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    SYBR Green I 核酸凝胶染料

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    SYBR Green I 核酸凝胶染料

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      • 货号:

        BD001

      • 保存条件:

        ≤–20° C 干燥 避光

      • 供应商:

        Biomics Biotech

      • 数量:

        大量

      • 英文名:

        SYBR Green I

      • 保质期:

        6个月至1年

      • 规格:

        1ml 10,000×

      免费试用活动开始了!
       
      试用产品:SYBR Green I 核酸凝胶染料(规格:200ul,1000×)
      活动时间:即日起至2014年5月31日
      试用细则:1、活动针对学校、医院、科研院终端客户所在实验室,                           每个实验室只能申请一份试用装;
                         2、申请结束后,我们会统一审核申请信息,并与审核通                           过者联系确认;
                         3、试用结束,需要提供一份试用报告(可下载报告模                             板,发送至toni@biomics.cn );
                         4、本次活动邮费均有我公司承担;
                         5、最终解释权归Biomics所有。

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      SYBR Green I 核酸凝胶染料-高效无毒的核酸染料

      产品信息
      产品 包装 规格 储存 稳定性
      SYBR Green I 核酸凝
      胶染料(BD050)
      50μl
      DMSO储存液
      10,000× ≤–20°C
      干燥、避光
      6个月至1年
      (DMSO 溶液)
      SYBR Green I 核酸凝
      胶染料(BD100)
      100μl
      DMSO储存液
      SYBR Green I 核酸凝
      胶染料(BD200)
      200μl
      DMSO储存液
      SYBR Green I 核酸凝
      胶染料(BD500)
      500μl
      DMSO储存液
      SYBR Green I 核酸凝
      胶染料(BD001)
      1ml
      DMSO储存液
      SYBR Green I 与dsDNA结合后的最大激发波长/发射波长:290,380,497nm/520nm
       
      产品简介
      SYBR Green I 核酸凝胶染料是目前检测琼脂糖凝胶和聚丙烯酰胺凝胶中双链DNA(dsDNA)和RNA(dsRNA)的最灵敏的染料之一。SYBR Green I 适用于各种电泳分析,使用简单,灵敏度高(在497 nm的透射光下,灵敏度高于EB 染色法10~25 倍),可以检出20pg 的DNA。SYBR Green I 核酸染料与核酸结合后的最大吸收峰在蓝绿可见光区,适用于使用可见光系列仪器对染色结果进行观察。同时,其在紫外区300nm~380nm 也有一个吸收峰,使得其染色结果也可以使用紫外光相关设备进行分析。在300 nm的透射光下,低至60 pg 的dsDNA 条带也能被SYBR Green I 染料检测。这种灵敏度比传统300 nm 透射光下的溴化乙锭(EB)染色至少高了25 倍(图1)。SYBR Green I 染料对于检测寡核苷酸也非常灵敏,能在15%的聚丙烯酰胺凝胶上检测低至1-2 ng 的合成24 聚体,比溴化乙锭的灵敏度高了50-100 倍。同时在不与dsDNA 结合时背景几乎可以忽略。由于SYBR Green I 染料的DNA 结合力强,可将染料加入DNA预先与DNA 包被电泳(电泳前染色)也可在制备凝胶时预先加入SYBR Green I 染料制备凝胶(电泳中染色),以及电泳后染色对DNA 进行染色,此外,SYBR Green I 染料与DNA 的结合不会抑制多种常见的限制性内切酶的活性,包括Hind III 和EcoR I,也不会干扰Southern 杂交分析。同时SYBR Green I染料还可用于DNA 的胶回收实验。
       
       


                                         A                                                                           B
       
      说明:样品为1kd DNA Marker(10ng/μl),从左至右上样量依次为0.5μl、1μl、3μl、5μl、7μl。A图展示的凝胶是用SYBR Green I核酸凝胶染料后染结果,B图展示的凝胶是用溴化乙锭后染结果。两种凝胶均由300nm紫外透射激发,用溴化乙锭凝胶染料滤光片拍照。

