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6一磷酸葡萄糖脱氢酶
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6-PGD 、G-6-PD
10000
钰博生物
葡萄糖-6-磷酸脱氢酶试剂盒操作说明书 6-PGD 、G-6-PD(HY-60124) 6一磷酸葡萄糖脱氢酶(glucose一6一phosphate dehydrogenase,G6PD)是磷酸戊糖途径的限速酶,控制着还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(nicotinomide adenine dinucleotide phosphate,NADPH)的生成。G6PD可通过NADPH和还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)在细胞内发挥抗氧化作用。
检测原理:红细胞戊糖代谢旁路中,G6PD及6PGD两步酶促反应都可以产生NADPH,如果在反应系统中同时添加底物葡萄糖-6-磷酸和葡萄糖酸-6-磷酸,测得的活性是G6PD与6PGD之和。6PDA+NADP→6-PGD核酮糖-5-磷酸+NADPHG6P+NADP→G6PD6-磷酸葡萄糖酸+NADPHNADPH的H传递给氧化型NBT(黄色)变为还原型NBT(蓝色),蓝色的深浅程度与NADPH的量成正比。以G6P为底物的反应测定的NADPH中,有一部分NADPH是6PGD催化产生的。
6一磷酸葡萄糖脱氢酶试剂盒组成: 试剂1 :底物:1瓶 Tris—HCl(pH8.0), 6 mmoL/L 6一磷酸葡萄糖, 6 mmoL/L 6一磷酸葡萄糖酸试剂2 : 2 mmol/L NADPH O.1mol/L MgCL2试剂3 :含NBT的缓冲液
操作步骤: G-6-PD、6-PGD操作步骤 (单位ul)————————————————————————————————————— 对照管 标准管 样本——————————————————————————————————————样本 —— —— 200水 200 —— ——试剂1 50 50 50 试剂2 50 50 50—————————————————————————————————————— 混匀,37℃水浴 ,20分钟——————————————————————————————————————试剂3 2000 2000 2000—————————————————————————————————————— 650nm 处直接在分光光度计,半自动或全自动生化仪上直接读取OD值或数据
6一磷酸葡萄糖脱氢酶计算结果以各标准管的单位浓度为横坐标,以各管透光度差值为纵坐标作图。(适用于分光光度计)全自动或半自动生化仪直接读取数据为G-6-PD+6-PGD的活性。6-PGD=结果—G-6-PD正常叁考值:各实验室应建立自己的正常值,下列正常参考值仅供参考:其正常值为:G6PD/6PGD大于1
注意事项:1. 样品测定值超过上限,用生理盐水稀释后重新测定,结果乘以稀释倍数。2. 本法以定值血清为标准,准确性高。3. 本产品仅用于体外诊断,内含叠氮钠,应避免直接接触皮 肤和眼睛,切勿吞咽。4. 本产品应在2~8℃避光贮存,避免在2~8℃以上及0℃以下存放。
6一磷酸葡萄糖脱氢酶 本试剂盒主要技术指标:1、 线性范围:0-15U/L2、 精密度:批内变异系数:CVw<7.3%; 批间变异系数:CVw < 10% 。3、 灵敏度:<0.02U/L
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