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Murine RNase inhibitor(40U/μl)
2年
北京百奥莱博科技有限公司
-20℃
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销*(代"售")RNase抑制剂(鼠源)厂家现货,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:RNase抑制剂(鼠源)厂家现货
规格:2KU
编号:SY0266
品牌:百奥莱博
RNase抑制剂(RNase inhibitor)是人的胎盘中存在的一种特异性核糖核酸酶(RNase)抑制剂,能够特异地与RNase以非共价键结合形成复合体从而使RNase失活。该产品是以可溶形式在大肠杆菌中表达纯化的重组鼠源RNase抑制剂,能够广泛抑制各种RNase (RNase A, B, C),此外经过RT-PCR、RT-qPCR检验,本品能与Reverse Transcriptase、M-MLV (H-) Reverse Transcriptase以及各种DNA Polymerase兼容。与人源RNase inhibitor相比,本品不含人源蛋白中的两个对氧化非常敏感的半胱*酸,因而具有更高的抗氧化活性,且更加适合于对高DTT敏感性实验 (如qPCR)。
该产品可用于cDNA第一链合成、多核糖体的分离(Polysome isolation)、体外转录和体外无细胞翻译系统。
活性定义:抑制5 ng RNase A活性的50%所需要的酶量定义为1个活性单位 (U)。RNase A 的活性通过水解Cyclic 2, 3-CMP 生成3-CMP定量求得。
质量控制:
核酸外切酶残留检测:200 U本品和0.6 μg λ-Hind III在74℃下反应1小时,DNA的电泳谱带不发生变化。
核酸内切酶残留检测:200 U本品和0.6 μg Supercoiled pBR322 DNA在74℃下反应1小时,DNA的电泳谱带不发生变化。
大肠杆菌残留DNA残留检测:50 μl体系中,加入200 U本品,以ddH2O为模板,扩增E. coli 16 s rDNA基因。35个循环后进行1%琼脂糖凝胶电泳,EB染色,无扩增条带。
储存条件:-20℃,有效期2年。
应用实例
1.在RNase free离心管中配制如下混合液:
RNase free ddH2O | to 20μl |
5×Buffer | 4μl |
Oligo (dT)18 (50 μM) | 1μl |
dNTP Mix (10 mM each) | 1μl |
RNase Inhibitor (40 U/μl) | 1μl |
Reverse Transcriptase (200 U/μl) | 1μl |
模板RNA | 10 pg-2.5 μg |
ddH2O | to 50 μl |
d5×HS Pfu buffer (with 10 mM MgSO4) | 10 μl |
d25 mM MgSO4a | optional |
ddNTP Mix(10 mM each)b | 1 μl |
dDMSOc | optional |
d5×PCR Enhancerd | optional |
d模板DNAe | optional |
dForward Primer(10 μM) | 2μl |
dReverse Primer(10 μM) | 2 μl |
HS Pfu DNA Polymerase(1 U/μl)f | 1 μl |
模板种类/扩增长度 | <1 kb | 1 kb~10 kb | >10 kb |
基因组DNA | 50 ng~250 ng | 100 ng~300 ng | 150 ng~400 ng |
质粒或病毒DNA | 10 pg~20 ng | 10 pg~20 ng | 1 ng~30 ng |
cDNA | 1~5 μl(不超过PCR反应总体积的1/10) |
循环步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
预变性a | 95℃ | 30 sec~3 min | 1 |
变性b | 95℃ | 5~10 sec | 25~35循环 |
退火c | 45℃~72℃ | 10~30 sec | |
延伸d | 72℃ | 15~30 sec/kb | |
彻底延伸 | 72℃ | 5~10 min | 1 |
循环步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
预变性 | 92℃ | 2 min | 1 |
变性 | 92℃ | 5~10 sec | 25~35循环 |
延伸 | 68℃ | 15~30 sec/kb | |
彻底延伸 | 68℃ | 5~10 min | 1 |
循环步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
预变性 | 98℃ | 3 min | 1 |
变性 | 98℃ | 10 sec | 25~35循环 |
退火 | 45℃~72℃ | 10~30sec | |
延伸 | 72℃ | 15~30 sec/kb | |
彻底延伸 | 72℃ | 5~10 min | 1 |
Vial | 稀释液体积(μl) | 2mg/ml BSA体积(μl) | BSA终浓度(μg/ml) |
A | 0 | 100 | 2000 |
B | 25 | 75 | 1500 |
