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多聚体抗兔IgG-HRP

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供应商信息

武汉博士德生物工程有限公司
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成立时间:1993
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产品详情

品牌: BOSTER
货号: SV0002
应用范围: 免疫组化
克隆性:
保存条件: 4℃
规格: 3ml/6ml/12ml
规格: 3ml 产品价格: ¥260.0
规格: 6ml 产品价格: ¥420.0
规格: 12ml 产品价格: ¥760.0

产品货号:SV0002

产品名称:多聚体抗兔IgG-HRP

规格/价格:3ml/260元(40~50张);6ml/420元(80~100张);12ml/760元(160~200张);50ml/2880元;100ml/5580元

原理:博士德公司根据市场及客户需求,以独特配方生产的两步法免疫组化检测试剂盒--- Super Vision( SV)系列,Super Vision 两步法免疫组化试剂盒是博士德独立研究的高敏感性试剂盒。用聚合标记方法将过氧化物酶连接到二抗上,形成类似于章鱼的超大分子抗体-酶聚合物,替代传统方法中的二抗和三抗。这种聚合物拥有强大的信号放大能力,同时有很强的组织细胞渗透力,特别适合免疫组化的应用。此系列检测试剂与传统的三步法比较具有简单,快速,高敏感,低背景等特点。

试剂盒中内容:
1.封闭液:5% BSA  用于组织切片的封闭。
2.二抗:聚合HRP标记抗兔IgG。 
3.3%H2O2。
优点:
即用型,方便,快捷。
高灵敏检测
低背景.
适合多种抗体
 
A.石蜡切片染色程序: 
1.载玻片防脱片剂处理:可选择 APES 或 Poly-Lysine。捞片后置烤箱 58-60 ℃30-60 分钟以使
切片紧密粘附。 
2.切片脱蜡至水。 
3.3%H2O2,室温 10 分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗 2 分钟×3 次。 
4.根据抗原抗体情况,必要时对切片进行抗原热修复或消化处理。 
5.滴加封闭液,室温 10 分钟。甩去多余液体, 不洗。 
6.滴加适当稀释的一抗(兔 IgG),20-37 ℃ 1~2 小时或 4℃过夜。0.01M PBS 洗 2 分钟×
3 次。(一抗的稀释度、孵育时间、温度与染色强度、背景有直接关系。一般来说,阳性染色
强度不够时,可提高一抗浓度和延长孵育时间;背景过高时,可降低一抗浓度和缩短孵育时
间。) 
7.滴加聚合 HRP 标记抗兔 IgG(SV-0002), 37℃孵育 30 分钟,PBS 或 TBS 冲洗,2 分钟
×3 次。 
8.DAB 显色:按 100ml 0.02M PBS 或 TBS 中加入最终浓度为 25-50mgDAB,0.03%的 H2O2。
或使用 DAB 显色试剂盒(AR1022)。取 1ml 蒸馏水,加试剂盒中 A,B,C 试剂各 1 滴,混匀后加至
切片。室温显色, 镜下控制反应时间,一般 5-30 分钟。蒸馏水洗涤。 
9.苏木素轻度复染、脱水,透明,封片、观察。 
 
B.血涂片,细胞和冰冻切片染色程序 
1.载玻片经防脱片剂处理(Poly-L-Lysine)。抗凝血经分层离心后涂片;培养细胞也可涂片或
贴片生长;冰冻切片室温风扇吹干。 
2.固定方案用 4%多聚甲醛或丙酮固定 10-20 分钟。 
3.3%H2O2 1 份+纯甲醇 4 份混合,室温孵育 30 分钟,以灭活内源性过氧化物酶。蒸馏水洗 1-2
次。 
其余步骤和石蜡切片 5-9 步相同。 
 
如果冰冻切片直接染色结果不理想时,可以参照石蜡切片对切片进行热修复,方法和石蜡切片
4-9 步相同。 
温馨提示:不可用于临床治疗。
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参加该活动的客户,可以免费试用本公司自产IHC/IF抗体(具体事宜询公司)限2017年12月份组化操作步骤1、-石蜡切片:切片置于65℃烘箱中,烘片2小时,取出用二甲苯脱蜡,梯度酒精水化,用PBS(PH7.4)冲洗三次,每次5分钟-冰冻切片:先放5min,浸入4℃丙酮固定15min,0.01M PBS漂洗,5min×3;-细胞爬片:细胞爬片以PBS浸洗3次,每次2-3min,然后4%多聚甲醛固定1~2h,取出盖玻片固定于载玻片上, 0.01M PBS漂洗,5min×3次;-细胞涂片:2000转/分离心悬浮细胞5 -10 min,弃上清,多聚甲醛固定。2、 石蜡切片根据每一种抗体的要求,对组织抗原进行相应的修复,其它标本则不用。 3、  切片3%过氧化氢溶液室温下孵育10分钟,以阻断内源性过氧化物酶。PBS冲洗3×5′。 4、  甩去PBS液,每张切片加1滴或50μl的第一抗体,室温下孵育60分钟或4℃过夜,抗体稀释浓度建议参阅每种抗体的说明书。 5、  PBS冲洗3×5′。 6、  甩去PBS液,每张切片加50μl酶标二抗,室温下孵育30-60分钟。 7、  PBS冲洗3×3′。8、甩去PBS液,每张切片加100μl新鲜配制的DAB溶液,显微镜下观察3-10分钟,阳性显色为棕色。 9、 蒸馏水或自来水冲洗,苏木素复染,0.1%盐酸分化,自来水冲洗,PBS冲洗返蓝。 10、DAB显色,切片经过梯度酒精脱水干燥,(二甲苯透明),中性树胶封固。 

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