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金属增强型DAB显色试剂盒
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-20℃
多克隆
组化显色
盒
产品货号:AR1026
产品价格:160元/盒
产品名称:金属增强型DAB显色试剂盒
产品用途:组化实验中的显色步骤。试剂盒内容:
金属增强型DAB浓缩液(10X),0.5ml
稳定的过氧化氢缓冲液,5ml
保存条件:金属增强型DAB浓缩液(10X)在-20℃保存, 稳定的过氧化物缓冲液在4℃保存。
产品介绍:DAB(3,3’-diaminobenzidine tetrahydrochloride)产生的颜色可通过向反应体系中加入金属例如:镍、铜、银和钴来增强,它们在辣根过氧化物酶-过氧化氢底物反应中形成更加致密的复合物。博士德金属增强型DAB底物试剂盒通过优化这种信号增强反应,研制出用于免疫组化的极其灵敏的化学显色检测系统。在免疫组化实验中,辣根过氧化物酶存在的情况下,这种含有氯化钴和氯化镍的独特配方能产生深棕黑色沉淀。
金属增强型DAB工作液的配制:
1.从-20℃保存环境中取出金属增强型DAB浓缩液(10X),倒转瓶子来混匀溶液。倒取所需量后立即把瓶子放回-20℃。
2.在金属增强型DAB浓缩液(10X)中加入稳定的过氧化氢缓冲液,混匀,配制1X工作液。比如,如需1ml DAB底物,在100ul 金属增强型DAB浓缩液(10X)中加入900ul稳定的过氧化物缓冲液。几个小时内,1X底物溶液在4℃条件下是稳定的。
使用方法:
3.在博士德的SABC的检测完成以后,TBS或PBS充分洗涤,一般5分钟×4次。
4.加入金属增强型DAB工作液,孵育至染色过程完成。通常孵育时间为5-15分钟。
5.蒸馏水充分洗涤以终止反应。必要时Mayor’s苏木素复染1-2分钟左右。水洗。
6.脱水,透明,中性树胶封片,显微镜观察。
常见问题解答
常见问题
可能原因
解决方法
沉淀为棕色并非深棕黑色
钴和镍是重金属。保存时会分离。
使用前倒转瓶子,使DAB和金属混匀。
背景深,减少信号噪声比
金属增强型DAB浓缩液存放于室温中
为避免过深背景,在-20℃或以下保存金属增强型DAB浓缩液
金属增强型DAB浓缩液中有沉淀
金属增强型DAB浓缩液未一直存放于-20℃。
不要用含有沉淀的DAB底物。
背景高
系统中含有过多辣根过氧化物酶
减少抗体用量。此底物比其它不含金属DAB溶液敏感50多倍,因此检测所需抗体量少。
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