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    鸭免疫球蛋白E(IgE)检测试剂盒

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    鸭免疫球蛋白E(IgE)检测试剂盒
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    • 入驻年限  7年
    • 上海市沪闵路6088号龙之梦大厦8楼806室
    • 货号: YB-E13224
      样本: 血清/组织/尿液
      应用: 科研
      检测方法: 酶联免疫
      检测限: 见说明书
      供应商: 钰博生物
      数量: 大量
      ELISA实验中有三个必要的试剂:免疫吸附剂、结合物和酶的底物。完整的鸭免疫球蛋白E(IgE)检测试剂盒应该包含以下各组分:
      (1)已包被抗原或抗体的固相载体(免疫吸附剂);
      (2)酶标记的抗原或抗体(结合物);
      (3)酶的底物;
      (4)阴性对照品和阳性对照品(定性测定中),参考标准品和控制血清(定量测定中);
      (5)结合物及标本的稀释液;
      (6)洗涤液;
      (7)酶反应终止液。
      一、免疫吸附剂
        已包被抗原或抗体的固相载体在低温(2~8℃)干燥的条件下一般可保存6个月。有些不完整的试剂盒,仅供应包被用抗原或抗体,检测人员需自行包被。以下简述固相载体和包被过程。
      鸭免疫球蛋白E(IgE)检测试剂盒实验步骤 
      一、预试验
      (一)抗体包被的酶标板的制备
      1.以碳酸盐缓冲液将抗体稀释成适当浓度(参考:5ug/ml),加入酶标板(50ul/孔),以胶带封口,于4℃过液。
      2.弃抗体液,以双蒸水冲洗3次,自然干燥后以胶带封口。此为由已知抗体包被的酶标板,备用。
      (二)底物浓度的摸索
         在底物缓冲液中加入不同量的底物(参考:5mg/10ml),加入酶标板中(50ul/孔),以胶带封口,37℃避光保存2h,在没有明显变色的条件下选择尽可能大的底物浓度。
      (三)酶标抗原浓度的摸索
         选择明确为阴性的标本,加至已包被抗体的酶标板中(50ul/ 孔);用稀释液稀释酶标抗原至适当倍数(参考:40~4000倍),同时加入酶标板中(50ul/ 孔),混合后封口后于37℃作用30min。以洗液连续冲洗5次,然后于吸水纸上拍干,加入已摸索好的底物封口后于37℃作用30min,在保持有明显变色的条件下选择尽可能小的酶标抗原浓度。
      二、鸭免疫球蛋白E(IgE)检测试剂盒正式试验
      1.  以稀释液将待检标本做适当稀释(预试中确定)加入包被有已知抗原的酶标板中(50ul/孔),加封口胶带于37℃作用30min。
      2.  弃反应液,以冲洗液连续洗板5次并于吸水纸上拍干。
      3.  加入酶标抗体(浓度在预试中确定)。加封口胶带后于37℃作用30min。
      4.  重复第2步。
      5.  加底物(浓度在预试中确定),加封口胶带后于室温下避光作用5-60 min,其间不时观察,显色满意后加终止液50ul/孔。
      6.  于酶标仪测定OD值,OPD用492nm测定,TMB用450nm测定。
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