目前,在对蛋白质进行鉴认或者纯化,甚至是分析与其他分子的相互作用时,蛋白质以融合蛋白质的形式加以表达。通过在目标蛋白质的N末端或者C末端人为地加入氨基酸(把此处添加的氨基酸称作tag),根据tag的性质,可以对欲表达的蛋白质很方便地进行纯化。
使用组氨酸tag(His-tag)进行纯化的方法,是利用了在组氨酸侧链位置处的咪唑环和金属离子(Ni2+ 等)相螯合的性质,可以使由基因重组技术制备的His-tag融合蛋白质的纯化效率大大提高。
MagExtractor-His-tag-是主要用于纯化大肠杆菌中进行表达的His-tag融合蛋白质的试剂盒。添附的磁珠是与镍螯合的琼脂糖磁珠,与His-tag的选择性结合能力非常出色,能够从菌体破碎液中直接纯化His-tag融合蛋白质。另外,本试剂盒也添付了使磁珠发挥更出色效果的纯化用buffer。
本试剂盒尚不适用于本公司生产的自动核酸抽提装置(MFX-2000,2100)。
1)Schmitt.J.,Hess,H., and Stunnenberg, H.G., Molecular Biology, Reports., 18,223,1993.
特征
1 .专用纯化用 buffer
・本试剂盒中,包含了以纯化His-tag融合蛋白质所必须的磁珠到进行过最优化重组buffer类等所有成份。无需再进行复杂的buffer制备。
2 .能够短时间内完成纯化
・最短能够在15分钟内从菌体破碎液中纯化出His-tag融合蛋白质。
3 .优秀的吸附能力
・使用添附的磁珠时,每1μl磁珠可以纯化5~10μg的融合蛋白质。
※根据融合蛋白质的分子量,其吸附能力会有所变化。
4 .适应 screening 用途
・由于与磁珠结合的His-tag融合蛋白质能够通过磁性加以分离,因此无需事先去除残留菌体就可以进行纯化。适用于多数样品的screening等需要缩短时间的场合。