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    多光谱--组织多色免疫荧光技术

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    多光谱--组织多色免疫荧光技术

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    • 商家诚信度 
    • 入驻年限  6年
    • 武汉市东湖新技术开发区高新大道858号光谷生物医药产业园二期B18栋

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    • 提供商: perkin elmer
      服务名称: 武汉巴菲尔生物技术服务有限公司
      规格:
      多光谱--组织多色免疫荧光技术
       


      技术介绍

      同一张组织切片上实现多达7种染色
      摆脱一抗种属来源束缚,实现抗体自由选择
      组织原位类流式分析
      单一细胞多重表达标记实现组织原位观察
      增强抗体灵敏度达1000倍



      实验原理


      Opal是一套基于酪酰胺信号放大技术(TSA,TyramideSignal Amplification)的多标记免疫组化染色方案,为组织样品特别是FFPE(福尔马林固定石蜡包埋)样品进行染色,并且允许同一样本中使用同一种属来源的不同一抗进行多标记复合染色。配合多光谱成像分析系统,可以获得高信噪比(扣除背景自发荧光)的图像,甚至是多达7~10种标记的同步染色和共定位及定量分析。

       

      软件与设备


      配合PerkinElmer的多光谱成像系统Vectra及PerkinElmer独有的inForm高级图像分析软件,通过“圈选-训练”的方式教会软件辨识特定的组织类型,进一步精准识别单个细胞,甚至对胞核、胞浆、胞膜中各自的蛋白表达量进行定量分析。可实现组织原位类流式聚类分析,识别不同的细胞类别或亚型及其在不同组织中的分布特点。通过软件识别的组织类型,可以作为算法标准指导仪器在新的玻片上自动识别和采集目标,实现高达200片的全自动精准取样扫描。

       

      多光谱组织成像解决方案

       

      武汉巴菲尔生物技术服务有限公司提供多光谱组织成像解决方案,为您提供完整的技术服务,包含抗体验证优化,样本多色标记,扫描及数据分析。
      涵盖以下领域:
      1.样品多重染色标记;
      2.样品打分对比分析;
      3.组织原位类流式分析;
      4.组织芯片多指标标记及相关性分析。

       

      技术对比


        Opal/TSA多标记免疫荧光 传统免疫荧光
      靶点数目 不受限制(最多可同时染色7-10种) 一般标记3种(含DAPI),>3种标记难度较大
      一抗种类 同一种属的不同抗体即可满足要求 不同种属的不同抗体
      二抗种类 连接辣根过氧化物酶的同种属二抗 连接荧光探针的不同种属二抗
      染色策略 任何样本无需任何染色策略,简单的重复前一步的染色过程,样本/靶点的差异不影响染色过程,使用简单方便 样本抗原的空间位置的差异,需要设计复杂的染色策略。样本/靶点的差异导致染色策略的差异,染色过程复杂、多变
      染色效果 高染色分辨率和染色特异性,信号强度强,淬灭时间更长,无背景影响,各靶点的信噪比大大提高,尤其适合组织基于单细胞的定量分析 亮度较弱,容易淬灭,各种抗体间存在互相影响,背景较高,对基于单细胞的定量分析不利。
      应用范围 二抗具备通用性,因此实验室中所有的研究领域均可使用 二抗不具备通用性,实验室中应用领域受到局限



      18篇近期发表的高分文献

      1、

      非小细胞肺癌组织,TILs:CK、CD3、CD8、CD20;三种免疫调控蛋白 PD-L1、IDO-1、B7-H4的表达相关性。

      Schalper, K. A., et al. (2017). "Differential Expression and Significanceof PD-L1, IDO-1, and B7-H4 in Human Lung Cancer." Clin Cancer Res 23(2): 370-378. IF 8.738

      2、

      黑色素瘤组织,CD8、PD1、S100、Sox10,PD-1 抗体药物治疗病人复发机理。

      Zaretsky, J. M., et al. (2016). "Mutations Associated with Acquired Resistance to PD-1 Blockade in Melanoma." N Engl J Med 375(9): 819-29. IF 59.558

      3、

      Merkel 细胞癌组织,NSE、CD8、CD68、PD1、PD-L1 综合分析免疫治疗前后肿瘤组织微环境状态变化。

      Nghiem, P. T., et al. (2016). "PD-1 Blockade with Pembrolizumab in Advanced Merkel-Cell Carcinoma." N Engl J Med 374(26): 2542-52. IF 59.558

      4、

      结直肠癌组织,CD8、GZMB、CK、NKp46;比较转移和非转移病人肿瘤组织微环境和免疫评分的特点和差异。

      Mlecnik, B., et al. (2016). "The tumor microenvironment and Immunoscore are critical determinants of dissemination to distant metastasis." Sci Transl Med 8(327): 327ra26. IF 16.264

      5、

      小鼠脾脏和种植瘤组织,CD3、CD4、CD8、FoxP3、F4/80、PD-L1,多色标记染色方法的建立和优化。

      Feng, Z., et al. (2016). "Multispectral Imaging of T and B Cells in Murine Spleen and Tumor." J Immunol 196(9): 3943-50. IF 4.985

