首页 » 试剂 » 美国Active Motif DNA甲基化检测试剂盒

美国Active Motif DNA甲基化检测试剂盒

技术资料: 免费索取技术资料
 丁香通采购保障计划,让您的采购更放心。查看详情

供应商信息

深圳欣博盛生物科技有限公司
商家诚信度:
成立时间:2007
入驻丁香通年限:7年
商家等级:金牌客户
产品信息完整度:56%
联系人:欣博盛市场部 点击这里给我发消息

若您通过QQ未能联系到商家,您可以给商家发送站内信,与其取得联系。

扫一扫
微信联系商家

邮件: service@neobioscience.com

电话:0755-26755892

地址:深圳市福田区上梅林梅华路105号多丽工业区科技楼0605室

该商家已通过实名认证
 

产品详情

品牌: activemotif
货号: 55001
供应商: 欣博盛
数量: 大量
规格: 50 rxns
DNA甲基化是一种基本的表观遗传学修饰,在基因表达调控、发育调节、基因组印迹等方面发挥重要作用。在DNA甲基转移酶的催化下,CpG双核苷的胞嘧啶第5 位碳原子被选择性地添加甲基基团。 在人类肿瘤中,普遍发生甲基化异常的现象,由于甲基化与胚胎发育、细胞周期调控相关,因此DNA甲基化状态的变化可作为疾病诊断和预后的一个有用的指示器。

最早在1970年,重亚硫酸盐转化就被用于鉴别DNA中的胞嘧啶和5-甲基胞嘧啶(5-mC)。现在认为在重亚硫酸盐处理过程中,5-甲基胞嘧啶(5-mC)和5-羟甲基胞嘧啶(5-hmC)都不会发生碱基的变化,因此这种方法不能用来区别不同的甲基化修饰。在重亚硫酸盐转化过程中,DNA首先用重亚硫酸钠处理,在高温和低pH条件下,将变性DNA(单链DNA)中的胞嘧啶转化为胞嘧啶-重亚硫酸盐衍生物,这个反应是可逆的;接下来胞嘧啶-重亚硫酸盐衍生物发生不可逆的水解脱氨基过程,形成尿嘧啶-重亚硫酸盐衍生物。最后在高pH条件下尿嘧啶-重亚硫酸盐衍生物脱磺酸基形成尿嘧啶。只有未甲基化的胞嘧啶在重亚硫酸盐处理下发生碱基变化, 5-mC和5-hmC仍然保持不变。转化处理后的DNA经PCR扩增,尿嘧啶(U)转变为胸腺嘧啶(T)。重亚硫酸盐转化示意图如下:



重亚硫酸盐处理将未甲基化的胞嘧啶转化为尿嘧啶

Active motif公司的Bisulfite Conversion Kit提供优化的转化试剂、简单易用的操作步骤以及阳性对照PCR引物,简化了DNA甲基化检测的过程。整个转化可在1.5小时之内完成,转化效率高达99%。试剂盒提供转化特异性PCR引物,可用于测序前验证重亚硫酸盐转化效率。阳性对照PCR引物适用于重亚硫酸盐转化处理的人和小鼠DNA,经PCR扩增可得到220 bp的产物。
Active motif同时也提供MethylDetector™重亚硫酸盐修饰试剂盒,该试剂盒是Active motif公司最初提供的一款DNA甲基化检测试剂盒,原理和Bisulfite Conversion Kit一样,但转化时间需要5小时。



图2 Bisulfite Conversion Kit 操作流程

使用Bisulfite Conversion Kit,将目的DNA用蛋白酶K处理,加入重亚硫酸盐转化试剂和DNA变性剂,在温度循环仪中进行快速热变性。经过1.5小时的DNA转化反应,样品加入到试剂盒里的DNA纯化柱,脱盐后洗脱DNA,可用于PCR或其他的下游实验。


阳性对照转化特异性PCR引物可用于特异性扩增转化后的人和小鼠DNA

使用Bisulfite Conversion Kit处理人(A)和小鼠(B)基因组DNA,处理(Bis)和未处理(Untr)的DNA分别用阳性对照转化特异性PCR引物进行PCR扩增分析。阳性对照PCR引物专门适用于经重亚硫酸盐转化的DNA,因此会扩增出220bp的条带,而未处理的DNA没有扩增出相应条带。

产品信息
 供货商
 产品编号
 产品名称
 规格
Active Motif
 55016
 Bisulfite Conversion Kit
 50 rxns
Active Motif
 55001
 MethylDetector™
 50 rxns
Active Motif
 55003
 Fully Methylated Jurkat DNA
 10 µg
Active Motif
 55007
 Jurkat genomic DNA
 10 µg

