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生物素标记的蛋白质分子量标准
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博士德生物
支(20-40次)
产品货号:AR0130
产品名称:生物素标记的蛋白质分子量标准
产品规格:20-40次/管
产品保存:-20℃六个月有效
产品说明:生物素标记的蛋白标准,主要用于化学发光法,配合博士德提供的streptavidin-HRP使用,可以方便地在化学发光法检测样品蛋白的同时,也可以检测到相应的分子量标准。分子量标准和目的条带一次性显示在同一胶片上,可以更直观地判断目的蛋白大小,利于分析。蛋白质分子量为结合有生物素的纯化蛋白混合物,蛋白标准跨度较大――从6.5KDa到180KDa 之间的九个条带,用于免疫印迹化学发光的检测条件已经得到优化。蛋白质标准包括9种工程蛋白,分子量范围在6.5-180KDa之间,分别是180KDa的a2-巨球蛋白,116KDa的β-半乳糖苷酶;97KDa的磷酸化酶;58.1KDa的过氧化氢酶;39.8KDa的醇脱氧酶;29KDa的碳酸酐酶;20.1KDa的大豆胰蛋白酶抑制剂;14.3KDa的溶菌酶;6.5KDa的抑肽酶。
使用方法:
A 电泳和转膜
1)溶解蛋白质分子量,每管加200μl的1×SDS上样缓冲液(100μl dd H2O+100μl 2×SDS上样缓冲液)。混合均匀,多个小管分装(每份10μl)保存。
2)蛋白质分子量标准溶液于100℃加热2-3分钟。
3)离心1-2分钟后上样,每道5-10μl。
4)常规SDS-PAGE电泳
5)转膜
B 检测
1)将膜放入封闭液(5%BSA)中室温封闭1小时。TBS-T洗膜2次,每次5-10分钟。
2)以适当的比例稀释后的streptavidin-HRP(博士德有售,货号:BA1088效价1:2000-10000)室温孵育1-2小时,TBS-T洗膜3次,每次10分钟。
3)进行化学发光检测,方法按照其使用的产品说明书进行。
1、2道是蛋白分子量 在4%浓缩胶 8%分离胶Tris-Glycine SDS-PAGE。 1道为5μl的蛋白分子量标准溶液;2道为10μl的蛋白分子量标准溶液。在胶片上曝光30 秒的显影结果。
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