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多聚体抗兔IgG-HRP

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武汉博士德生物工程有限公司
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成立时间:1993
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产品详情

品牌: BOSTER
货号: SV0002
应用范围: 免疫组化
克隆性:
保存条件: 4℃
规格: 3ml/6ml/12ml
规格: 3ml 产品价格: ¥260.0
规格: 6ml 产品价格: ¥420.0
规格: 12ml 产品价格: ¥760.0

产品货号:SV0002

产品名称:多聚体抗兔IgG-HRP

规格/价格:3ml/260元(40~50张);6ml/420元(80~100张);12ml/760元(160~200张);50ml/2880元;100ml/5580元

原理:博士德公司根据市场及客户需求,以独特配方生产的两步法免疫组化检测试剂盒--- Super Vision( SV)系列,Super Vision 两步法免疫组化试剂盒是博士德独立研究的高敏感性试剂盒。用聚合标记方法将过氧化物酶连接到二抗上,形成类似于章鱼的超大分子抗体-酶聚合物,替代传统方法中的二抗和三抗。这种聚合物拥有强大的信号放大能力,同时有很强的组织细胞渗透力,特别适合免疫组化的应用。此系列检测试剂与传统的三步法比较具有简单,快速,高敏感,低背景等特点。

试剂盒中内容:
1.封闭液:5% BSA  用于组织切片的封闭。
2.二抗:聚合HRP标记抗兔IgG。 
3.3%H2O2。
优点:
即用型,方便,快捷。
高灵敏检测
低背景.
适合多种抗体
 
A.石蜡切片染色程序: 
1.载玻片防脱片剂处理:可选择 APES 或 Poly-Lysine。捞片后置烤箱 58-60 ℃30-60 分钟以使
切片紧密粘附。 
2.切片脱蜡至水。 
3.3%H2O2,室温 10 分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗 2 分钟×3 次。 
4.根据抗原抗体情况,必要时对切片进行抗原热修复或消化处理。 
5.滴加封闭液,室温 10 分钟。甩去多余液体, 不洗。 
6.滴加适当稀释的一抗(兔 IgG),20-37 ℃ 1~2 小时或 4℃过夜。0.01M PBS 洗 2 分钟×
3 次。(一抗的稀释度、孵育时间、温度与染色强度、背景有直接关系。一般来说,阳性染色
强度不够时,可提高一抗浓度和延长孵育时间;背景过高时,可降低一抗浓度和缩短孵育时
间。) 
7.滴加聚合 HRP 标记抗兔 IgG(SV-0002), 37℃孵育 30 分钟,PBS 或 TBS 冲洗,2 分钟
×3 次。 
8.DAB 显色:按 100ml 0.02M PBS 或 TBS 中加入最终浓度为 25-50mgDAB,0.03%的 H2O2。
或使用 DAB 显色试剂盒(AR1022)。取 1ml 蒸馏水,加试剂盒中 A,B,C 试剂各 1 滴,混匀后加至
切片。室温显色, 镜下控制反应时间,一般 5-30 分钟。蒸馏水洗涤。 
9.苏木素轻度复染、脱水,透明,封片、观察。 
 
B.血涂片,细胞和冰冻切片染色程序 
1.载玻片经防脱片剂处理(Poly-L-Lysine)。抗凝血经分层离心后涂片;培养细胞也可涂片或
贴片生长;冰冻切片室温风扇吹干。 
2.固定方案用 4%多聚甲醛或丙酮固定 10-20 分钟。 
3.3%H2O2 1 份+纯甲醇 4 份混合,室温孵育 30 分钟,以灭活内源性过氧化物酶。蒸馏水洗 1-2
次。 
其余步骤和石蜡切片 5-9 步相同。 
 
如果冰冻切片直接染色结果不理想时,可以参照石蜡切片对切片进行热修复,方法和石蜡切片
4-9 步相同。 
温馨提示:不可用于临床治疗。
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产品货号:SA2025(适于一抗为兔多克隆抗体)价格/规格:420元/盒工作原理:聚合标记法是武汉博士德生物工程有限公司独创的一种酶标记方法,其敏感性比普通酶标法有明显提高。用于Western Blotting 的免疫学检测,更能体现其优点。不仅能大量地节约一抗,更重要的是使条带更清晰,甚至能检测出普通酶标法无法检测出的微量条带。DAB 是过氧化物酶最重要的显色剂之一,反应产物为不溶于水、二甲苯和醇的棕色沉淀物,适合于免疫印迹的显色反应。本产品采用特殊配方,具有操作简单,储存稳定,信号灵敏度高,持续时间长,背景低,结果易保存等优点。保存条件:-20℃冷冻保存。DAB 显色试剂应避光保存。有效期:一年。试剂盒的内容:(1)封闭试剂:10 g蛋白干粉×1包。(2)浓缩抗体稀释液:20 ml×1瓶,为10倍浓缩液。(3)过氧化物酶标记山羊抗兔IgG,效价1:200-400。(4)DAB显色试剂,含显色剂A:DAB×40倍浓缩液,3ml。显色剂B:H2O2×40倍浓缩液,3ml。显色剂C:×40倍TBS浓缩缓冲液(含氯化镍),3ml。 需要而未提供的试剂和器材:1. 转印了蛋白样品的NC 膜或PVDF 膜:通过SDS-PAGE 凝胶电泳分离蛋白质抗原,将PAG 胶上的蛋白质转印到硝酸纤维素膜(NC 膜)或PVDF 膜上。2. 稀释缓冲液:使用中性稀释缓冲液即0.02 M PBS(AR0030)或0.02 M TBS(AR0144)配制封闭液和抗体稀释液。0.02 M PBS(pH7.2-7.6):1000 ml 蒸馏水加Na2HPO4 2.8 g ,NaH2PO4 0.4 g,NaCl 8.5 g。如果用的是含水磷酸盐,应加上分子式中水的含量。0.02M TBS (pH7.2-7.6):1000ml 蒸馏水中加Tris 2.42g, NaCl 9g; 纯乙酸或浓盐酸调节pH 值(7.2-7.6)。3. 洗涤缓冲液:每1000ml 中性稀释缓冲液中加入0.5 ml Tween20 即可。4. 一抗:选择适合的一抗,用抗体稀释液稀释相应的一抗,一般特异性抗体工作浓度为1μg/ml, 具体的稀释度取决于特异性的一抗和膜上的抗原的量。5. 摇床:膜的封闭、抗体孵育和洗涤都需平稳摇晃,需在摇床上操作。6. bostersa2025

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