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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
99
- 供应商:
北京义翘神州科技股份有限公司
- 英文名:
StemVive ® Human Intestinal Organoid Expansion Medium
- 规格:
25 mL
肠道是人体消化吸收、营养代谢、黏膜屏障及免疫防御的重要器官。肠上皮组织具有高度动态更新能力,其持续更新主要依赖于肠隐窝中的肠干细胞。肠干细胞具有自我更新及多向分化能力,可分化形成吸收细胞、杯状细胞、潘氏细胞及肠内分泌细胞等多种肠上皮细胞类型,在维持肠道稳态及损伤修复过程中发挥关键作用。
传统二维(2D)培养体系难以长期维持肠干细胞的干性及功能状态,也无法有效模拟肠上皮组织的三维结构、细胞极性及体内微环境。三维类器官培养技术可在体外重建具有组织特异性的上皮样结构,为肠道发育机制研究、疾病建模、药物评价及个体化精准医学研究提供理想平台。
产品描述
StemVive® 人肠类器官扩增培养基(Cat#: OMHOINE)专为支持人正常肠组织来源细胞体外3D培养而设计,适用于人小肠、结肠及直肠组织来源肠类器官的建立、扩增培养及连续传代。
本产品成分经过系统优化,在基质胶包埋条件下,可支持肠组织来源细胞形成典型薄壁囊泡状肠类器官,并维持良好的增殖能力及分化潜能,稳定支持类器官连续扩增传代约10代。
使用本产品获得的人肠类器官,可进一步使用 StemVive® 人肠类器官维持培养基(Cat#: OMHOINM)或StemVive® 人肠类器官分化培养基(Cat#: OMHOIND)进行诱导分化培养,获得含多种肠道功能上皮细胞的成熟类器官模型。
本产品广泛适用于肠道发育机制研究、炎症性肠病研究、肠道肿瘤研究、宿主-病原体互作研究、药物敏感性评价、高通量药物筛选及个体化精准医学等科研领域。仅供科研使用,不可用于临床诊断或治疗。
产品信息
为了确保最佳的细胞培养效果,StemVive® 人肠类器官扩增培养基(Cat#: OMHOINE)由两个独立组件组成。由于不同组件有不同的储存温度需求,请注意这两个组件会分别装箱并采用不同的运输条件。
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组件 |
组分名称 |
规格 |
储存与运输温度 |
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Box A |
Component 1-Basal Medium |
25 mL |
2-8 ℃ |
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Box B |
Component 2- Supplement A (25x) |
1 mL |
-20 ℃ |
产品数据
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类器官形态:使用人肠类器官扩增培养基建立肠类器官呈薄壁囊状,分化阶段类器官出芽形成肠隐窝结构。 |
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类器官细胞表型分析:人肠类器官切片的免疫荧光染色分析。 Ki67标记具有增殖潜能的细胞,Villin标记小肠上皮细胞(刷状缘),MUC2标记杯状细胞,DAPI用于细胞核染色。扩增阶段以保持Ki67阳性干细胞为主;分化阶段有Villin阳性小肠上皮细胞和MUC2阳性杯状细胞分化; |
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类器官组织形态学分析:小肠类器官切片的H&E染色分析不同阶段类器官形态特征。 |
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类器官功能分析:小肠类器官切片的AB-PAS染色分析不同阶段类器官黏多糖合成和黏液分泌功能。 |
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文献和实验3A,促使 hPSCs 衍生的终内胚层 (DE) 向中肠和后肠内胚层分化,并促进肠管样形态发生,进而产生包含吸收性肠细胞以及主要分泌谱系(包括 Paneth 细胞、杯状细胞和肠内分泌细胞)的肠类器官。 本篇文章基于 Nature protocols【2】 整理了 hPSCs 细胞来源的肠类器官培养方案。 细胞来源 hPSCs 培养基配方 第 1 天内胚层分化培养基 第 2 天内胚层分化培养基 第 3 天内胚层分化培养基 中肠和后肠分化培养基 肠生长培养基 近岸
在无血清细胞培养条件下将人 iPS 细胞体外分化为结肠类器官
% 才能进行步骤 3。如果 CDX2 的表达低于 60%,则再进行一天HE分化并重新检查 CDX2 的表达。 图 3. 定形内胚层细胞分化为后肠内胚层细胞。后肠内胚层诱导后A) 第2 天 B) 第 3 天和 C) 第 4 天后肠内胚层细胞的形态。 步骤3:结肠类器官的扩增和冷冻保存(第 8-48 天) 结肠类器官的扩增 从培养箱中取出含有第 8 天后肠内胚层培养物的 6 孔板。 从每个孔中吸出培养基。 用 3 mL 1X PBS 清洗每个孔。 将 2 mL 预热的 3dGRO™ 人类结肠
类器官扩增和分化 13、将 HM 培养基吸出,用 PBS 清洗后,加入 EM 培养基,放置在 37℃,5% 低氧的培养箱中培养 4 天进行类器官扩增。 14、随后用 DM 培养基进行换液,放置在 37℃,5%CO2 的培养箱中培养 6 天,完成进一步分化。 图 2. 扩增培养基(EM)和分化培养基(DM)孵育后的肝类器官免疫荧光图【2】 肝类器官应用前景 类器官是一种能够进行体外更新和自组装的模型,相比于传统的二维(2D)细胞培养,类器官的生长环境更贴合生理条件。3D 培养的肝类器官可以用于
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