- ￥1500 - 2200
- 抚生
- 1mol/L-32μmol/L
- 0.5mol/L
- A115290
- 国产
- 2026年08月05日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商：
上海抚生
- 库存：
20
- 灵敏度：
0.5mol/L
- 样本：
血清，血浆，细胞培养上清及其他生物学样本
- 标记物：
血清/血浆
- 适应物种：
大鼠、小鼠、人、植物
- 应用：
ELISA试剂盒
- 检测方法：
ELISA法
- 检测范围：
1mol/L-32μmol/L
- 规格：
48T/96T
| 规格： | 48T | 产品价格： | ￥1500.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 96T | 产品价格： | ￥2200.0 |
通过特异性抗 AKT 单克隆抗体包被于微孔板，与样本中的 AKT 结合形成固相抗体复合物。加入 HRP 标记的检测抗体后，形成抗体‑抗原‑酶标抗体三明治结构。经洗涤去除未结合物质，加入 TMB 底物显色，HRP 催化 TMB 转化为蓝色，酸性终止液使颜色变为黄色。颜色深浅与 AKT 含量成正比，酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品浓度。
性能参数：
产品名称:人AKT蛋白(AKT)定量ELISA试剂盒
英文名称:Human AKT定量 ELISA Kit
产品规格：48T/96T
检测样本：血清，血浆，细胞培养上清及其他生物学样本。
检测范围：1mol/L-32μmol/L
灵敏度：0.5mol/L
特异性：与人其他细胞因子无交叉反应。
有效期：6个月（2-8℃保存）。
检测流程：
1、固相抗体包被
微孔板预先包被一种高特异性的单克隆抗体（捕获抗体），该抗体能专一识别并结合 AKT 蛋白 (AKT) 中的特定表位。
2、样本加入与抗原结合
将待测样本（如血清、血浆或细胞培养上清）加入微孔中，样本中的 AKT 会与包被抗体结合，形成 “固相抗体‑抗原” 复合物。未结合的成分在后续洗涤步骤中被清除。
3、酶标二抗结合
加入 HRP（辣根过氧化物酶）标记的第二抗体（检测抗体），该抗体识别 AKT 的另一个独立表位，从而形成 “捕获抗体‑AKT‑检测抗体” 的三明治结构。
4、显色反应
洗涤去除未结合的酶标抗体后，加入 TMB 底物溶液。HRP 催化 TMB 产生蓝色产物，在酸性终止液（如硫酸）作用下变为黄色。
5、定量分析
使用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度（OD 值），颜色深浅与样本中 AKT 浓度呈正相关。
数据及参考曲线：
| 校准品浓度(μmol/L) | 32.00 | 16.00 | 8.00 | 4.00 | 2.00 | 1.00 | 0.50 | 0.00 |
| OD450/630值 | 2.733 | 1.615 | 0.793 | 0.486 | 0.325 | 0.170 | 0.100 | 0.051 |
| 校正OD值 | 2.681 | 1.564 | 0.741 | 0.435 | 0.274 | 0.119 | 0.049 | 0.000 |
一、试剂准备
所有试剂使用前平衡至室温（18–25℃）；
洗涤液按比例稀释（如10×稀释为1×）；
标准品用稀释液复溶并进行倍比稀释（如0、0.5、1、2、4、8 ng/mL）。
二、加样
设立标准孔、样本孔和空白孔（仅加稀释液）；
每孔加入50 μL标准品或待测样本；
可对血清/血浆样本进行1:2预稀释以减少基质干扰。
三、温育
封板后37℃温育60分钟，使抗原充分结合；
温育期间避免阳光直射。
四、洗涤
弃去孔内液体，每孔注入300–350 μL洗涤液；
静置30秒至1分钟，甩干，重复5次；
拍干微孔板，避免残留液滴影响后续反应。
五、加酶标抗体
每孔加入100 μL生物素化检测抗体；
37℃避光温育60分钟。
六、再次洗涤
同上法洗涤5次，确保彻底清除未结合抗体。
七、加HRP-亲和素
每孔加入100 μL HRP标记亲和素；
37℃避光温育30–60分钟。
八、第三次洗涤
再次洗涤5次，拍干。
九、显色
每孔加入显色剂A和B各50 μL（或TMB单组分90–100 μL）；
37℃避光显色15–30分钟，观察颜色变化。
十、终止反应
每孔加入50 μL终止液，轻轻震荡混匀；
溶液颜色由蓝变黄，立即进行测定。
十一、读数与分析
使用酶标仪在450 nm波长下测定OD值；
以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标，绘制标准曲线；
将样本OD值代入方程，计算TPS浓度。
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| 小鼠真皮成纤维细胞 | 人钙调素(CAM)ELISA试剂盒 |
| 大鼠骨髓造血干细胞 | 小鼠嗜铬粒蛋白A(CHGA)ELISA试剂盒 |
| 大鼠肠静脉内皮细胞 | 绵羊主要组织相容性复合体(MHC)ELISA试剂盒 |
| 小鼠子宫内膜上皮细胞 | 大鼠抗IVIgG抗体ELISA试剂盒 |
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文献和实验操作，裂解1h，4度离心30min，取上清。 各位砖家有没有用CST抗体的，指点一二，小弟万分感谢！ fangweibin119 CST的抗体用的多去了 总体来说akt的抗体还行 pakt用过两个效果不是特别好 蛋白提取的时候没有加其它的磷酸酶抑制剂？ 一抗与二抗稀释的时候用5% BSA-TBST 一抗1:500是不是有点高了？ 怎么没有试试1:1000？1:2000？ 另外二抗
到？还有血清中AKT能检测出来吗？ 何求美人折？ 血清中的AKT可用 ELISA 试剂盒检测。 houcun 何求美人折？ wrote: 血清中的AKT可用 ELISA 试剂盒检测。 血清中的Akt用ELISA可以检测出来吗？ 本文由丁香园论坛提供，想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你，都可以成为师兄的好伙伴 师兄微
上海西唐生物科技有限公司 021-55229872, 65333639 www.westang.com 人磷酸化AKT 蛋白 ( AKT )ELISA 试剂盒 ( 用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内 ) 原理 本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA 法。用抗人 AKT 单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的 AKT与单抗结合，加入生物素化的抗人 AKT ，形成免疫
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