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基质金属蛋白酶3放免试剂盒
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上海信裕
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基质金属蛋白酶3放免试剂盒说明书
MMP-3(HY-10205) RIA KIT 基质金属蛋白酶3(MMP-3,Matrix metalloproteinases-3)也叫间充质溶解素, 是分解细胞外基质的蛋白酶类中最重要的一类,分子量为57kd,常由结缔组织、巨噬细胞和肿瘤细胞产生。多种细胞在被适当的刺激后,都可以表达MMP-3,如成纤维细胞、软骨细胞、内皮细胞、巨噬细胞、血管平滑肌细胞、造骨细胞、角质化细胞等等。炎症因子如IL-1 、肿瘤坏死因子、表皮生长因子、血小板源生长因子、佛波醇等等都是诱导试剂。而视黄酸、糖皮质激素、雌激素、与TGF-β都抑制MMP-3的表达。MMP3能够剪切其它种类的MMP,比如MMP1和MMP9,使之由非活性的酶原转化为有活性的酶原。
基质金属蛋白酶3放免试剂盒测定原理:采用竞争机制原理,标准品或样品中的MMP-3和加入的125I –MMP-3共同与一定量的特异性抗体产生竞争性免疫反应。 药盒主要应用范围: *心血管疾病标本的收集:空腹抽静脉血2ml离心取血清,-20℃保存三个月。药盒组成:(常温运输,4℃保存)1. MMP-3缓冲液1瓶2. MMP-3(第二抗体)1瓶,用前充分摇匀。3. MMP-3标准品5瓶,浓度为20、40、80、160、320 ug/mL4. MMP-3抗体 1瓶。5. 125I –MMP-3 1瓶 基质金属蛋白酶3放免试剂盒测定方法:本实验采用平衡法,取聚苯乙烯试管编号,按下表操作: MMP-3 RIA加液程序 (单位: ul ) ———————————————————————————— 试 剂 T NSB S0 S1~S5 样 品 ———————————————————————————— 缓 冲 液 —— 200 100 —— —— 标 准 品 —— —— —— 100 —— 样 品 —— —— —— —— 100 抗 体 —— —— 100 100 100 125I- MMP-3 100 100 100 100 100 ———————————————————————————— 摇匀4℃ 放置24小时 ———————————————————————————— 分 离 剂 —— 500 500 500 500 ————————————————————————————混匀,室温放置15分钟后,3500 转/分 4℃离心20 min,弃上清液,测沉淀cpm数。
结果计算:以N/T、B/T计算NSB、S0结合百分率,以B/B0计算标准及待测样品结合百分率,在半对数坐标纸上绘制标准曲线,并查出样品值,或由自动r计数仪预先编制程序。直接给出有关参数,标准曲线及样品浓度。基质金属蛋白酶3放免试剂盒注意事项: 本月标准品每瓶用 ml 缓冲液稀释 本月药盒抗体每瓶用 ml缓冲液稀释 本月药盒标记每瓶用 ml缓冲液溶解 本月药盒有效期为一个月,分离剂在使用前充分混匀(不可冰冻)本试剂盒主要技术指标:1、 NSB:<5%。2、 灵敏度:<4 ug/ml。3、 标准曲线范围:20-320ug/ml4、 批内变异系数:CVw<7.3%; 批间变异系数:CVw < 10% 。5、 正常参考值:18±6ug/ml各实验室应根据自己的条件建立自己的正常对照组。 本月药盒参考数据: ————————————————————————————————————————— T NSB S0 S1 S2 S3 S4 S5 ————————————————————————————————————————— CPM ————————————————————————————————————————— N/T% B0/T% B/ B0 % —————————————————————————————————————————
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