参考文献
1.“Aberrant methylation of the PTCH1 gene promoter region in aberrant crypt foci.” by Peng L. et al. (2013) Int J Cancer, 132(2):  E18-25.
2. “Transcription intermediary factor 1γ is a tumor suppressor in mouse and human chronic myelomonocytic leukemia.” by Aucagne R. et al. (2011) J Clin Invest., 121(6):  2361-2370.
3. “Ploidy and large-scale genomic instability consistently identify basal-like breast carcinomas with BRCA1/2 inactivation.” by Popova T. et al. (2012) Cancer Res., 72(21):  5454-5462.
4. “miR-126 and miR-126* repress recruitment of mesenchymal stem cells and inflammatory monocytes to inhibit breast cancer metastasis.” by Zhang Y. et al. (2013) Nat Cell Biol., 15(3):  284-294.
5. “Cerebellum-specific and age-dependent expression of an endogenous retrovirus with intact coding potential.” by Lee K.H. et al. (2011) Retrovirology, 8:  82.

更多产品信息请联系欣博盛生物,全国服务热线 4006 800 892,邮箱 market@neobioscinece.com.
温馨提示:不可用于临床治疗。

相关产品

细胞内 FCM 试剂盒: sc-45063 丁香通标准抗体
品牌:santacruze  货号:sc-45063  价格:询价 
DNA甲基化检测 DNA甲基化是哺乳类动物一个重要的基因外遗传信号。有研究表明,DNA甲基化与大多数肿瘤的发生相关,抑癌基因启动子CpG岛的高度甲基化可引起抑癌基因表达沉默,细胞出现无节制生长,导致肿瘤的发生。目前,基因的甲基化研究主要结合亚硫酸氢钠处理和PCR技术,分为甲基化特异性PCR(Methylation specific PCR,MSP)和硫化测序PCR(Bisulfite sequencing PCR, BSP)。 甲基化特异性的PCR(MSP)原理:        双链DNA变性解链后,在HSO3-作用下发生C→U转化,C若已有甲基化则无此改变;甲基化修饰只发生于5′→3′方向C-G相联结构的C上,因此在HSO3-作用后,DNA CpG岛若无甲基化,则序列中的改变为C→U,CG→UG,若有甲基化则为C→U,CG→CG,用不同的引物做PCR,即可检测出这种差异,从而确定基因有无CpG岛甲基化。从理论上说,DNA发生甲基化的MSP产物的序列与原序列比较,变化为C→T,CG→CG,相应其互补链的改变为G→A,CG→CG。然后设计针对甲基化和非甲基化序列的引物并进行聚合酶链反应(PCR)扩增,最后通过琼脂糖凝胶电泳分析,确定与引物互补的DNA序列的甲基化状态。MSP法灵敏度较高,应用范围广。 硫化测序PCR(BSP)原理:        结合重亚硫酸盐的测序法是一种灵敏的能直接检测分析基因组DNA甲基化模式的方法。重亚硫酸盐处理后,用针对改变后的DNA序列设计特异性引物并进行聚合酶链式反应(PCR)。 PCR产物中原先非甲基化的胞嘧啶位点被胸腺嘧啶所替代,而甲基化的胞嘧啶位点保持不变。PCR产物克隆后进行测序。通过这个方法能得到特定位点在各个基因组DNA分子中的甲基化状态。 服务流程: 1)   根据目的基因启动子序列设计相应引物; 2)   基因组DNA的提取和定量; 3)   亚硫酸氢钠修饰基因组DNA; 4)   修饰后DNA纯化回收; 5)   a、结合实时定量PCR的qMSP;       b、BSP,对PCR产物进行测序并与未经处理的序列比较; 6)   数据处理; 7)   向客户提交数据分析结果与实验报告。
