我的询价

99
商家已回复你的询价 【点击查看】

询价列表

暂时没有已询价产品

inquiry icon 快捷询价
    当你希望让更多商家联系你时,可以勾选后发送询价,平台会将你的询价消息推荐给更多商家。
    个人收货地址

    编辑个人收货信息

    yanxuan

    关注「丁香通研选」

    微信及时获得商家回复,

    获得更多交易信息和保障。

    Daoy细胞

    收藏

    Daoy细胞

    丁香通用户服务中心 查看详情

    微信二维码询价

    扫一扫微信联系

    促销详情
    促销信息
    实验不用愁,超级满减、5折疯抢。
    备注
    5折限时抢购
    倒计时
    99000000

    站内推广

    • 商家诚信度 
    • 入驻年限  6年
    • 上海市杨浦区密云路1018号复旦科技园808室
    • 货号: HZ-H442
      生长状态: 悬浮;髓母细胞样
      年限: 1-52
      运输方式: 干冰运输or活细胞运输
      器官来源: 脑髓母
      是否是肿瘤细胞: 见说明书
      细胞形态: 悬浮;髓母细胞样
      免疫类型: 见说明书
      物种来源:
      相关疾病: 见说明书
      组织来源: 脑髓母
      品系: 细胞系
      供应商: 沪震生物
      数量: 120
      规格: 1000000细胞/株
      细胞名称:Daoy   人脑髓母细胞瘤细胞
      组织来源:脑髓母细胞
      培养条件:EMEM +10% FBS
      形      态:悬浮;髓母细胞样
      DAOY细胞培养的基本技术-(培养、传代、冻存):
      培养基的配置:基础培养基500ml+胎牛血清50ml+双抗5ml
      冻存液的配置:DMSO18ml+胎牛血清2ml。
      依次比例酌量配置。
      产品编号 名称 规格 价格 产品说明书
      HZ-H442 Daoy;人脑髓母细胞瘤细胞 1×10^6 cells/瓶 询价 下载
      超净工作台常规配置:
      移液器1套(2.5μl、20μl、200μl、1ml),酒精灯1盏,液器1台,斜架1台,酒精喷壶1个,酒精棉球缸1个,污缸1个,
      常规耗材:培养瓶(50㎝2),定量移液管(5ml、10ml),枪头(1ml、200μl、10μl),培养皿,6/24/48/96孔板,医用脱脂棉球,保种管
      所需试剂:gibco高糖培养基,胎牛血清,双抗,DMSO,胰酶,苯扎溴氨,75%酒精……

      实验前准备:
      所需的各项高压后的耗材放于超净工作台内,用酒精喷壶喷洒实验台面,并关闭工作台打开紫外灯照射30min后开始实验操作。
      首次传代前DAOY细胞的复苏,首先用一大烧杯盛满37℃的温水放于液氮罐旁边,待取出后留上端1/3于37℃水面上尽最大速摇动管使其在2min内迅速融化。若种管顶部含有冻存的细胞液在摇动期间用力甩动使其降于管底后再摇动。这一过程可在超净工作台外操作。
      细胞传代
      1. 紫外消毒30min后关闭紫外灯,开启超净台正常工作状态,用酒精消毒操作者的双手。
      2. 将所需的培养基,胰酶确保瓶身干净后放于工作台面内,点燃酒精灯,将培养基和胰酶瓶口用酒精棉球擦拭后,再将瓶口对准在酒精灯上消毒2-3次,旋开瓶盖后再次分别消毒瓶口和瓶盖,分别放于酒精灯的两侧。特别是将培养基瓶放于斜架上,瓶口对准酒精灯,且放在距离酒精灯最近的位置,瓶盖置于酒精灯的另一侧。
      3. 将培养瓶瓶口在酒精灯上消毒2-3次,旋开后分别再次消毒瓶口和瓶盖2-3次,瓶盖放于酒精灯右侧后将培养瓶内的培养液悬空倒进污缸,在酒精灯消毒2-3次瓶口,竖直放好。取1ml移液器快速移动在酒精灯上消毒1-2次,然后再装上枪头吸取1.5ml胰酶液,悬空移入培养瓶内。
      4.  将培养瓶平放使胰酶浸没整个瓶壁的细胞层,计时约40s,立马竖起对着灯光可观察到细胞与DAOY细胞之间有针孔样缝隙,并有1-2个细胞脱落,这时为胰酶消化的最适时机。若看到成片的细胞从瓶壁脱落为胰酶消化过度;若看不到针孔样缝隙和细胞脱落,则需继续消化,轻轻的迅速平放培养瓶使胰酶浸没细胞层1s后迅速竖起对着灯光观察细胞情况,可反复几次,直至出现针孔样缝隙和1-2个细胞脱落的最佳消化状态。用移液器将胰酶吸净。
      5. 吸取1ml培养基于培养瓶内,并用移液器吸取少量的培养基轻柔的反复冲洗培养瓶壁5-8次,使贴壁DAOY细胞完全脱落于培养基内再轻轻吹打2-3次,使细胞尽可能处于单个悬浮状态。
      6. 取2或3个高压后的新培养瓶,瓶口在酒精灯上消毒2-3次,旋开后分别再次消毒瓶口和瓶盖2-3次分别放于酒精灯两侧,然后将细胞培养基均匀的分到3或4个培养瓶内(注意原来传代时使用的培养瓶可继续传代使用),进行1传3或1传4的培养。
      7. 拿出1支高压后的5ml定量移液管,在酒精灯上灼烧尾部后装于电动移液器上,再次放于酒精灯上灼烧整个定量移液管管身2-3次,悬空进入培养基瓶内吸取4ml培养基悬空移入每个培养瓶内,将培养瓶瓶口和瓶盖在酒精灯上消毒2-3次后拧紧平放,在瓶身做好实验标记。
      8. 将培养基瓶口和瓶盖消毒2-3次后拧紧,熄灭酒精灯,整理实验台面,取出实验试剂及污缸等,关闭超净工作台。
      9. 将培养瓶放于28℃,5%CO2的培养箱内培养,旋开瓶口少许。注意整个培养箱底托盘内一定要放高压后的水,且定期更换确保无菌。
         每天定时观察DAOY细胞生长情况,一般72-96h后,细胞生长密度大于90%,即可进行细胞的传代或保株。 
       
       

      风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。

    • Daoy细胞

      * 联系人
      * 电话
      * 验证码
      换一个

      填写更多信息,方便商家更快联系你 展开

      采购截止时间
      数量
      单位
      单位/学校
      职位
      地址
      详细地址
      邮箱
      0/120

    询价发送成功

    会在1个工作日内联系您!

    马上登录注册,即可保存询价历史

    你可能感兴趣的产品