      实验前准备
      在打开包装前,离心管应完全回暖至室温,以确保DMSO 彻底解冻至溶液均一。为了避免损失染料,可在离心机中短暂离心解冻的染料,让DMSO 溶液汇集在管底。为了方便,得到染料后最好分装成多个小份并冻存。小份的染料将更快融化。

      辅助材料
      TE、TBE 或TAE 缓冲液
      乙醇:利用凝胶分离纯化DNA 时,去除SYBR Green I 染料时用于沉淀DNA

      光谱特性
      SYBR Green I染料的最大激发波长为497 nm,但是在~290 nm和~380 nm处有二级激发峰。与DNA结合的SYBR Green I染料的荧光发射集中在520 nm。这些光谱特性让SYBR Green I染料适用于多种凝胶检测仪,紫外反射(上紫外)、透射仪(下紫外)、蓝光透射仪均适用。 推荐用配置了520-550 nm滤光片(一般呈黄色或深黄色)的相机拍照,注意:不要使用与EB兼容的红色滤光片(能阻挡520-550 nm的光)。如果能再加上能滤去UV的滤光片,效果会更好。
       
      电泳用SYBR Green I 推荐使用方法

      电泳后染色方法:
      1. 按照常规方法进行电泳。

      2. 用PH 7.0-8.5 的缓冲液(如:TAE,TBE 或 TE),SYBR GreenⅠ使用浓度为1X,例如母液为10000X,则用缓冲液按10000:1 的比例稀释,混匀,制成染色溶液。

      3. 将染色溶液倒入合适的聚丙烯容器中,放入凝胶,用铝箔等盖住容器使染料避光。室温振荡染色10-20 分钟,凝胶浓度厚度控制在2mm 左右,易于SYBR Green1 的染色。聚丙烯酰胺凝胶直接在玻璃平皿上染色,将配好的工作溶液轻轻地倒在胶板上,让工作液均匀地覆盖整个胶板,并染色30 分钟。玻璃平皿必须预先经过硅烷化溶液处理(避免染料吸附在玻璃表面上)。

      4. 染色液可在暗处(最好是冷藏)放置一个星期或更久,重复使用最多四次。

      5. 聚丙烯酰胺凝胶电泳常用后染方法。

      凝胶成像
      1. 可在紫外或蓝光光源下轻松地观察到用SYBR Green I 染料染色的DNA。

      2. 254 nm 的紫外反射光源将比300 nm 的透射光具有更高的灵敏度。

      3. SYBR Green I 染色的凝胶的背景荧光基本可以忽略,紫外反射(上紫外)、透射仪(下紫外)、蓝光透射仪均适用该染料成像。

      4. 凝胶成像仪在每次使用后都要用去离子水和软布(比如粗棉布)来清洁透射仪的表面,这一点很重要。否则,荧光染料,如SYPRO 染料、SYBR 染料和溴化乙锭,将在玻璃表面累积,并产生高的背景荧光。
       
      SYBR Green I 使用注意事项
      1. 电泳前染色(核酸样品和SYBR Green I 预先混合)和电泳中染色(SYBR Green I 制备到胶中)时,如果核酸过量,前者对其电泳速率有一定影响,而后者条带易弥散,为操作方便,推荐使用电泳后染色法。

      2. 在常规用酒精沉淀核酸的过程中,SYBR Green I 可以全部从双链核酸上去掉。

      3. 如果想对用 SYBR Green I 染过的胶进行 Southern blots,建议在预杂化和杂化溶液中加入0.1-0.3 的SDS。

      4. 在紫外照射透视下,与双链 DNA 接合的 SYBR Green I 呈现绿色荧光。如果胶中含有单链 DNA则颜色为橘黄而不是绿色。

      5. SYBR Green I 对玻璃和非聚丙烯材料具有一定亲合力。建议在稀释、贮存、染色等使用过程中用聚丙烯类容器。
      温馨提示:不可用于临床治疗。

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      陈小姐

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      中国国家级南通经济技术开发区常兴路76号

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      技术服务,试剂

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      生产厂商

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