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第一链cDNA合成技术服务
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上海达为科生物科技有限公司
第一链cDNA合成试剂盒采用莫洛尼氏鼠白血病病毒反转录酶(M-MuLV),优化反应Buffer,使反应的模板量(Total RNA)可在0.2-2μg范围之间进行逆转录反应。cDNA合成后进行PCR扩增既可检测到长cDNA(>10kb)片段,也可检测到低丰度cDNA样品。本试剂盒提供了由TotalRNA或mRNA合成cDNA第一链所需要的全部试剂,合成的第一链cDNA可广泛用于2ndStrand的合成、杂交、PCR扩增、Real-Time PCR反应等。
第一链cDNA合成试剂盒的主要特点:
产品名称
描述
规格
货号
第一链cDNA合成试剂盒
RT EasyTM(For first-strand cDNA synthesis)
用于长cDNA合成或者客户特定引物RT反应
25 rxns
JRD RT-01011
100 rxns
JRD RT-01012
实时PCR实验具体方法
1.SYBRGreen法:
在PCR反应体系中,加入过量SYBR荧光染料,SYBR荧光染料特异性地掺入DNA双链后,发射荧光信号,而不掺入链中的SYBR染料分子不会发射任何荧光信号,从而保证荧光信号的增加与PCR产物的增加完全同步。
SYBR定量PCR扩增荧光曲线图
PCR产物熔解曲线图(单一峰图表明PCR扩增产物的单一性)
2.TaqMan探针法:
探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;PCR扩增时,Taq酶的5’-3’外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与PCR产物的形成完全同步。
二、服务流程1、引物设计与合成2、DNA/RNA抽提3、反转录(针对RNA)4、上机定量分析三、客户提供1、全血、组织或细胞。2、引物,或由丰核提供。3、基因信息:目的基因名称、物种和序列(或GenBank Accession Number)。
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