶液分多次过柱。
9、向吸附柱中加入750μl Buffer PW(请先检查是否已加入无水乙醇)，13000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液。
10、将吸附柱重新放回收集管中，13000rpm离心1分钟。
注意：这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除，乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR等)。
11、将吸附柱置于一个新的离心管(自备)中，向吸附膜的中间部位加入100-200μl Endo-Free Buffer EB，室温放置2-5分钟，13000rpm离心2分钟。-20℃保存质粒。
注意：
1)为了增加质粒的回收效率，可将得到的溶液重新加入到吸附柱中，室温放置2-5分钟，13000rpm离心2分钟。Endo-Free Buffer EB在65-70℃水浴预热，适当延长吸附和洗脱的时间，可以增加提取效率。
2)质粒拷贝数较低或>10 kb时，Endo-Free Buffer EB在65-70℃水浴预热，可以增加提取效率。

储存条件：室温(15～30℃)


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·Taq酶抗体
编号：WE0121
英文名称：Taq Antibody
规格：500U|2500U
  本品是抗Taq酶鼠单克隆抗体，适用于Hot Start PCR。Taq Antibody与Taq酶结合后能抑制DNA聚合酶活性，进而能够在低温条件下有效抑制引物的非特异性退火及引物二聚体引起的非特异性扩增。Taq Antibody在PCR反应最初的DNA变性步骤中变性，DNA聚合酶活性恢复，达到热启动效果。因此无需对Taq酶抗体进行特殊失活处理。

产品特点;
1、在37℃，可抑制>95%的聚合酶活性。
2、可提高PCR反应的特异性和灵敏性，包括复杂的人基因组DNA或cDNA模板，低拷贝的模板，多重PCR等。
3、PCR反应速度快于普通化学修饰的聚合酶。

活性定义：Taq Antibody与Taq DNA Polymerase混合，25℃孵育15 min后，将在37℃，30 min条件下抑制97%以上的1 U的Taq DNA Polymerase活性的Taq Antibody量定义为1U。

使用方法：
将Taq DNA Polymerase和Taq Antibody等体积混合，20-25℃下放置15 min冰上待用。

注意：通过实验，我们建议Taq Antibody和 Taq DNA Polymerase混合的分子数之比为13:1较为合适，实际操作中由于引物、目的产物或Taq DNA Polymerase不同，可以摸索一系列的比例以得到最合适的结果。

以下举例为以人基因组DNA为模板，扩增300 bp的片段的PCR反应体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。

1、PCR反应体系

试剂	50μl反应体系
10×PCR Buffer	5μl
dNTP Mix，10μM each	1μl
Forward Primer，10μM	1μl
Reverse Primer，10μM	1μl
Template DNA	4μl
Taq酶和抗体的混合液	0.36μl
ddH2O	up to 50μl

2、PCR反应条件，可以按照各种PCR用DNA Polymerase的常规PCR反应条件进行PCR反应。

步骤	温度	时间	循环数
预变性	94℃	2 min
变性	94℃	30 s	25-35 个循环
退火	55-65℃	30 s
延伸	72℃	30 s
终延伸	72℃	2 min

储存条件：-20℃，避免反复冻融。


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·游离DNA样本保存管(5ml)
编号：WE0396
英文名称：Cell-Free DNA Storage Tube(5ml)
规格：5ml×5支|5ml×50支
游离DNA保存管可直接用于血样的采集与运输，并稳定其中的游离DNA(Cell-Free DNA)，是由EDTA抗凝剂和特殊的保护剂组成，能够有效抑制血浆中的核酸酶，并避免血液有核细胞中基因组DNA的释放。该产品适用于无创产前筛查与一些疾病的早期诊断相关的研究。
游离DNA保存管中血液样本可按大多数商业化试剂盒进行游离DNA提取，提取后的游离DNA可应用于下游的检测与分析。同时，该产品也能够用于血液有核细胞中的基因组DNA的保存。

·生物素化兔抗山羊IgG(H+L)
编号：WE0389
英文名称：Rabbit Anti-Goat IgG, Biotin Conjugated
规格：100μl
本产品为生物素标记的经亲和纯化的兔抗体，特异识别山羊IgG，检测灵敏度高，本底低，可用于Western Blot、ELISA、免疫组化、免疫荧光和流式细胞分析检测。
生物素(Biotin)与链霉亲和素(Streptavidin，SA)具有极高的亲和力，反应呈高度专一性。每个链霉亲和素分子具有4个生物素分子结合位点，因此，链霉亲和素可同时以多价形式结合生物素。生物素化的抗体与辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶标记的链霉亲和素联合使用，将检测信号级联放大，最后通过显色反应或化学发光可检测到微量蛋白。

免疫原：山羊IgG
缓冲液：0.01M PBS，50%甘油，pH7.6
稳定剂：无
防腐剂：0.05%叠氮*
应用范围：
WB(1：1000-20000)
ELISA(1：2000-50000)
Immunohisto/Cytochemistry(1：100-500)
Fluorescence Immunohisto/cytochemistry(1：100-500)
Flow cytometry(1：100-500)

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