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    【上市公司】DEAE高流速琼脂糖层析预装柱

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    【上市公司】DEAE高流速琼脂糖层析预装柱

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      • 货号:

        C2-0132-16-01-1

      • 保修期:

        5年

      • 现货状态:

      • 供应商:

        西安蓝晓科技新材料股份有限公司

      • 数量:

        大量

      • 规格:

        1*1ml


      DEAE高流速琼脂糖层析预装柱产品说明书
      1.产品介绍
           DEAE高流速琼脂糖层析预装柱是预先将DEAE高流速琼脂糖层析介质装进空柱里,客户购买后可直接连接注射器或层析系统使用,节省时间,提高工作效率。同时工厂专业装填保证了柱效和重复性,进而保证了实验结果的可靠度。预装柱由空柱管、上下筛板、塞头分布器、上下堵头、柱帽及层析介质组成。空柱管采用生物兼容PP材质,无毒性,具有生物学惰性,筛板为PE材质。层析介质为二乙胺基乙基键合在琼脂糖形成的带有弱碱阴离子基团的层析分离介质,离子交换容量高,特异性吸附少、流速快。
         
      2.规格 :1ml(预装柱)、5ml(预装柱)
      3.性能介绍
      预装柱性能      产品名称 DEAE高流速琼脂糖层析预装柱
       
      规格 1ml 5ml
      柱床体积 1ml 5ml
      柱床尺寸 0.7×2.5cm 1.6×2.5cm
      推荐流速 1ml/min 5ml/min
      最大流速 4ml/min 20ml/min
      筛板孔径 10μm
      耐压 0.3MPa
      工作温度 4~40℃
      pH适用范围 2~12(长时间);1~14(短时间)
      化学稳定性 在以下液体中稳定:所有常用的水相缓冲液;1mol/L NaOH;8mol/L 尿素;6mol/L 盐酸胍;70% 乙醇
      层析介质性能 基质 Seplife 6FF
      配基 -O-CH2CH2-N+(C2H5) Cl-
      形状 球形
      粒径(μm) 50~160
      离子交换容量 0.11~0.16mmol/ml介质
      蛋白质吸附容量 110mgHSA/ml介质
       
      4.使用方法
      对于通过AKTA系统纯化用户可直接链接预装柱使用,对于一般手动紫外检测用户,利用鲁尔接口可将蠕动泵、软管、预装柱、核酸检测仪器连接使用,也可将几个预装柱首尾相串联使用,达到更优纯化效果。
      4.1平衡
      用2~5个柱体积的初始缓冲溶液进行平衡,建议流速为100 cm/h。观察检测器的变化,直到电导率、pH值等参数不变。
      4.2上样
      样品的预处理:样品需用0.45μm滤膜过滤,再上样,以免堵塞层析柱。上样量根据样品的性质和层析介质的量进行选择,也可通过线性实验找到最佳上样量。
      4.3淋洗
      用2~3个柱体积的平衡缓冲液进行淋洗,观察检测器的变化,直到电导率、pH值等参数基本不变。
      4.4洗脱
      可用恒定洗脱、梯度洗脱或者阶跃洗脱。一般推荐使用增大盐浓度的梯度洗脱。
      5.再生、清洗、保存
      5.1预装柱再生
      (1)用高盐浓度的缓冲液(含1~2mol/L NaCl)按操作流速冲洗3~5个柱体积,接着用平衡液洗到平衡3~5个柱体积。
      (2)再生时若有失活蛋白质或脂类物质洗不掉,可用在位清洗法除去。
      5.2在位清洗
      (1)去除强结合的蛋白质或脂类物质:1mol/L NaOH洗2个柱体积,8mol/L尿素洗2个柱体积,30%异丙醇洗2个柱体积,平衡缓冲液洗2个柱体积。
      (2)去除内毒素热原:1mol/L NaOH清洗1~2h,速度50cm/h,再用无热原的1mol/L NaCl溶液置换(OH-置换为Cl-)。
      (3)在位清洗可有效去除介质上的杂质,反向清洗效果更佳。
      6.注意事项
      l   使用时保证柱子和缓冲液的温度一致,避免柱床内产生气泡,影响纯化效果。
      l   本产品保存条件为20%乙醇,4~8℃长期储存,不能使柱子冷冻。
      l  2-25℃,常压,避光运输。
      l  仅供科研实验使用。
       
