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microRNA表达载体构建

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microRNA表达载体构建
MicroRNA(miRNA)是一类真核生物内源性的小分子单链RNA,通常长为18~25nt,能够通过与靶mRNA特异性的碱基配对结合,引起靶序列降解或抑制其翻译,从而对基因进行转录后的表达调控。构建miRNA表达载体,实现microRNAs在细胞中稳定表达,能够弥补瞬时转染持续时间短的不足,miRNA的表达方式通常包括pri-miRNA,pre-miRNA与成熟microRNAs形式。
百恩维生物有多种表达载体,如真核表达载体、各种病毒表达载体等;可选择各种荧光报告基因,如GFP、eGFP、tdTomato、YEP等。
百恩维生物提供以下两种miRNA表达方式:(1)pri-miRNA(初级转入产物)的表达形式;(2)pre-miRNA(miRNA前体)的表达形式。 
客户只需提供miRNA的具体信息及指定过表达载体类型(如慢病毒载体),我们完成序列合成,质粒构建。
技术流程如下:
1、miRNAs序列分析; 
2、PCR引物设计及合成; 
3、PCR扩增pri-miRNA序列或者单链互补引物退火形成pre-miRNA序列; 
4、将片段克隆至含有CMV强启动子的载体上; 
5、测序以确保插入序列正确性; 
6、向客户提交测序结果与实验方法报告单。

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microRNA表达载体构建MicroRNA(miRNA)是一类真核生物内源性的小分子单链RNA,通常长为18~25nt,能够通过与靶mRNA特异性的碱基配对结合,引起靶序列降解或抑制其翻译,从而对基因进行转录后的表达调控。构建miRNA表达载体,实现microRNAs在细胞中稳定表达,能够弥补瞬时转染持续时间短的不足,miRNA的表达方式通常包括pri-miRNA,pre-miRNA与成熟microRNAs形式。百恩维生物有多种表达载体,如真核表达载体、各种病毒表达载体等;可选择各种荧光报告基因,如GFP、eGFP、tdTomato、YEP等。百恩维生物提供以下两种miRNA表达方式:(1)pri-miRNA(初级转入产物)的表达形式;(2)pre-miRNA(miRNA前体)的表达形式。 客户只需提供miRNA的具体信息及指定过表达载体类型(如慢病毒载体),我们完成序列合成,质粒构建。技术流程如下:1、miRNAs序列分析; 2、PCR引物设计及合成; 3、PCR扩增pri-miRNA序列或者单链互补引物退火形成pre-miRNA序列; 4、将片段克隆至含有CMV强启动子的载体上; 5、测序以确保插入序列正确性; 6、向客户提交测序结果与实验方法报告单。
    构建miRNAs表达载体,实现miRNAs在细胞中稳定过表达,能够弥补瞬时转染持续时间短的不足,过表达的方式通常包括pri-miRNA,pre-miRNA与成熟miRNAs形式。莱德联康技术使用的是一下两种方式: pri-miRNA(含侧翼序列)的表达形式,Ⅱ型启动子载体; pre-miRNA的表达形式,U6启动子载体。   莱德联康生物科技有限公司还提供原位杂交、病毒包装、免疫组化、western-blot、EMSA等技术服务,现在正是促销期,优惠多多!更多详情欢迎咨询客服电话:13699728147
    构建miRNAs表达载体,实现miRNAs在细胞中的稳定过表达,能够弥补瞬时转染持续时间短的不足,过表达的方式通常包括pri-miRNA,pre-miRNA与成熟miRNAs形式,莱德尔技术使用的是以下两种方式:① pri-miRNA(含侧翼序列)的表达形式,②Ⅱ型启动子载体pre-miRNA的表达形式,U6启动子载体服务流程:1.miRNAs序列分析;2.PCR引物设计及合成;3.PCR扩增pri-miRNA序列或者单链互补引物退火形成pre-miRNA序列;4.将片段克隆到Ⅱ型启动子载体或者U6启动子载体;5.测序以确保插入序列正确性;6.向客户提交测序结果与实验方法报告单。
构建miRNAs表达载体,实现miRNAs在细胞中稳定过表达,能够弥补瞬时转染持续时间短的不足,过表达的方式通常包括pri-miRNA,pre-miRNA与成熟miRNAs形式。    达鹊生物技术使用的是以下两种方式: ● pri-miRNA(含侧翼序列)的表达形式,Ⅱ型启动子载体;● pre-miRNA的表达形式,U6启动子载体。 图1:达鹊生物技术部提供的两种miRNAs表达方式 服务流程:★  miRNAs序列分析;★  PCR引物设计及合成;★  PCR扩增pri-miRNA序列或者单链互补引物退火形成pre-miRNA序列;★  将片段克隆至Ⅱ型启动子载体或者U6启动子载体;★  测序以确保插入序列正确性;★  向客户提交测序结果与实验方法报告单。 客户提供:待研究miRNA序列信息。 我们提供:阳性克隆质粒,阳性克隆甘油菌,测序报告以及实验方法报告。 质量保证:以测序报告为准的正确的插入序列。 

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