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    PCR-聚合酶链式反应

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    • 一、服务介绍
      聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction ,PCR)是80年代中期发展起来的体外核酸扩增技术。它具有特异、敏感、产率高、快速、简便、重复性好、易自动化等突出优点;能在一个试管内将所要研究的目的基因扩增至百万倍,使肉眼能直接观察和判断。聚合酶PCR实验从微量物质甚至一个细胞中扩增出足量的DNA供分析研究和检测鉴定。
      二、实验原理
      类似于DNA的 天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性-退火-延伸三个基本反应步骤构成:
          模板DNA的变性:模板DNA经加 热至93℃左右一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备;
          模板DNA与引物的退火(复性):模板DNA经加热变性成单链后,温度降至55℃左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合;
          引物的延伸:DNA模板-引物结合 物在TaqDNA聚合酶的作用下,以dNTP为反应原料,靶序列为模板,按碱基配对与半保留复制原理,合成一条新的与模板DNA 链互补的半保留复制链重复循环变性-退火-延伸三过程,就可获得更多的”半保留复制链”,而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需 2~4分钟,2~3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。到达平台期(Plateau)所需循环次数取决于样品中模板的拷贝。
      三、实验流程
      1.预变性;
      2.循环:包括三个步骤(DNA变性,引物退火,引物延伸);
      3.最后延伸
      四、服务说明
      1.客户提供:
         样本材料如血细胞等;试剂盒(可代购)。        
      2.公司提供:
         扩增出的足量DNA;电泳图
      3.实验周期:
         1-3天
      五、质量承诺
           提供足量DNA,清晰的图片,及DNA的分析研究和检测鉴定报告。

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