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北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括免疫印迹及免疫沉淀用(WB/IP)裂解液 蛋白质研究在内的一系列分子生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:免疫印迹及免疫沉淀用(WB/IP)裂解液 蛋白质研究
规格:100ml
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
编号:SY0318
本品细胞/组织裂解液,WB/IP裂解液,是一种非变性条件下的裂解液,含有sodium pyrophosphate、β-glycerophosphate、EDTA、sodium orthovanadate和leupeptin等多种抑制剂,可以有效抑制蛋白降解,并能维持原有的蛋白间的相互作用。裂解得到的蛋白样品可用于常规的Western、IP和Co-IP等实验。
注意事项
1)需自备PMSF。
2)裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
3) 用WB/IP裂解液裂解得到的蛋白样品,可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定其蛋白浓度(SY0298)。由于含有较高浓度的去垢剂,不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明:
(一) 细胞样品
1)融解WB/IP裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM。
2)贴壁细胞:去除培养液,用PBS、生理盐水或无血清培养液清洗细胞一遍(如果血清中的蛋白没有干扰,可以不洗)。按照6孔板每孔加入100-200μl 裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下,使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后,细胞就会被裂解。
悬浮细胞:离心收集细胞,用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入100-200μl 裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多,必需分装成5×105~1×106个细胞/管,然后再裂解。因为大团的细胞较难裂解充分,而少量的细胞由于裂解液容易和细胞充分接触,相对比较容易裂解充分。
3)充分裂解后,10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
裂解液用量说明:通常6孔板每孔细胞加入100μl裂解液已经足够,但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到150μl或200μl。
(二)组织样品:
1)把组织剪切成细小的碎片。
2)融解WB/IP裂解液,混匀。取适当量的裂解液,在使用前数分钟内加入PMSF,使PMSF的最终浓度为1mM。
3)按照每20mg组织加入100-200μl裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液,如果需要高浓度的蛋白样品,可以适当减少裂解液的用量。)
4)用玻璃匀浆器匀浆,直至充分裂解。
5)充分裂解后,10000-14000g离心3-5分钟,取上清,即可进行后续的PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
6)如果组织样品本身非常细小,可以适当剪切后直接加入裂解液裂解,通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清,用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便,不必使用匀浆器,缺点是不如使用匀浆器那样裂解得充分。
储存条件:-20℃,避免反复冻融,有效期12个月。
更多有关免疫印迹及免疫沉淀用(WB/IP)裂解液 蛋白质研究的价格及使用说明等,请联系我们的业务经理王欣女士咨询,我公司还销售以下产品:
·Alexa Fluor 488-N-羟基琥珀酰亚胺酯
编号:SY0602
英文名称:Alexa Fluor 488 NHS Ester (Succinimidyl Ester)
规格:1mg
本品是一种亮绿色荧光染料,具有水溶性和较强的pH稳定性(pH4-10),可被488nm激发产生信号稳定的荧光,常作为一种细胞标记物偶联到抗体、多肽、蛋白、示踪剂和其他底物上广泛用于细胞成像和检测。
Alexa Fluor 488 NHS Ester,即含N-羟基琥珀酰亚胺(N-Hydroxysuccinimide)活化基团的Alexa Fluor 488,可直接与生化分子上的氨基(-NH2)反应形成稳定的酰胺键,主要是伯胺,可用于标记任何含伯胺的蛋白、多肽、氨基修饰的寡核苷酸或者其他含氨基的生物分子。
荧光团(Fluorophore Label):Alexa Fluor 488 dye
活性基团(Reactive Group):NHS ester
反应性(Reactivity):伯胺(R-NH2)
分子式:C25H15Li2N3O13S2
分子量:643.4
外观:粉末
Ex/Em:494/517 nm
摩尔吸光系数:71,000 cm-1M-1
校正因子(CF280):0.11
储存条件:-20℃,有效期3个月
结构式
·兔抗GFP-tag多克隆抗体
编号:SY0661
英文名称:GFP-tag, Rabbit pAb
规格:20μl(>40次)
本品为兔抗GFP-tag多克隆抗体,兔抗GFP标签多克隆抗体。推荐稀释比例:WB(1:2000~10000),IP(1:2000~20000),IF(1:10~100)。
