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真正的精准“动物体内基因转染”神器!
腺相关病毒,是优秀安全的动物体内基因转染工具,相比较慢病毒等其他病毒载体,优势很多:
滴度高,免疫原性极低,表达时间长,无任何致病性及病理毒理作用,病毒颗粒小扩散范围广,多血清型且有相对组织亲和性等等优点。
如何精准??
腺相关病毒(AAV)有多种血清型,每种血清型的靶器官亲和性各不相同,这一点决定了腺相关病毒与其他病毒载体相比,有更精准的器
官选择性。
科维创生物在原有的AAV血清型基础上,开发出更多脏器选择亲和性的腺相关病毒血清型。
血清型 | 组织亲和性 |
AAV1 | 肌肉,心脏,骨骼肌(包括心肌),神经组织 |
AAV2 | 中枢神经,肌肉,肝脏,脑组织,眼, |
AAV3 | 肌肉,肝脏,肺,眼 |
AAV4 | 中枢神经,肌肉,眼,脑 |
AAV5 | 肺,眼,中枢神经,关节滑膜,胰腺 |
AAV6 | 肺,心脏 |
AAV7 | 肌肉,肝脏 |
AAV8 | 肝脏,眼,中枢神经,肌肉 |
AAV9 | 心脏,肌肉,肺(肺泡),肝脏,中枢神经 |
DJ | 肝脏,视网膜,肺,肾脏 |
DJ/8 | 肝脏,眼,中枢神经,肌肉 |
Rh10 | 肺, 心脏,肌肉,中枢神经,肝脏 |
货号 | AAV现货名称 |
HAV1001 | HBAAV-CMV-GFP |
HAV1002 | HBAAV-CAG-GFP |
HAV1003 | HBAAV-CAG-RFP |
HAV1004 | HBAAV-CMV-mRFP-GFP-LC3 |
HAV2001 | HBAAV-CAG-DIO-EGFP |
HAV2002 | HBAAV-CAG-DIO-mCherry |
HAV2003 | HBAAV-CAG-DIO-EYFP |
HAV2004 | HBAAV-CAG-DIO-eNpHR3.0-EYFP |
HAV2005 | HBAAV-CAG-DIO-hChR2(H134R)-mecherry |
HAV2006 | HBAAV-CAG-DIO-Arch3.0-EYFP |
HAV2007 | HBAAV-CAG-DIO-hCHETA-EYFP |
HAV2008 | HBAAV-CAG-DIO-hM3D(Gq)-mCherry |
HAV2009 | HBAAV-CAG-DIO-hM4D(Gi)-mCherry |
HAV2010 | HBAAV-CAG-DIO-DTR-mCherry |
HAV2011 | HBAAV-CAG-DIO-DTA-mCherry |
HAV2012 | HBAAV-CAG-DIO-Gcamp6s |
HAV2013 | HBAAV-CAG-DIO-Gcamp6f |
HAV3001 | HBAAV-Syn-EGFP |
HAV3002 | HBAAV-Syn-mCherry |
HAV3003 | HBAAV-Syn-EYFP |
HAV3004 | HBAAV-Syn-eNpHR3.0-EYFP |
HAV3005 | HBAAV-Syn-hChR2(H134R)-mecherry |
HAV3006 | HBAAV-Syn-Arch3.0-EYFP |
HAV3007 | HBAAV-Syn-hCHETA-EYFP |
HAV3008 | HBAAV-Syn-DIO-hM3D(Gq)-mCherry |
HAV3009 | HBAAV-Syn-DIO-hM4D(Gi)-mCherry |
HAV3010 | HBAAV-Syn-DTR-mCherry |
HAV3011 | HBAAV-Syn-DTA-mCherry |
HAV3012 | HBAAV-Syn-Gcamp6s |
HAV3013 | HBAAV-Syn-Gcamp6f |
HAV4001 | HBAAV-CaMKII-EGFP |
