致病性大肠杆菌(EPEC)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)

致病性大肠杆菌(EPEC)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)

基本信息
产品名称：致病性大肠杆菌(EPEC)核酸检测试剂盒(荧光PCR法)
英文名称：Diagnostic Kit for Enteropathogenic Escherichia coli（Real-Time PCR Method）
包装规格：50T / 盒
储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融
有效期：12 个月预期用途
本试剂盒适用于检测水样粪便，疑似污染的水、食物等样本中的致病性大肠杆菌，用于致病性大肠杆菌感   染的辅助诊断，其检测结果仅供参考。

检测原理
本试剂盒采用 TaqMan 探针法实时荧光 PCR 技术，设计一对致病性大肠杆菌特异性引物，结合一条特异性探针，用荧光 PCR 技术对致病性大肠杆菌的 DNA 进行体外扩增检测，用于科研实验中对可疑感染病料的病原学检测。

主要组分
包装规格    50T/盒
EPEC 反应液    500μL×2 管
酶液    50μL×1 管
EPEC 阳性质控品    50μL ×1 管
阴性质控品    250μL ×1 管

技术参数
最低检出限：100 CFU/Test（单通道）
特异性：不与沙门氏菌、志贺氏菌、ETEC 等肠道致病菌交叉反应
重复性：Ct 值变异系数（CV）≤2%
适用仪器：ABI7500、安捷伦 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列荧光定量 PCR 检测仪。

操作流程
样本处理：取 200 μL 样本，经裂解液提取核酸，洗脱至 50 μL。
反应体系配制（冰上操作）：
PCR 反应液：10 μL
酶混合液：2 μL
模板 DNA：5 μL
纯水：3 μL
扩增程序：
预变性：95℃，10 min（1 循环）
扩增：95℃ 15 sec → 60℃ 30 sec（采集 FAM 信号），45 循环
结果判读：
阳性：检测通道 Ct 值≤40，且曲线有明显的指数增长曲线；
阴性：样本检测结果 Ct 值>40 或无 Ct 值。

注意事项
仅用于科研，不作临床使用。
严格分区操作（试剂准备区、样本处理区、扩增区），防止交叉污染。
试剂避免反复冻融，Taq 酶使用前离心，冰上放置。
不同批次试剂不可混用。