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rAAV8-1.3HBV(ay

w)-wt

价格 ¥2000 - 102000
品牌五加和
货号 AMV-002
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更新日期 2020年01月20日

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制备简单、成模率高、均一性稳定性好、量效关系好、使用范围广，已被广泛应用于HBV药物评价和筛查的研究

保质期：
3年
规格：
0.5ml,1E+12vg/ml/1ml,1E+12vg/ml/5ml,1E+12vg/ml/10ml,1E+12vg/ml/0.1ml,1E+12vg/ml

规格：	0.5ml,1E+12vg/ml	产品价格：	¥8000.0
规格：	1ml,1E+12vg/ml	产品价格：	¥12000.0
规格：	5ml,1E+12vg/ml	产品价格：	¥53000.0
规格：	10ml,1E+12vg/ml	产品价格：	¥102000.0
规格：	0.1ml,1E+12vg/ml	产品价格：	¥2000.0

产品介绍
2010年董小岩博士等首次报道了rAAV8-1.3HBV可以用于高效制备HBV持续性感染的小鼠模型，它是一种携带1.3拷贝HBV全长基因组的重组AAV8病毒，包含的HBV基因为D型(ayw血清型，GenBank accession number: KX470733)或C型（adr血清型，GenBank accession number：KX449554)。该产品巧妙结合了含重复区的HBV基因组可在小鼠肝脏中复制的特点以及AAV8嗜肝细胞的特性，通过向小鼠尾部静脉注射rAAV8-1.3HBV，能够建立HBV慢性感染模型，在小鼠血液和肝脏中持续检测到HBV DNA、HBeAg和HBsAg的表达。本产品也可应用于其他动物，在HBV药物筛查、药效评价和基础研究领域有广泛应用。

产品原理及应用

产品特点

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质检项目

病毒滴度：点杂交检测滴度为1E+12vg/mL Q-PCR检测滴度，报告实测值
纯度：SDS-PAGE显示AAV8三条特征条带清晰，纯度≥85%
蛋白含量：BCA方法检测，报告实测值

（具体检测结果见产品质检报告）

产品保存

保存液：无菌FF5，pH 7.2~7.4
保存条件：≤-70℃，分装保存，避免反复冻融
生产批号：见标签
保质期：三年

使用注意

本产品仅限科研使用。
rAAV8-1.3HBV病毒产品对人和哺乳动物均具有潜在感染性和致病性，需在BSL-2实验室和ABSL-2级动物实验室进行相关实验操作。操作人员应该接种过乙型肝炎疫苗，具有乙型肝炎保护性免疫反应，并需经过专业的生物安全培训，获得生物安全培训合格证方可进行实验操作。废弃物的处理严格按照BSL-2实验室管理要求进行。
由于检测方法的限制，生物制品尤其是病毒制品的定量结果有较大的变异，不同批次产品的实际滴度会有一定的差异。由于产品开发初期用点杂交方法进行滴度检测，为保证质量标准的一致性，目前我们的产品仍然沿用点杂交滴度结果（结果变异范围为±50%）作为产品的放行标准。从2018年11月份开始，在检测报告上加入Q-PCR方法（结果变异范围为±30%）的滴度检测结果，供客户参考。
对小鼠造模数据的一致性要求很高的客户，为了降低产品的批间差异对实验结果的影响，建议客户：①保留上一次实验用的产品小样20~50μL，在收到新批次产品后用HBV DNA的定量方法对新旧两批产品的滴度进行平行检测，根据检测结果确定动物实验用量，检测方法可参考公司的Q-PCR检测AAV滴度方法；但不同实验室不同Q-PCR试剂得到的检测结果有较大差异，产品质检报告上的检测结果仅供参考。②在大量动物实验前进行动物的预实验。单次采购量大于等于5支，我们免费提供0.5mL的产品用于动物预实验；单次订购量小于5支，我们免费提供20μL的产品用于病毒滴度检测。
AAV8在体外对细胞的感染效率很低，不建议客户将本产品用于细胞学实验，如需进行细胞实验，建议购买相应的AAVDJ产品AMV-005 rAAVDJ-1.3HBV adr（C型）和AMV-006 rAAVDJ-1.3HBV ayw（D型）。

