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TOLL样受体放免试剂盒说明书
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钰博生物
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酶联免疫
科研
血清/组织/尿液
TOLL样受体放免试剂盒说明书 TLRs-3(HY-10204) RIA KIT Toll样受体家族(Pattern recognition receptor,TLRs)成员属模式识别受体(Pattern recognition receptor,PRR),是重要的天然免疫分子。目前对其研究主要集中在对细菌及病毒的识别机制上,并被视为联系天然免疫与获得性免疫之间的桥梁。目前,在哺乳动物及人类中已经发现的人TIRs家族成员有11个。其中了解比较清楚的有TIR2,TIR4,TIR5和TIR9。人的TLRs家族基因定位分别是定(TLR1,2,3,6,10)4号染色体,9号染色体(TLR4),1号染色体(TLR5),3号染色体(TLR9),x号染色体(TLR7,8)。根据TLRs细胞分布特征,可将其分为普遍存在型(TLR1)、限制存在型(TLR2、TLR4、TLR5)及特异存在型(TLR3)3类。TLR3特异识别病毒复制的中间产物dsRNA,从而激活NFкB和干扰素IFNβ前体。Doyle S E等证实,抗TLR3单克隆抗体能抑制成纤维细胞IFNβ的产生。Christopher A等证实TLR3还具有调控鼻病毒对人支气管细胞感染的能力,这也说明了TLR3在宿主抵抗活病毒中发挥重要的作用。 标本的收集:空腹抽静脉血2ml离心取血清,-20℃保存三个月。 该药盒主要应用范围:* 抗病毒的研究 TOLL样受体放免试剂盒说明书 药盒组成:(常温运输,4℃保存)1. Toll缓冲液1瓶2. Toll(第二抗体)1瓶,用前充分摇匀。3. Toll标准品5瓶,浓度为5、10、20、40、80 ng/mL4. Toll抗体 1瓶。5. 125I –Toll 1瓶 测定方法:本实验采用平衡法,取聚苯乙烯试管编号,按下表操作: Toll RIA加液程序 (单位: ul ) ———————————————————————————— 试 剂 T NSB S0 S1~S5 样 品 ———————————————————————————— 缓 冲 液 —— 200 100 —— —— 标 准 品 —— —— —— 100 —— 样 品 —— —— —— —— 100 抗 体 —— —— 100 100 100 125I- BMP-7 100 100 100 100 100 ———————————————————————————— 摇匀4℃ 放置24小时 ———————————————————————————— 分 离 剂 —— 500 500 500 500 ————————————————————————————混匀,室温放置15分钟后,3500 转/分 4℃离心20 min,弃上清液,测沉淀cpm数。 结果计算:以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测样品结合百分率,在半对数坐标纸上绘制标准曲线,并查出样品值,或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数,标准曲线及样品浓度。TOLL样受体放免试剂盒说明书注意事项: 本月标准品每瓶用 ml 缓冲液稀释 本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释 本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液溶解 本月药盒有效期为一个月,分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻) 本试剂盒主要技术指标:1、 NSB:<5%。2、 灵敏度:<0.5 ng/ml。3、 标准曲线范围:5-80ng/ml4、 批内变异系数:CVw<7.3%; 批间变异系数:CVw < 10% 。5、 正常参考值:38ng/ml各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。 本月药盒参考数据: ————————————————————————————————————————— T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5 ————————————————————————————————————————— CPM ————————————————————————————————————————— N/T% B0/T% B/ B0 % —————————————————————————————————————————
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