HAV4002 | HBAAV-CaMKII-mCherry |
HAV4003 | HBAAV-CaMKII-EYFP |
HAV4004 | HBAAV-CaMKII-eNpHR3.0-EYFP |
HAV4005 | HBAAV-CaMKII-hChR2(H134R)-mecherry |
HAV4006 | HBAAV-CaMKII-Arch3.0-EYFP |
HAV4007 | HBAAV-CaMKII-hCHETA-EYFP |
HAV4008 | HBAAV-CaMKII-DTR-mCherry |
HAV4009 | HBAAV-CaMKII-DTA-mCherry |
HAV4010 | HBAAV-CaMKII-Gcamp6s |
HAV4011 | HBAAV-CaMKII-Gcamp6f |
目前最主流的病毒载体工具有三种:
慢病毒(lentivirus)
腺病毒(adenovirus)
腺相关病毒(AAV,adenovirus associated virus)
相比较基因工程小鼠的局限性,病毒载体工具有如下优势:
i)对成年的动物直接进行急性的基因干预,避免了发育代偿的问题;
ii)病毒载体相对于基因工程小鼠来说,构建包装的周期和维持成本要小得多;
iii)病毒载体介导的基因干预可以在动物造模后进行,作为一个基因治疗干预手段,与临床更加接近,而不仅仅是完成基因功能研究。
1)慢病毒载体:慢病毒由于其本身的基因组整合特性,表达时程长,因而在细胞基因转染中被广泛用于建立基因稳转细胞系。但在动物
活体(in vivo)水平,慢病毒相比腺病毒和腺相关病毒,劣势明显。
a.慢病毒滴度的限制:动物体内基因转染对注射的活性病毒载体总量及注射体积都有极高要求,而注射体积往往是容易被忽略但实际上
限制最大的因素,如小鼠脑室注射,注射的体积不能超过2ul。同样的病毒注射总量,病毒滴度越高则注射的体积数越小,而慢病毒由于
滴度限制(108~109TU/ml),单位体积所含的活性病毒颗粒数相比腺病毒和腺相关病毒少得多,因此在动物体内(in vivo)基因转染的
应用上,慢病毒的转染效果远不如腺病毒和腺相关病毒。
b.潜在致瘤性:慢病毒整合到宿主细胞的基因组中,形成稳定的且理论上长时程的表达。虽然在实际实验中普遍认为慢病毒是相对安全
的,但这种随机插入理论上仍会有接种动物致瘤的潜在危险性。NIH对慢病毒的安全级别为RK2+级别,是三种病毒里边最高风险的级别
(腺病毒为RK2级,AAV为RK1级,即最安全级别)。
2) 腺病毒载体:腺病毒载体的特点是滴度高(1011PFU/ml),可插入片段大,侵染谱广,瞬时表达能力强,基因表达所需时间短。
腺病毒是第一个用于基因治疗临床实验的病毒载体,在动物体内基因转染也有非常广泛的应用。其应用特点突出且鲜明:
a.腺病毒能够在注射干预的48-72小时即开始强烈表达,因而对于一些干预窗口特别短的急性体内基因转染,腺病毒有着显著的优势。
什么叫做干预窗口特别短的急性体内基因转染?
比如造一个某器官的急性的损伤模型,而后进行基因干预抵抗这种急性损伤,如果这种抵抗能够发挥作用的时间只在是损伤的一周左右,
那我必须在这个时间以内让抵抗损伤的这种基因干预很快发挥效果。
b.腺病毒载体在体内的表达时程很有限,一般为2-4周,四周后基因表达衰减明显;如需要延长表达时间,可在第一次注射2周后行二次注射。
3)腺相关病毒(AAV)
-真正的精准“动物体内基因转染”神器!
腺相关病毒,是优秀安全的动物体内基因转染工具,相比较慢病毒等其他病毒载体,优势很多:
滴度高,免疫原性极低,表达时间长,无任何致病性及病理毒理作用,病毒颗粒小扩散范围广,多血清型且有相对组织亲和性等等优点。
如何精准??
腺相关病毒(AAV)有多种血清型,每种血清型的靶器官亲和性各不相同,这一点决定了腺相关病毒与其他病毒载体相比,有更精准的器官选择性。
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