首页 » 技术服务 » 分子生物 » 文库/载体构建 » microRNA表达载体构建

microRNA表达载体构建

microRNA表达载体构建
技术资料: 免费索取技术资料
 丁香通采购保障计划,让您的采购更放心。查看详情

供应商信息

深圳市百恩维生物科技有限公司
商家诚信度:
成立时间:2010
入驻丁香通年限:8年
商家等级:金牌客户
产品信息完整度:50%
联系人:易小姐 点击这里给我发消息

若您通过QQ未能联系到商家,您可以给商家发送站内信,与其取得联系。

扫一扫
微信联系商家

邮件: sales@biowit.com

手机:13652310186

电话:0755-26980323转802

地址:深圳市宝安区67区留仙一路高新奇战略新兴产业园1号孵化楼5楼

该商家已通过实名认证
 

产品详情

microRNA表达载体构建
MicroRNA(miRNA)是一类真核生物内源性的小分子单链RNA,通常长为18~25nt,能够通过与靶mRNA特异性的碱基配对结合,引起靶序列降解或抑制其翻译,从而对基因进行转录后的表达调控。构建miRNA表达载体,实现microRNAs在细胞中稳定表达,能够弥补瞬时转染持续时间短的不足,miRNA的表达方式通常包括pri-miRNA,pre-miRNA与成熟microRNAs形式。
百恩维生物有多种表达载体,如真核表达载体、各种病毒表达载体等;可选择各种荧光报告基因,如GFP、eGFP、tdTomato、YEP等。
百恩维生物提供以下两种miRNA表达方式:(1)pri-miRNA(初级转入产物)的表达形式;(2)pre-miRNA(miRNA前体)的表达形式。 
客户只需提供miRNA的具体信息及指定过表达载体类型(如慢病毒载体),我们完成序列合成,质粒构建。
技术流程如下:
1、miRNAs序列分析; 
2、PCR引物设计及合成; 
3、PCR扩增pri-miRNA序列或者单链互补引物退火形成pre-miRNA序列; 
4、将片段克隆至含有CMV强启动子的载体上; 
5、测序以确保插入序列正确性; 
6、向客户提交测序结果与实验方法报告单。

