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Sulfo-NHS-LC-Bi
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储液可以在零下20℃中保存数月
Sulfo-NHS-LC-Biotin Biotinamidohexanoic acid 3-sulfo-N-hydroxysuccinimide ester sodium salt
现货
恒斐生物
127062-22-0
100mg、1g
样品
心肌细胞
溶解方法
可以溶于水中,为了获得更高的浓度,可以将离心管在37℃加热10分钟和/或在超声波浴中震荡一段时间。原液可以在-20℃以下储存几个月。
反应条件
0.5 mg/ml, 37℃ 孵育2小时
应用
Sulfo-NHS-LC-Biotin 在PBS中溶解,浓度为0.5 mg/ml,37℃下,将它与心肌细胞孵育2小时。孵育完成后,细胞先用含100mM甘氨酸的预冷PBS洗两遍,再用冷的PBS洗两遍去除没有结合的生物素。100ul的链霉亲和素琼脂糖树脂与100ug的样品在4℃下孵育60分钟后能够捕获到生物素化的蛋白质。60℃ 下,链霉亲和素捕获的生物素化蛋白用含40 mg/mL二硫苏糖醇的Laemmli 2X 样品缓冲液洗脱30分钟,最后用相应的抗体进行免疫印迹分析。
References:
[1]. Charlotte Lorin, Isabelle Vigeli, Ernst Niggli. Dystrophic cardiomyopathy - role of TRPV2 channels in stretch-induced cell damage. Cardiovascular Research, 2015.
Sulfo-NHS-LC-biotin [磺基琥珀酰亚胺-6-(生物素)己酸]是一种胺反应性的生物素化试剂。作为NHS-LC-biotin的水溶性类似物,Sulfo-NHS-LC-biotin包含一个存在于NHS环上的带负电荷的磺酸基,使其分子内产生足够的极性,允许其可以直接加入到反应性水溶液中,而不需要提前溶解在有机溶剂中。Sulfo-NHS-LC-biotin通过其NHS酯与蛋白或其它分子中的胺基共价结合形成酰胺键,并释放N-Hydroxysuccinimide。与NHS-biotin (13.5 A)相比,Sulfo-NHS-LC-biotin的共价修饰分子与双生物素环之间的长度更长(22.4 A),使探针更容易到达深埋在蛋白质内部的结合位点。
参考文献:Bioconjugate Techniques , 2nd ed. By Greg T.Hermanson (Pierce Biotechnology, Thermo Fisher Scientific, Rockford, IL). Academic Press (an imprint of Elsevier): London, Amsterdam, Burlington, San Diego . 2008. ISBN 978-0-12-370501-3.
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