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噬菌体展示羊驼纳米抗体文库
噬菌体展示技术(Phage Display)是一种基因表达产物和亲和选择相结合的技术,以改造的噬菌体为载体,把待选基因段定向插入噬菌体外壳蛋白质基因区,使外源多肽表达展示噬菌体表面,进而通过亲和富集法表达多肽或蛋白质的噬菌体。
噬菌体展示技术作为一种新兴的研究方法和工具,在蛋白质机构等诸多研究上已经广泛应用。
1、高通量的淘选(Panning);
2、科用于模拟表达的筛选(Screening);
3、易于纯化和表达;
噬菌体展示羊驼纳米抗体文库。制备步骤如下:
1、采取免疫或未免疫的羊驼外周血液。
2、提取总的MRNA,反转录 成CDNA,
3、利用巢式PCR扩增VHH ;使用限制性的内切酶SfiI及Not I酶切噬菌体展示载体及VHH并连接两个片段;
4、将连接产物电转化至感受态细胞TGl中,构建天然或免疫的羊驼源噬菌体展示纳米抗体文库。
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