使用方法

实验动物：本产品可在C57BL/6小鼠、Balb/C小鼠、大鼠以及树鼩中建立HBV感染模型，但在不同动物中的HBV DNA和相关抗原抗体的表达水平有较大差异，其中C57BL/6小鼠为最常用实验动物。
给药方式：尾静脉注射。
剂量：4~6周C57BL/6小鼠推荐用量为1×1011vg/只（基于点杂交结果的推荐用量），建议注射体积为200μL，可用无菌PBS或病毒保存液FF5于使用前稀释（注意：切勿稀释后保存）。低于建议剂量有可能导致动物实验结果变异较大，由于不用研究者对模型动物的要求各异，为获得最佳实验结果，建议研究者先进行不同剂量的预实验，根据预实验结果确定最佳使用剂量。

应用示例
1. 曾扬，吴小红，胡靓雅，等. 重组8 型腺相关病毒介导HBV急性感染树鼩模型建立[J].中国实验动物学报，2013,21（3）：36-41.
2. 王国婧，王刚，董小岩，等.用重组8型腺相关病毒载体介导的乙型肝炎病毒持续感染小鼠模型评价核苷类似物的抗病毒效果[J].生物工程学报，2013,29（1）：95-106.
3.Dan Yang, Longchao Liu, Danming Zhu, etal. A mouse model for HBV immunotolerance and immunotherapy[J]. Cellular & Molecular Immunology. 2013, 1-8.