      7.预装柱常见问题解答
      出现的问题 可能原因 解决办法
      流出柱子的液体减少或消失 柱子出口关闭或泵不工作
       
      脂蛋白或蛋白聚集物沉淀了
       
      样品过于黏稠
       
      滤膜、接口或管道堵塞
       
      柱子中微生物生长
      打开出口,检查泵有没有泄露迹象
      使用前过滤样品及缓冲液,阻止脂蛋白,避免蛋白聚集
      用缓冲液适当对样品进行稀释
      检查各环节,如有堵塞进行清除,或更换柱子
      分离柱不用时将其保存于20%乙醇溶液中,对其进行在位清洗
      目的蛋白峰不能同其他峰分开 样品加载不正确
       
      错误的PH或离子强度的缓冲液
       
       
      洗脱条件不是最佳
       
      柱子过载
      柱子装填柱效差
       
      分离过程由于稳定剂的去除而导致蛋白在柱子中沉淀
      检查柱床表面及滤膜是否被污染
      检查缓冲液的pH及离子强度,保证前一个运行后对柱子进行了再平衡,检查运行条件是否和要求
      改变洗脱条件。改用更平缓的梯度,降低流速
      减少样品加载量
      检查柱效,如有必要更换柱子
      调整洗脱液以维持蛋白稳定性。
      蛋白不结合或不按预期洗脱下来 蛋白质或脂沉淀在柱子滤膜或柱子里了。
      在储存过程中样品发生了改变
       
      蛋白在洗脱液中不稳定或失活
       
      错误的PH或离子强度的缓冲液
      蛋白产生集聚并同填料紧密结合
      分离柱平衡不完全
       
      清洗柱子,检查缓冲液的pH及离子强度。
      制备新鲜样品。
       
      确定蛋白质稳定的pH及离子强度
      检查缓冲液的pH及离子强度,重新准备缓冲液
      进行在位清洗
       
      重复或延长平衡步骤直到pH及电导达平衡水平。
      色谱图中的峰非常平缓或不均匀 柱子中产生通道 重新装柱或更换柱子
      样品峰拖尾 起始缓冲液错误,或样品不与色谱柱结合 调整pH,检查起始缓冲液的离子强度
      色谱图峰较小 样品在选定波长吸收差 检查检测器的吸收范围,如不满足要求,使用另一波长检测
      运行中压力升高 柱床被压缩
      样品浑浊
       
      pH错误导致沉淀
      离子强度增加脂蛋白产生沉淀
      重新装柱或使用新柱
      增加样品溶解性,使用前进行膜过滤
      校准pH,重新配置新溶液。
      提前出去脂蛋白
      柱床有气泡 缓冲液或样品未进行脱气
      环境温度发生改变
      彻底脱气
      缓冲液若在冰箱保存使用前需是温度达到恒定室温
      柱子避免加热升温
      柱床有裂缝 大体积气体渗漏柱中 检查连接点是否有泄露,或更换柱子
       
      8.订货信息
       
      产品名称 货号 包装规格 价格/元
      DEAE高流速琼脂糖凝胶预装柱
       
      C2-0132-16-01 1×1ml /
      C2-0132-16-05 8×1ml /
      C2-0132-01-01 1×5ml /
      C2-0132-01-03 5×5ml /
       

      蓝晓科技生命科学部主营业务:生物层析纯化介质(琼脂糖、葡聚糖、树脂基)、层析预装柱;纯化介质的选择、定制与使用指导;纯化工艺的开发、优化与定制服务。

      联系方式:18192726252 029-81104050

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    • 所在地区:

      西安市高新开发区锦业路135号蓝晓科技园

    • 业务范围:

      耗材,技术服务,试剂

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