IFN-γ干扰素放免药盒操作说明书
IFN-γ(HY-10138) RIA KIT
于1957年主要由激活的T细胞和NK细胞产生的一种具有抗病毒和免疫调节功能的细胞因子.由166个氨基酸组成的多肽。γ-干扰素(Interferon-γ)具有抗炎和对免疫应答的负向调节作用。γ-干扰素通过调节NK细胞受体及其配体的表达。负向调节NK细胞和CTL细胞的效应功能,诱导调节性,T细胞的产生,并作为调节T细胞早期短时分泌重要介质 ,抑制初始T细胞的活性和增殖。目前明确的生物学作用:抗病毒、增殖性、抗肿瘤及免疫调节。
标本收集:空腹抽静脉血4ml于特凝管中(含有10%EDTA . Na2 30ul和抑肽酶40ul),实验前标本需过 C18柱。
该药盒主要应用范围:
* 抗病毒、抗肿瘤机理的基础研究。
* 免疫学基础的研究。
* 与其他激素关系的研究。
药盒组成:
1. IFN-γ标记一瓶; 2 IFN-γ抗体一瓶;
3. IFN-γ标准品5瓶,分别为15.6、31、62、125、250、500、1000pg/ml。
4. 缓冲液一瓶; 5.分离剂(第二抗体)一瓶。
IFN-γ干扰素放免药盒操作说明书 操作方法:
IFN-γ RIA 操作程序 (单位:ng/ml)
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试 剂 T NSB S0 标准品 标 本
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缓 冲 液 —— 200 100 —— ——
标 准 品 —— —— —— 100 ——
标 本 —— —— —— —— 100
抗 体 —— —— 100 100 100
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充分混匀,放4℃ 24小时
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125I- ADM 100 100 100 100 100
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充分混匀,4℃ 24小时
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分 离 剂 —— 500 500 500 500
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混匀,室温放置1.5小时后,3500转/分 离心 20分,去上清,测沉淀CPM值。
结果计算:
以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测物结合百分率,在半对数座标纸上绘制标准曲线,并查出样品值或由自动Υ-计数仪器直接读出结果。
IFN-γ干扰素放免药盒操作说明书 注意事项:
本月每瓶标准品用 1.4 ml缓冲液稀释;
本月每瓶抗体用 10 ml缓冲液稀释;
本月每瓶标记用 10 ml缓冲液稀释。
本试剂盒主要技术参数:
NSB:<5%。
灵敏度:<25pg/ml。
精密度:批内CV<7.7%,批间C
正常参考数据:30~50Pg/ml
该说明书由英国皇家医学院内分泌部《IFN-γ药盒操作说明书》翻译而来。
Department of Endocrinology Royal Postgraduate Medical School
本次药盒参考数据:
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T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5
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CPM
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N/T% B0/T% B/ B0 %
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