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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
99
- 供应商:
诺博莱德
- 规格:
2×200ml/KIT
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文献和实验基45mL,10%已热灭活的自体血浆(5mL),NK-II 300μL,NK-III 250mg(NK-III为每支500mg,用1mLNK-IV培养基溶解,取一半用于本试剂盒)以及 IL-2(完全培养基中IL-2终浓度为1000IU/mL),将制备好的单个核细胞(MNC)按1-1.5M cells/mL的细胞密度接种于已包被的含有50mL NK细胞完全培养基的T75瓶中; 注意: 1)每支IL-2 使用1mL NK-IV培养基溶解后,可存于2-8°C冰箱,存放时间不超过两周。建议将IL-2溶解
基本方案: 由于所用Mab只能检测C57BL背景小鼠体内的NK1.1CD3- NK细胞,故本方案适用于C57BL/6或者C57BL/10(以及H2b 、d、q 同系小鼠)小鼠脾脏细胞。 清楚杂细胞所用的单克隆抗体的活性对本方案至关重要。单克隆抗体可以买到,并且其杂交瘤可以从ATCC得到,因此建议检测单克隆抗体的活性以保证实验成功。最佳补体和细胞浓度也需要通过实验确定。 实验材料: 1. C57BL/6或者C57BL/10小鼠 2. Tris/NH4Cl裂解
买。 3、SpinSep® DM-M小鼠专用的淋巴细胞分离液与人用的密度不同,不能混用。 4、可订制的抗体包括:CD2,CD3,CD4,CD5,CD8,CD11b,CD45R,Gr-1,TER119,F4/80,Neutrophil (7-4),Pan NK (DX5) 5、如果您有自己的大鼠抗小鼠IgG1抗体,并希望用SpinSep® 进行负选,您只需购买SpinSep® 密度粒子和小鼠淋巴细胞分离液。
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