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PureCube 100 Ni-INDIGO 琼脂糖树脂是 Cube Biotech 专为高质量的 His 标签蛋白纯化而研发的独特产品。该产品的研发初衷是打造一种能够耐受高浓度螯合剂(如EDTA和DTT)的琼脂糖树脂,这些螯合剂在哺乳动物细胞培养缓冲液中十分常见。由此制成的INDIGO配体对DTT和EDTA的耐受浓度均高达20 mM,这在同类产品中具有显著优势。Ni-INDIGO还提供磁珠形式,或预装在柱子/柱中。
不止耐受,载量更是“碾压级”
INDIGO填料的结合载量高达100 mg蛋白/ml树脂(以eGFP实测),是传统NTA的2倍以上。这意味着:
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同样体积的填料,可以纯化更多蛋白
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对于低表达量的珍贵样品,回收率更高
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放大生产时,所需填料更少,成本更低
图6:INDIGO与其他传统NTA产品相比,所得蛋白量高达近100mg/ml
兼容各种“苛刻”条件
如资料所展示,INDIGO填料可在以下条件下稳定工作:

图7:在其他成分中INDIGO回收蛋白效果
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pH 4–13 宽范围
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8 M 尿素、6 M 盐酸胍(变性条件)
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20 mM DTT、20 mM EDTA
基质升级:PureCube 100 琼脂糖,流速更快、耐压更高
INDIGO填料搭载PureCube 100高交联琼脂糖基质(6%琼脂糖浓度,粒径50–150 μm),具备:
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高流速:≥1000 cm/h(15 cm柱床高)
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高耐压:≥300 kPa
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高载量:可达100 mg/ml
性能媲美Sepharose和Superflow系列,但耐受性更优。

适用场景
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293/昆虫细胞表达系统
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需耐受高浓度DTT/EDTA的纯化
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变性条件下纯化
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对镍离子残留敏感的下游实验
| Feature | |
|---|---|
| Usage | Specific binding and purification of 6x His tagged proteins |
| Specificity | Affinity to His tagged proteins |
| Binding capacity | >100 mg/mL |
| Bead Ligand | Ni-INDIGO |
| Bead size | 100 μm |
| Chelator stability | Stable in buffer containing 20 mM DTT and 20 mM EDTA |
| Filling quantity | Delivered as a 50 % suspension |
| Required equipment |
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申请记录
文献和实验10 mg/ml ethidium bromide To prepare 100 ml of a 0.7% agarose solution, measure 0.7 g agarose into a glass beaker or flask and add 100 ml 1X TBE or TAE. Microwave or stir on a hot plate until agarose is dissolved
Purification of 6xHis epitope tagged proteins by Ni-NTA-Agarose His标签蛋白纯化
Low (“Low”)Imidazole Buffer 0.5L 100mM Imidizole 3.4g 5% glycerol 25ml 100% glycerol 50mM Tris-HCl (pH 7.9)50ml 0.5M Tris-HCl (pH 7.9) 0.1% Tween-20 0.5M 100% Tween-20 500mM NaCl50ml 5M NaCl dH2O Fill to 0.5L (start w/ 350ml) High (“High
一、 试剂与材料: 1、 琼脂糖 2、 电泳缓冲液(1×TAE) 3、 10mg/ml溴化乙锭 4、 上样缓冲液 5、 电泳仪和水平电泳漕 6、 透射紫外灯 7、 胶带纸 二、 操作方法 按1~2%的琼脂糖浓度(据DNA样品分子量不同而定)配胶100ml ↓ 置于微波炉内加热搅拌,至琼脂糖完全溶解 ↓ 温度降至大约50℃时(勿忘记加入溴化乙锭),立即倒入靠近一端梳子的电泳槽 ↓ 待凝胶完全溶解后,小心拔去梳子 ↓ 倒入1×TAE,少许超出胶面(如超出太多,电阻太大),使缓冲液进入凝胶孔 ↓