GFP(Green Fluorescent Protein)最早是从一种生活在北太平洋寒冷水域的水母(Aequoria victoria) 体内发现的蛋白,该蛋白在蓝色波长范围的光激发下能发出绿色的荧光,其最大和次大的激发波长是395 nm和470 nm;最大发射波长是509 nm,在540 nm处有一肩峰。
由于GFP具有荧光性质稳定,对细胞无毒害,表达具有光谱性等一系列的优点,常作为报告基因,融合标签和细胞标记物等,应用于分子和细胞生物学领域。
产品类型:兔多克隆抗体(Rabbit Polyclonal, pAb)IgG
反应性:重组蛋白
宿主:Rabbit
应用:ELISA, IF, WB, IP
抗原分子量:26kDa
储存缓冲液:含0.1%叠氮钠、50%甘油的PBS,pH7.3
纯化方式:抗原亲和纯化
储存条件:-20℃,避免反复冻融,有效期一年。
免疫印迹及免疫沉淀用(WB/IP)裂解液 蛋白质研究关键词:SY0318,Lysis Buffer for WB/IP Assays,免疫印迹及免疫沉淀用(WB/IP)裂解液
BTN130641 T4 核酸内切酶 V T4 Endonuclease V
ARB12724 小鼠17羟孕酮(17-OHP)ELISA代测服务 Mouse 17-hydroxyprogesterone,17-ohp ELISA KIT
9032-75-1 MacerozymeR-10 离析酶R-10
17502-048 N-2
α-萘酚苯甲醇 Benzo-18-crown-6 145-50-6
ARB13030 小鼠免疫球蛋白G2A(IgG2A)含量测试 Mouse immunoglobulin g2a,igg2a ELISA KIT
SJ0194 Dextran Blue 2000 蓝色葡聚糖 2000
ARB11110 人乳头瘤病毒L1(HPVL1)抗体ELISA代测服务 Human papillomavirusl1,hpvl1 ELISA KIT
BL0638 DEAE-琼脂糖凝胶CL-6B DEAE Sepharose CL-6B
ARB13559 兔子双氢睾酮(DHT)Elisa方法检测 Rabbit dihydro testosterone,dht ELISA KIT
ARB11091 人垂体腺苷酸环化酶激活肽(PACAP)ELISA代测服务 Human pituitary adenylate cyclase activating polyPeptide,pacap ELISA KIT
CYB164010 兔抗狗IgG-HRP
ARB10251 人乙酰胆碱酯酶(AChE)酶免分析 Human acetylcholinesterase,ache ELISA KIT
SJ0687 250bp
ARB11339 human胎盘蛋白14(PP14)免费代测 Human placenta protein14,pp14 ELISA KIT
BL0828 HRP标记兔抗亲和素抗体
PY02-414 MEE肉汤 250克
ARB10462 人生长激素释放多肽(GHRP)酶联免疫定量检测 Human growth hormone releasing Peptide,ghrp ELISA KIT
免疫印迹及免疫沉淀用(WB/IP)裂解液 蛋白质研究关键词:SY0318,Lysis Buffer for WB/IP Assays,免疫印迹及免疫沉淀用(WB/IP)裂解液
BL0871 羊抗牛IgG免疫血清
卡特缩合剂 IAM 56602-33-6
ARB11372 人前列腺素F(PGF)尿液中含量检测 Human prostaglandin f,pg-f ELISA KIT
ARB11014 人补体调节蛋白(CCP)检测服务 Human complement control protein,ccp ELISA KIT
3,4-二氯苯甲醛 MC 6287-38-3
F030420 胶体金标记兔抗马IgG抗体 Rabbit Anti-Horse IgG*GOLD
ARB13328 马生长激素(GH)定量分析 Equine growth hormone,gh ELISA KIT
SJ0716 TES缓冲液(10×)
滑石粉 BES sodium salt 14807-96-6
BL0832 HRP标记人白蛋白抗体
四氮唑紫 Calconcarboxylic acid 1719-71-7
ARB11861 人糖连抗原199(CA199)尿液中含量检测 Human ca199 ELISA KIT
BTN70908 DNA PAGE胶回收试剂盒 PAGE DNABACK
ARB11445 人核糖核酸酶(RNASE)ELISA代测服务 Human ribonuclease,rnase ELISA KIT
ARB13528 兔p53(p53)酶联免疫定量检测 Rabbit p53/tumor protein,p53/tp53 ELISA KIT
ARB12026 大鼠β内啡肽受体(β-EPR)定量分析 Rat beta-endorphin receptor,β-epr ELISA KIT
F030625 FITC标记兔抗豚鼠IgG抗体 Rabbit Anti-Guinea Pig IgG*FITC
F020230 山羊抗猪IgG抗体 Goat Anti-Pig IgG
ARB11496 人脂多糖结合蛋白(LBP)ELISA检测服务 Human lipolysaccharide binding protein,lbp ELISA KIT
BTN120643 硫酸葡聚糖 Dextran Sulfate
ARB12390 大鼠肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体4(TRAIL-R4)elisa检测 Rat tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand 4,trail r4 ELISA KIT
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