 世和基因--高通量测序服务专家高通量测序服务- 甲基化测序(Whole Genome BS-Seq, WGBS)    2016年,世和基因引进10台HiSeq X “超级” 测序平台,致力于成为全球领先的基因组学研究解决方案提供者,专注于动植物生命科学,临床转化医学,人类健康,及药物研发等领域的开发应用。现在公司高通量测序平台包括 10 台 HiSeq X、HiSeq 4000、MiSeq、NextSeq 500等平台,可满足临床诊疗业务及科研业务不同需求,是基因组学的首选合作伙伴。HiSeq X Ten是Illumina公司推出的最高通量,最高效率,最低成本的测序系统,首次实现了将人类基因组重测序成本降低到了1000美金以下。HiSeq X Ten由10台超高通量测序仪HiSeq X组成,系统单台仪器每次运行可产出高达1.8Tb的数据,测序读长为2×150b,运行时间为三天以内。10台仪器同时运行时,每年可完成可超过18000个人类基因组重测序(30×覆盖度)。因此,HiSeq X Ten系统将使研究人员更易于开展大规模人类基因组测序,并将有利于深入挖掘与癌症及复杂疾病相关的遗传变异。   DNA甲基化对生命活动非常重要,是基因调控的手段之一(即通过对位于启动子及第一外显子区的CpG岛的甲基化而抑制基因的表达),是表观遗传学研究的热点。DNA甲基化是由DNA甲基转移酶(DNA methyl-transferase, Dnmt)催化,以S-腺苷甲硫氨酸(SAM)作为甲基供体,DNA上的胞嘧啶被选择性地添加甲基,形成5-甲基胞嘧啶。 通常,DNA的甲基化会抑制基因表达。DNA的甲基化状态对染色体的结构维持、X染色体失活、基因印记以及胚胎发育、正常细胞功能维持,乃至疾病、癌症发生都是十分重要的。现在甲基化测序有三种:   组甲基化测序(Whole Genome BS-Seq, WGBS)是将重亚硫酸盐(Bisulfite)处理方法和Illumina高通量测序平台Hiseq X Ten相结合,对有参考基因组信息的物种进行全基因组范围内的甲基化水平的测序。可以精确到单碱基分辨率,精确分析每一个C碱基的甲基化状态,从而构建全基因组甲基化图谱。全基因组重亚测序达到全基因组覆盖, 是研究甲基化水平的“金标准”。   观亚硫酸氢盐测序技术(Reduced Repre
用于厌氧亚硫酸盐还原杆菌的试管计数(SN标准)byxbio/进口byx437p
亚硫酸盐琼脂是南京森贝伽生物专业供应的优质培养基之一,价格优惠,质量可靠,货期短。公司承诺如有质量问题免费包退换(非人为因素),我们提供亚硫酸盐琼脂价格、用途、配制方法、实验注意事项等一系列详细信息。公司产品齐全,还专业供应各种ELISA试剂盒、标准品、抗体、染色液染色试剂盒等科研产品。期待您的来电!                                            亚硫酸盐琼脂用途:用于厌氧亚硫酸盐还原杆菌的试管计数(SN标准)使用范围:仅供科研使用规格:250g库存:提供现货(因销量问题库存会有变动,具体请与销售人员确认)保存:低温避光保存 亚硫酸盐琼脂,森贝伽生物以技术为核心并拥有完善的市场营销体系、现代化管理体系和专业化物流配送系统,最大程度满足国内外生命科研人员的产品需求。公司专门设立优质完善的客服中心及技术中心,第一时间为客户解决技术支持、产品跟踪以及售后等相关问题。欢迎咨询! 亚硫酸盐琼脂同期优质产品展示:人凝血因子Ⅸ(FⅨ)ELISA试剂盒HumancoagulationfactorⅨ,FⅨELISAKIT96T/48TAnti-Smad2/3(Mothersagainstdecapentaplegichomolog2)Smad2/3抗体0.1ml、0.2ml人凝血因子Ⅹ(FⅩ)ELISA试剂盒HumancoagulationfactorⅩ,FⅩELISAKIT96T/48TAnti-Smad4(Mothersagainstdecapentaplegichomolog4)Smad4抗体0.1ml、0.2ml人血管性血友病因子/瑞斯托霉素辅因子(VWF)ELISA试剂盒HumanvonWillebrandFactor,vWFELISAKIT96T/48TAnti-Smad7(Mothersagainstdecapentaplegichomolog7)Smad7抗体0.1ml、0.2ml人纤溶酶抗纤溶酶复合物(PAP)ELISA试剂盒Humanplasmin-antiplasmincomplex,PAPELISAKIT96T/48TAnti-SM-MHC(Cardiacmyosinheavychain)心肌肌凝蛋白抗体0.1ml、0.2ml人凝血酶抗凝血酶复合物(TAT)ELISA试剂盒Huma森贝伽sbj-p1433

数据正在加载,请稍候...

电话: 0755-26755892 联系人: 欣博盛市场部 (联系我时请说在丁香通看到的)

30秒填写信息,方便商家与您及时沟通

您未登录,马上登录 注册,即可保存询价历史
换一个



询价发送成功

深圳欣博盛生物科技有限公司 会在1个工作日内联系您!

马上登录注册,即可保存询价历史

你可能感兴趣的产品

生物学霸
帮助你升级成为学霸。
查看