C | 50 | 50 | 1000 |
D | 125 | 75 | 750 |
E | 150 | 50 | 500 |
F | 350 | 50 | 250 |
G | 375 | 25 | 125 |
H | 395 | 5 | 25 |
I | 400 | 0 | 0=Blank |
表一BSA标准品体系配制(微孔板检测,线性范围20-2000μg/ml)* |
名称 | 耐受浓度 |
Sodium bicarbonate | 100 mM |
Sodium phosphate | 25 mM |
2-Mercaptoethanol | 0.01% |
Glycercol (pure) | 10% |
Glycine-HCl, pH 2.8 | 100 mM |
HEPES | 100 mM |
Hydrochloric acid | 100 mM |
Leupeptin | 10 mg/L |
Nickel chloride (in TBS, pH8.0) | 10 mM |
Nonidet P-40 (NP-40) | 5% (w/v) |
Octyl β -glucoside | 5% (w/v) |
Potassium thiocyanate |
3.0 M |
SDS | 5% |
Sodium acetate, pH 4.8 | 200 mM |
Sodium azide | 0.20% |
Sodium hydroxide | 100 mM |
Sucrose | 40% |
Triton X-100 | 5% |
Triton X-114, X-305,X-405 | 1% |
Tween-20, Tween-60, Tween-80 | 5% |
Zwittergent | 1% |
ACES, pH 7.8 | 25 mM |
Acetone | 10% |
Acetonitrile | 10% |
Ammonium sulfate | 1.5 mM |
Aprotinin | 10 mg/L |
Bicine, pH 8.4 | 20 Mm |
Bis-Tris, pH 6.5 | 33 mM |
Borate, pH 8.5 | 50 mM |
Brij-35 | 5% |
Brij-52 | 1% |
Brij-56, Brij-58 | 1% |
BugBuster protein Extraction Reagent |
no interference (undiluted) |
Calcium chloride (in TBS, pH 8.0) | 10 mM |
CelLytic B Reagent | no interference (undiluted) |
Cesium bicarbonate | 100 mM |
CHAPS | 5% |
Cobalt chloride (in TBS, pH 8.0) | 0.8 mM |
CytoBuster Protein Extraction Reagent |
no interference (undiluted) |
Deoxycholic acid | 5% |
Dithioerythritol (DTE) | 1 mM |
Dithiothreitol (DTT) | 1 mM |
DMF | 10% |
DMSO | 10% |
EDTA | 10 mM |
EPPS, pH 8.0 | 100 mM |
Ethanol | 10% |
Ferric chloride (in TBS, pH 8.0) | 10 mM |
Glucose | 10 mM |
Glycerol | 10% |
Guanidine-HCl | 4 M |
Imidazole, pH 7.0 | 50 mM |
MES, PH6.1 |
100mM |
Methanol | 10% |
MOPS, pH7.2 | 100mM |
N-Acetyglucosamine(10mM)in PBS, pH7.2 | 10mM |
Octyl β- thioglucpyranoside |
5% |
PIPES, pH6.8 | 100mM |
PMSF | 1 mM |
PopCulture Reagent (Cat. No. 71092) | no interference (undiluted) |
Reportasol Extraction Buffer | no interference (undiluted) |
Sodium chloride | 1 M |
Sodium citrate, pH 4.8 or pH 6.4 | 200 mM |
Sodium ortho-vanadate in PBS, pH7.2 | 1mM |
Span 20 | 1% |
TBS (150 mM NaCl, 100 mM Tris-HCl, pH 8.0) | no interference (undiluted) |
Thimerosal | 0.01% |
TLCK | 0.1mg/L |
TPCK | 0.1mg/L |
Tricine, pH 8.0 | 25 mM |
Triethanolamine, pH 7.8 | 25 mM |
Tris | 250 mM |
Tris(hydroxypropyl)phosphine (THP) | 1 mM |
Urea | 3M |
Zinc chloride (in TBS, pH 8.0) | 10 mM |
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