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    大鼠基质金属蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)酶联免疫吸附测定试剂盒

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    大鼠基质金属蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)酶联免疫吸附测定试剂盒

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    • 商家诚信度 
    • 入驻年限  5年
    • 湖北省武汉市东湖新技术开发区高新大道858号生物医药园二期B18栋

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      • 货号:

        E-EL-R0540c

      • 样本:

        血清,血浆,组织均浆,细胞培养上清等

      • 应用:

        科研实验

      • 检测方法:

        酶联免疫

      • 检测限:

        0.16-10 ng/mL

      • 供应商:

        武汉伊莱瑞特生物科技股份有限公司 

      • 数量:

        现货

      • 规格:

        96T/Kit

      ,货号:E-EL-R0540c   
      名称:  

      用途
      该试剂盒用于体外定量检测大鼠血清、血浆或其他相关生物液体中TIMP-1浓度。

      检测原理
      本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗大鼠TIMP-1抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的大鼠TIMP-1会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗大鼠TIMP-1抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗大鼠TIMP-1抗体与结合在包被抗体上的大鼠TIMP-1结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB)TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,TIMP-1浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中TIMP-1的浓度。
      反应类型 双抗体夹心
      规格 96 T
      反应时间 4.5h
      反应性 General
      检测方法 比色法
      检测范围 0.1610ng/mL
      灵敏度 0.1ng/mL
      样本体积 100μL
      样本类型 Serum, plasma and other biological fluids

      特异性:可检测大鼠TIMP-1,且与其它相关蛋白无明显交叉反应。
      重复性:板内,板间变异系数均<10%

      典型数据
      以下数据和曲线仅供参考,实验者需根据自己的实验建立标准曲线。
      (ng/mL) O.D. Average Corrected
      10 2.336 2.356 2.293
      2.376
      5 1.609 1.628 1.565
      1.647
      2.5 0.882 0.868 0.805
      0.854
      1.25 0.389 0.393 0.33
      0.397
      0.63 0.259 0.257 0.194
      0.255
      0.31 0.169 0.157 0.094
      0.145
      0.16 0.106 0.113 0.05
      0.12
      0 0.062 0.063 --
      0.064

      精密度
      板内精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在1块板子上检测20次。
      板间精密度:低浓度样本,中浓度样本和高浓度样本分别在3块板子上检测20次。
        Intra-assay Precision Inter-assay Precision
      Sample 1 2 3 1 2 3
      n 20 20 20 20 20 20
      mean(ng/mL) 0.5 1.6 3.9 0.5 1.7 3.8
      Standard deviation 0.03 0.08 0.14 0.03 0.1 0.2
      CV (%) 6 5 3.59 6 5.88 5.26

      回收率
      分别往5个不同样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围和平均回收率。
      Sample Type Range (%) Average Recovery (%)
      Serum (n=5) 92-107 99
      EDTA plasma (n=5) 87-99 93
      Cell culture media (n=5) 90-103 97

      线性
      分别往5个样本中添加已知浓度的目标蛋白,做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。将5个样本分别稀释2倍,4倍,8倍,16倍做回收实验,得出回收率范围及平均回收率。
          Serum
      (n=5)
      EDTA  plasma
      (n=5)
      Cell culture media
      (n=5)
      1:2 Range (%) 88-102 95-109 91-102
      Average (%) 93 102 96
      1:4 Range (%) 93-111 81-96 90-105
      Average (%) 101 87 97
      1:8 Range (%) 94-107 87-100 96-110
      Average (%) 101 94 103
      1:16 Range (%) 96-109 84-95 93-107
      Average (%) 102 89 101

      试剂盒组成及保存
      未拆封的试剂盒可在4保存一周;如果一周以后才使用试剂盒,请拆开试剂盒按照下表中的条件分别保存各组分。
      名称 规格 保存条件
      ELISA 酶标板
      Micro ELISA Plate
      8 ×12 -20,
      可存放6个月
      冻干标准品
      Reference Standard
      2
      浓缩生物素化抗体(100×)
      Concentrated Biotinylated Detection Ab(100×)
      1 120μL
      浓缩HRP酶结合物(100×)
      Concentrated HRP Conjugate(100×)
      1 120μL -20(避光),
      可存放6个月
      标准品&样品稀释液
      Reference Standard & Sample Diluent
      1 20mL 4,
      可存放6个月
      生物素化抗体稀释液
      Biotinylated Detection Ab Diluent
      1 14mL
      酶结合物稀释液
      HRP Conjugate Diluent
      1 14mL
      浓缩洗涤液
      Concentrated Wash Buffer
      1 30mL
      底物溶液(TMB)
      Substrate Reagent
      1 10mL 4(避光)
      反应终止液
      Stop Solution
      1 10mL 4
      封板覆膜
      Plate Sealer
      5  
      产品说明书
      Manual
      1
      质检报告
      Certificate of Analysis
      1

      说明:所有试剂瓶盖须旋紧以防止蒸发和微生物的污染。
      试剂体积以实际发货版说明书为准。相关试剂在分装时会比标签上标明的体积稍多一些,请在使用时量取而非直接倒出。

      试验所需自备物品
      1. 酶标仪(450nm波长滤光片)
      2. 高精度移液器,EP管及一次性吸头:0.5-10 μL, 2-20 μL, 20-200 μL, 200-1000 μL
      3. 37恒温箱,双蒸水或去离子水
      4. 吸水纸

      操作步骤
      1.Add 100 μL of standard or sample to each well.

      2.Remove the liquid.

      3.Add 100 μL Biotinylated Detection Ab. Incubate 1 hour at 37℃.Aspirate and wash 3 times.

      4.Add 100 μL HRP Conjugate. Incubate 30 min at 37℃.Aspirate and wash 5 times.

      5.Add 90 μL of Substrate Reagent. Incubate for 15 min at 37℃.

      6.Add 50 μL of Stop Solution.

      7.Read the OD at 450 nm immediately. Calculation of the results.
      更多产品详情,请点击官网:www.elabscience.cn

       

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