本试剂盒可测动物血清、血浆、组织以及全血、红细胞、培养细胞及培养液中的GSH的含量。
包装信息:
注意事项:
吸取上清时,避开表面的一层薄膜 , 插到上清液中吸取适量上清液进行显色反应。
该产品被引用文献(仅展示部分):
1、Wang J; Wang T; Zhang Y, et al., CPEB1 enhances erastin-induced ferroptosis in gastric cancer cells by suppressing twist1 expression. IUBMB Life 2021.
PubMed: 34184391
2、Yu T; Jia W; Zhen M, et al., Amino acid modified gadofullerene protects against insulin resistance induced by oxidative stress in 3T3-L1 adipocytes. J Mater Chem B 2020, 8 (33), 7521-7527.
PubMed: 32678390
3、Miao J; Xu M; Kuang Y, et al., Deferasirox protects against hydrogen peroxide-induced cell apoptosis by inhibiting ubiquitination and degradation of p21(WAF1/CIP1). Biochem Biophys Res Commun 2020.
PubMed: 32035614
4、Zhao X; Kuang F; You Y Y, et al., Etomidate affects the anti-oxidant pathway to protect retinal ganglion cells after optic nerve transection. Neural Regen Res 2019, 14 (11), 2020-2024.
PubMed: 31290461
操作流程:
1. 试剂配制。
试剂一 : 先向甲粉试剂中加入90-100°C的热双蒸水加入17ml,充分完全溶解。然后将已配好的甲液与乙液充分混合。此为过饱和溶液,室温静置冷却后,如有结晶,则取上清进行实验,室温保存6个月。
试剂二:用时加双蒸水20ml, 充分完全溶解,室温保存6个月。
试剂三:用时加双蒸水至50ml溶解,避光4°C保存6个月。
GSH标准品溶剂应用液:按GSH标准品溶剂贮备液:双蒸水=1 : 9 , 加入9倍体积的双蒸水进行稀释,现用现配。
10mmol/L GSH标准品溶液的配制:GSH的分子量为307,每次测定前将10mg的GSH标准品加入到3.25ml的GSH标准品溶剂应用液中,混匀,现用现配。
20µmol/L GSH标准品溶液:取10mmol/L GSH标准品溶液0.02ml加入GSH标准品溶剂应用液9.98ml,现用现配。
2. 样本前处理。
a. 全血、血清(浆):取血清(浆)或10倍溶血液0.05ml,加试剂一0.2ml混匀,3500rpm离心10min,取上清液待测。
b. 细胞、组织:取匀浆上清液0.1ml,加0.1ml试剂一混匀,3500rpm离心10min,取上清液待测。
3. 显色反应
混匀,静置4min,405nm处,酶标仪测定各孔吸光度值。
注:请在5min内完成OD值测定,以减少误差,提高精确度
4. 计算
全血GSH含量(μmol/L)=(测定OD值 - 空白OD值)/(标准OD值 - 空白OD值)x标准管浓度(20μmol/L)x 样本前处理稀释倍数(5倍)x样本测试前
稀释倍数(10倍)
细胞及组织GSH含量(μmol/gprot)=(测定OD值 - 空白OD值)/(标准OD值 - 空白OD值)x标准管浓度(20μmol/L)x 样本前处理稀释倍数(2倍)÷待测匀浆蛋白浓度(gprot/L)
血清(浆)GSH含量(μmol/L)=(测定OD值 - 空白OD值)/(标准OD值 - 空白OD值)x标准管浓度(20μmol/L)x 样本前处理稀释倍数(5倍)