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T7 RNAi Transcr
企业认证
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T7 RNAi Transcription Kit
充足
南京诺唯赞生物科技有限公司
25rxn/50rxn
用于体外dsRNA 合成
可以转录siRNA和长片段dsRNA;
产量高达20-80 μg;
RNA磁珠可快速高效的纯化转录产物
图1. 500 bp dsRNA 2%琼脂糖凝胶电泳图
1:DL2000 Plus DNA Marker;2和4:500 bp dsRNA酶解前后产物(双端转);3和5: 500 bp dsRNA酶解前后产物(混合转)。
图2. siRNA 12% PAGE电泳检测结果
1:siRNA转录产物;2:siRNA转录双酶消化产物;3:单链模板;4:双链退火模板
图3. siRNA干扰绿色荧光蛋白表达
左图为GFP质粒与negative control GFP siRNA共转染24 h后的293T细胞;右图为GFP质粒和positive GFP siRNA共转染24 h后的293T细胞。
T7 RNA ploymerase可识别带有T7启动子的DNA模版,以四种NTP 为底物,体外转录合成RNA。T7 RNAi Transcription Kit 是在T7 High Yield RNA Transcription Kit 基础上为转录双链RNA 而设计优化的版本,可用于转录21 bp 的siRNA 和长片段的dsRNA。转录产物经纯化后可用于阳离子脂质体、磷酸钙共沉淀、电穿孔、DEAE- 葡聚糖及显微注射等方法介导的RNAi 实验。一般情况下,一个反应可产生20 μg-80 μg 的RNA。
组分
TR102-01(25 rxns)
TR102-02(50 rxns)
Box 1
T7 Enzyme Mix
50 μl
100 μl
10 × Transcription Buffer
10 × Annealing Buffer
250 μl
500 μl
NTP Mix
200 μl
400 μl
DNase I
25 μl
RNase T1(100 U/μl)
RNase T1 Dilution Buffer
300 μl
600 μl
Control Template*
5 μl
10 μl
Box 2
RNase-free H2O
5 ml
RNA Clean Beads
2 ml
4 ml
* 本试剂盒提供的Control Template 为500 bp 双端含T7 启动子的PCR 产物,浓度为0.5 μg/μl。
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