相关产品

UltraCruz™载体硝酸纤维素转膜,0.45μm,20cmx3m: sc-201698 丁香通标准抗体
品牌:santacruze  货号:sc-201698  价格:询价 
microRNA表达载体构建MicroRNA(miRNA)是一类真核生物内源性的小分子单链RNA,通常长为18~25nt,能够通过与靶mRNA特异性的碱基配对结合,引起靶序列降解或抑制其翻译,从而对基因进行转录后的表达调控。构建miRNA表达载体,实现microRNAs在细胞中稳定表达,能够弥补瞬时转染持续时间短的不足,miRNA的表达方式通常包括pri-miRNA,pre-miRNA与成熟microRNAs形式。百恩维生物有多种表达载体,如真核表达载体、各种病毒表达载体等;可选择各种荧光报告基因,如GFP、eGFP、tdTomato、YEP等。百恩维生物提供以下两种miRNA表达方式:(1)pri-miRNA(初级转入产物)的表达形式;(2)pre-miRNA(miRNA前体)的表达形式。 客户只需提供miRNA的具体信息及指定过表达载体类型(如慢病毒载体),我们完成序列合成,质粒构建。技术流程如下:1、miRNAs序列分析; 2、PCR引物设计及合成; 3、PCR扩增pri-miRNA序列或者单链互补引物退火形成pre-miRNA序列; 4、将片段克隆至含有CMV强启动子的载体上; 5、测序以确保插入序列正确性; 6、向客户提交测序结果与实验方法报告单。
简介构建miRNAs表达载体,实现miRNAs在细胞中稳定过表达,能够弥补瞬时转染持续时间短的不足,过表达的方式通常包括pri-miRNA,pre-miRNA与成熟miRNAs形式,蓝吉生物技术使用的是以下两种方式:● pri-miRNA(含侧翼序列)的表达形式,Ⅱ型启动子载体;● pre-miRNA的表达形式,U6启动子载体。   服务流程:★  miRNAs序列分析;★  PCR引物设计及合成;★  PCR扩增pri-miRNA序列或者单链互补引物退火形成pre-miRNA序列;★  将片段克隆至Ⅱ型启动子载体或者U6启动子载体;★  测序以确保插入序列正确性;★  向客户提交测序结果与实验方法报告单。
简介miRNA(microRNA)是一类近几年在真核生物中发现的一类具有调控功能的非编码RNA,长度约20-24个核苷酸,是发夹结构的约70-90个碱基大小的单链RNA前体经过Dicer酶加工后生成,主要参与基因转录后水平的调控。近来发现它们在果蝇的细胞增殖、死亡及脂肪代谢,线虫极性的形成,哺乳动物的造血干细胞的分化等过程中起了重要的调控作用。在植物中,miRNA还参与了叶子与花的发育过程。动物(尤其是人)miRNA的生物合成过程已经初步阐明:首先,miRNA基因的初级转录产物(pri-miRNA)在细胞核中被RNaseIII Drosha切割成为前体miRNA(pre-miRNA),在最初的剪切后,pre-miRNA在转运蛋白exportin-5的作用下由核内转到胞质中,然后由另一种RNaseIII Dicer进一步切割产生成熟的miRNA。这些成熟的miRNA与其他蛋白质一起组成RISC(RNA-induced silencing complex)复合体,从而引起靶mRNA的降解或者翻译抑制。 miRNA过表达慢病毒服务流程   实验流程 优势 pre-miRNA策略 合成pre-miRNA构建到含有mir30侧翼双臂序列的慢病毒过表达载体 直接合成,免去基因调取流程,易于通量化 pri-miRNA策略 从基因组中调取pri-miRNA后构建到慢病毒过表达载体 保存miRNA天然双臂  miRNA抑制慢病毒服务 miRNA抑制剂(miRNA inhibitor)表达后则高效、特异地结合细胞内成熟的靶miRNA,形成稳定的复合物,阻止了miRNA对靶标mRNA的降解或者翻译抑制,上调miRNA靶标基因的表达。   实验流程 优势 SiRNA抑制 采用U6或H1之类的POL III启动子驱动抑制miRNA片段。 直接合成,免去基因调取流程 MiRNA Sponge 采用串联的多个miRNA互补序列形成吸附“海绵” 高效,可实现组织特异性表达  辉骏载体列表 miRNA载体 载体骨架元件 应用 FT3
我们的分子生物学技术平台主要包括基因调控元件的克隆,基因修饰,基因报告系统、基因表达系统和转基因载体的构建。 基于分子生物学技术平台,我们提供的技术服务包括DNA片段的克隆,包括基因调控元件、SiRNA基因干扰片段、miRNA基因表达、基因表达、基因打靶等质粒载体的构建;表达系统包括E.coli、昆虫及哺乳细胞表达系统。 1. RNA干扰 1) RNAi表达质粒构建 百恩维生物采用U6或H1启动子的shRNA表达载体,可以在细胞内直接转录出shRNA,行使其RNAi功能,GFP可以监测其转染效率,抗性基因可以用于药物压力下稳定细胞株的筛选,能够解决化学合成siRNA干扰时间短的缺点。同时提供用于RNA干扰实验的腺病毒载体 (Adenoviral vector)、腺相关病毒(AAV Vector)和慢病毒载体(Lentiviral vector)病毒型载体构建服务。我们根据客户提供的基因ID设计3到4个shRNA靶点并合成引物,构建到RNAi表达载体,测序验证正确的shRNA干扰载体,进行高纯度质粒抽提,shRNA干扰载体后续可以直接进行细胞转染实验,病毒包装实验和稳定细胞株筛选实验等。 2) microRNA质粒构建 百恩维生物采用CMV启动子miRNA表达载体,可以在细胞内直接转录出miRNA,行使其功能,提供pri-miRNA表达载体(pri-miRNA expression vector)、pre-miRNA表达载体(pre-miRNA expression vector)构建服务;同时还提供腺病毒载体 (Adenoviral vector)、腺相关病毒载体(AAV vector)和慢病毒载体(Lentiviral vector)病毒型载体miRNA构建服务, miRNA表达载体后续可以直接进行细胞转染实验,病毒包装实验和稳定细胞株筛选实验等。 2. 基因克隆与亚克隆 由客户提供基因ID或者基因序列,为客户从cDNA或者基因组DNA中钓取目的基因,并克隆至指定载体上。由于材料的个体差异及PCR过程中会产生突变等原因,我们不保证获取的基因与参考序列的碱基完全一致。在基因的亚克隆服务中,我们可以将目的基因或某功能元件片段亚克隆转移至客户载体或者百恩维提供的表达载体上。 3. 定点突变服务 在很多情

数据正在加载,请稍候...

电话: 0755-26980323转802 联系人: 易小姐 (联系我时请说在丁香通看到的)

30秒填写信息,方便商家与您及时沟通

您未登录,马上登录 注册,即可保存询价历史
换一个



询价发送成功

深圳市百恩维生物科技有限公司 会在1个工作日内联系您!

马上登录注册,即可保存询价历史

你可能感兴趣的产品

生物学霸
帮助你升级成为学霸。
查看