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参考文献
1. 董小岩等 , 高嗜肝性 8 型重组腺相关病毒体内转导法制备乙型肝炎病毒持续感染小鼠模型 . 2010. 病毒学报 , 26(06): 425-431.
2. 郭燕菊等 , 免疫抑制剂地塞米松可明显延长乙型肝炎病毒抗原在水动力法转染 HBV 小鼠模型中的表达 . 2010. 病毒学报 ,26(01): 20-26
3. 王刚等，用 rAAV8-1.3HBV 制备两种品系小鼠乙型肝炎病毒感染模型的比较研究 . 2012. 病毒学报 , 28(05): 541-547
4. 朱欣瑶等 , 比较不同血清型 AAV 携带 HBV 基因组建立乙肝小鼠模型效果 . 2012. 生物工程学报 ,28(1):1-9.
5. 王国婧等 , 用重组 8 型腺相关病毒载体介导的乙型肝炎病毒持续感染小鼠模型评价核苷类似物的抗病毒效果 . 2013. 生物工程学报 , 29(01): 95-106.
6. 曾扬等 , 重组8型腺相关病毒介导 HBV 急性感染树鼩模型建立 . 中国实验动物学报 , 2013, 21(03): 36-41.
7. Bian Y, Zhang Z, Sun Z, Zhao J, Zhu D, Wang Y, Fu S, Guo J, Liu L, Su L, Wang FS, Fu YX, Peng H. 2017. Vaccines targeting preS1 domain overcome immune tolerance in hepatitis B virus carrier mice. Hepatology 66:1067-1082.
8. Dion S, Bourgine M, Godon O, Levillayer F, Michel ML. 2013. Adeno-associated virus-mediated gene transfer leads to persistent hepatitis B virus replication in mice expressing HLA-A2 and HLA-DR1 molecules. Journal of virology 87:5554-5563.
9. Kong X, Sun R, Chen Y, Wei H, Tian Z. 2014. gammadeltaT cells drive myeloid-derived suppressor cell-mediated CD8+ T cell exhaustion in hepatitis B virus-induced immunotolerance. J Immunol 193:1645-1653.
10. Wang Z, Zhu K, Bai W, Jia B, Hu H, Zhou D, Zhang X, Xie Y, Bourgine MM, Michel ML, Lan K, Deng Q. 2014. Adenoviral delivery of recombinant hepatitis B virus expressing foreign antigenic epitopes for immunotherapy of persistent viral infection. Journal of virology 88:3004-3015.
11. Yang D, Liu L, Zhu D, Peng H, Su L, Fu YX, Zhang L. 2014. A mouse model for HBV immunotolerance and immunotherapy. Cellular & molecular immunology 11:71-78.
12. Cheng L, Li F, Bility MT, Murphy CM, Su L. 2015. Modeling hepatitis B virus infection, immunopathology and therapy in mice. Antiviral research 121:1-8.
13. Dai K, Huang L, Chen J, Yang L, Gong Z. 2015. Amphiregulin promotes the immunosuppressive activity of intrahepatic CD4(+) regulatory T cells to impair CD8(+) T-cell immunity against hepatitis B virus infection. Immunology 144:506-517.
14. Dai K, Huang L, Sun X, Yang L, Gong Z. 2015. Hepatic CD206-positive macrophages express amphiregulin to promote the immunosuppressive activity of regulatory T cells in HBV infection. Journal of leukocyte biology 98:1071-1080.
15. Li J, Zong L, Sureau C, Barker L, Wands JR, Tong S. 2016. Unusual Features of Sodium Taurocholate Cotransporting Polypeptide as a Hepatitis B Virus Receptor. Journal of virology 90:8302-8313.
16. Zhu D, Liu L, Yang D, Fu S, Bian Y, Sun Z, He J, Su L, Zhang L, Peng H, Fu YX. 2016. Clearing Persistent Extracellular Antigen of Hepatitis B Virus: An Immunomodulatory Strategy To Reverse Tolerance for an Effective Therapeutic Vaccination. J Immunol 196:3079-3087.
17. Zhu W, Xie K, Xu Y, Wang L, Chen K, Zhang L, Fang J. 2016. CRISPR/Cas9 produces anti-hepatitis B virus effect in hepatoma cells and transgenic mouse. Virus research 217:125-132.
18. 杨悦等，中国流行株 C 基因型 HBV 稳定复制表达小鼠模型的建立 . 2016. 解放军医学，41(10)：793-797.
19. Zhao W, Zhou X, Zhao G, Lin Q, Wang X, Yu X, Wang B. 2017. Enrichment of Ly6C(hi) monocytes by multiple GM-CSF injections with HBV vaccine contributes to viral clearance in a HBV mouse model. Human vaccines & immunotherapeutics 13:2872-2882.
20. Javanbakht H, Mueller H, Walther J, Zhou X, Lopez A, Pattupara T, Blaising J, Pedersen L, Albaek N, Jackerott M, Shi T, Ploix C, Driessen W, Persson R, Ravn J, Young JAT, Ottosen S. 2018. Liver-Targeted Anti-HBV Single-Stranded Oligonucleotides with Locked Nucleic Acid Potently Reduce HBV Gene Expression In Vivo. Molecular therapy. Nucleic acids 11:441-454.
21. Liu Y, Yao W, Si L, Hou J, Wang J, Xu Z, Li W, Chen J, Li R, Li P, Bo L, Xiao X, Lan J, Xu D. 2018. Chinese herbal extract Su-duxing had potent inhibitory effects on both wild-type and entecavir-resistant hepatitis B virus (HBV) in vitro and effectively suppressed HBV replication in mouse model. Antiviral research 155:39-47.
22. Tang L, Chen C, Gao X, Zhang W, Yan X, Zhou Y, Guo L, Zheng X, Wang W, Yang F, Liu G, Sun J, Hou J, Li Y. 2018. Interleukin-21 Reinvigorates the Antiviral Activity of Hepatitis B Virus (HBV)-Specific CD8+ T Cells in Chronic HBV Infection. The Journal of infectious diseases. doi: 10.1093/infdis/jiy576.

温馨提示：不可用于临床治疗。

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