      6、

      头颈癌组织,PD-1、OX40、FoxP3、CD3,判断免疫调节蛋白在肿瘤组织微环境中的表达部位、共定位关系和丰度比例。

      Montler, R., et al. (2016). "OX40, PD-1 and CTLA-4 are selectively expressed on tumor-infiltrating T cells in head and neck cancer." Clin Transl Immunology 5(4): e70. IF

       

       

       

      如何运用定量病理系统对具体的肿瘤案例进行分析的文章,也一一列举出来了。

      1、 

      多色标记判断 CD8 和 PD-L1 的定位关系,同时复染 S100 和 Sox10 准确界定肿瘤区域。

      Zaretsky, J. M., et al. (2016). "Mutations Associated with Acquired Resistance to PD-1

      Blockade in Melanoma."   N Engl J Med 375(9): 819-29. IF 59.558

      2、

      多标记 NSE、CD8、CD68、PD1、PD-L1 综合分析肿瘤组织微环境状态。

      Nghiem, P. T., et al. (2016). "PD-1 Blockade with Pembrolizumab in Advanced Merkel-Cell Carcinoma." N Engl J Med 374(26): 2542-52. IF 59.558

       3、

      多标记染色并统计 PD-1、PD-L1、CD8 等分子标志的定位表达,并对细胞增殖、毒性、干扰素表达等进行检测。

      Tumeh, P. C., et al. (2014). "PD-1 blockade induces responses by inhibiting adaptive immune resistance." Nature 515(7528): 568-71. IF 38.138

      4、

      多标记检测 αSMA、CK8 的定位关系,统计分析阳性细胞数目或依据信号强度进行自动化病理评分。

      Zheng, X., et al. (2015). "EMT Program is Dispensable for Metastasis but Induces Chemoresistance in Pancreatic Cancer." Nature 527(7579): 525-30. IF 38.138

      5、

      全自动化 TMA 扫描和批量定量分析,利用光谱成像对 DAB 染色光密度进行精准定量。

      Ding, Z., et al. (2011). "SMAD4-dependent barrier constrains prostate cancer growth and metastatic progression." Nature 470(7333): 269-273. IF 38.138

      6、

      光谱成像精准定量拆分交叠的 DAB 和 Perma Red 信号,分析 CCL28 和 HIF1α 蛋白表达的相关性,并判断肿瘤的预后相关性。

      Facciabene, A., et al. (2011). "Tumour hypoxia promotes tolerance and angiogenesis via CCL28 and T(reg) cells." Nature 475(7355): 226-30. IF 38.138

      7、

      多标记分析 AR、FoxA1、HOXB13 蛋白的共定位关系,发现三者在前列腺肿瘤细胞中

      具有明显的共表达趋势。

      Pomerantz, M. M., et al. (2015). "The androgen receptor cistrome is extensively reprogrammed in human prostate tumorigenesis." Nat Genet 47(11): 1346-51. IF 31.616

      8、

      以多标记共表达为特征识别处于上皮间质转化阶段的肾脏细胞,判断其 AQP1 蛋白的表达情况,寻找肾纤维化中 EMT 与 AQP1 表达的关系。

      Lovisa, S., et al. (2015). "Epithelial-to-mesenchymal transition induces cell cycle arrest and parenchymal damage in renal fibrosis." Nat Med 21(9): 998-1009. IF 30.357

      9、

      光谱成像记录明场双色复染样品,改以模拟荧光形式呈现 CD15 和 CD66b 的共定位关系。

      Pallett, L. J., et al. (2015). "Metabolic regulation of hepatitis B immunopathology by myeloid derived suppressor cells." Nat Med 21(6): 591-600. IF 30.357

      10、

      多色标记显示 β 半乳糖苷酶的表达与胰岛素和高血糖素的定位关系。

      Suriben, R., et al. (2015). "β-Cell Insulin Secretion Requires the Ubiquitin Ligase COP1."Cell 163(6): 1457-1467. IF 28.710

      11、

      光谱识别和定量分析小鼠肝脏中人源干细胞表达的水平。(军事医学科学院)

      Wang, Y., et al. (2016). "Conversion of Human Gastric Epithelial Cells to Multipotent Endodermal Progenitors using Defined Small Molecules." Cell Stem Cell 19(4): 449-461. IF 22.387

      12、

      全自动 TMA 扫描,DAB 着色强度光谱定量,智能软件评分,借此判断 VDR 分子在前列腺癌中的预后价值。

      Hendrickson, W. K., et al. (2011). "Vitamin D receptor protein expression in tumor tissue and CCL28 and T(reg) cells." Nature 475(7355): 226-30. IF 38.138 prostate cancer progression." J Clin Oncol 29(17): 2378-85. IF 20.982

       


       

      图片展示




      公司简介

              武汉巴菲尔生物技术服务有限公司成立于2009年,总部和实验中心位于武汉市东湖新技术开发区高新大道858号光谷生物医药产业园二期B18栋。
            公司面积4000余平方米,实验工作人员200余人,拥有分子生物学平台,免疫学平台,细胞生物学平台,病理学平台,动物实验平台,载体构建平台,六大技术平台。立足于生命科学领域,8年的技术积累,树立科研技术服务行业标杆。公司主要致力于为广大科研客户提供经济可靠的技术服务,以及科研相关产品的研发和销售。




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