- ￥1500 - 2200
- 抚生
- 31.25pg/mL-2000pg/mL
- 15.625pg/mL
- A115214
- 国产
- 2026年04月27日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商：
上海抚生
- 库存：
20
- 灵敏度：
15.625pg/mL
- 样本：
血清，血浆，细胞培养上清及其他生物学样本
- 标记物：
血清/血浆
- 适应物种：
大鼠、小鼠、人、植物
- 应用：
ELISA试剂盒
- 检测方法：
ELISA法
- 检测范围：
31.25pg/mL-2000pg/mL
- 规格：
48T/96T
| 规格： | 48T | 产品价格： | ￥1500.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 96T | 产品价格： | ￥2200.0 |
检测原理：
通过特异性抗人CST4单克隆抗体包被于微孔板，与样本中的CST4结合形成固相抗体复合物。加入HRP标记的检测抗体后，形成抗体-抗原-酶标抗体三明治结构。经洗涤去除未结合物质，加入TMB底物显色，HRP催化TMB转化为蓝色，酸性终止液使颜色变为黄色。颜色深浅与CST4含量成正比，酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品浓度。
性能参数：
产品名称:人半胱氨酸蛋白酶抑制剂S(CST4)ELISA试剂盒
英文名称:Human CST4 ELISA Kit
产品规格：48T/96T
检测样本：血清，血浆，细胞培养上清及其他生物学样本
检测范围：31.25pg/mL-2000pg/mL
灵敏度：15.625pg/mL
特异性：与人其他细胞因子无交叉反应。
有效期：6个月（2-8℃保存）。
检测流程：
1、固相抗体包被
微孔板预先包被一种高特异性的单克隆抗体（捕获抗体），该抗体能专一识别并结合人半胱氨酸蛋白酶抑制剂S(CST4)中的特定表位。
2、样本加入与抗原结合
将待测样本（如血清、血浆或细胞培养上清）加入微孔中，样本中的CST4会与包被抗体结合，形成“固相抗体-抗原”复合物。未结合的成分在后续洗涤步骤中被清除。
3、酶标二抗结合
加入HRP（辣根过氧化物酶）标记的第二抗体（检测抗体），该抗体识别CST4的另一个独立表位，从而形成“捕获抗体-CST4-检测抗体”的三明治结构。
4、显色反应
洗涤去除未结合的酶标抗体后，加入TMB底物溶液。HRP催化TMB产生蓝色产物，在酸性终止液（如硫酸）作用下变为黄色。
5、定量分析
使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），颜色深浅与样本中CST4Q。
数据及参考曲线：
| 校准品浓度(pg/mL) | 2000.00 | 1000.00 | 500.00 | 250.00 | 125.00 | 62.50 | 31.25 | 0.00 |
| OD450/630值 | 2.677 | 1.611 | 0.823 | 0.487 | 0.311 | 0.159 | 0.090 | 0.023 |
| 校正OD值 | 2.653 | 1.587 | 0.800 | 0.464 | 0.287 | 0.135 | 0.066 | 0.000 |
操作步骤：
一、样本处理：
血清/血浆：避免溶血，2-8℃保存48小时；长期保存需分装冻存（-20℃或-70℃），避免反复冻融。
细胞培养上清：离心去除细胞碎片，取上清液。
组织匀浆：使用生理盐水匀浆，离心取上清。
二、加样：
标准品孔：加入50μL不同浓度标准品（如80、40、20、10、5、2.5 U/L）。
样本孔：加入50μL待测样本（血清/血浆需1:2稀释）。
空白孔：不加任何液体。
三、温育与洗涤：
封板后37℃温育60分钟。
弃去液体，吸水纸拍干，加满洗涤液（350μL），静置1分钟，甩干，重复洗板5次。
四、显色与终止：
每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15分钟。
加入50μL终止液，混匀后颜色由蓝变黄。
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文献和实验反应速率 ④.底物浓度：酶被饱和 ⑤. 酶浓度 ⑥. 温度 ⑦. pH值 3. 酶的提取 ①. 破碎方法 机械匀浆法、超声波法、冻融法、渗透压法、酶消化法。 ②. 冻融液 需加入蛋白酶抑制剂PMSF、配合剂EDTA、还原剂DTT等防止破坏目的酶。 ③. 酶消化法 利用溶菌酶、蛋白水解酶、糖苷酶对细胞膜或细胞壁的酶解作用，使细胞崩解破裂。 4. 酶失活原因 1. 蛋白酶水解和自溶作用 酶在使用和储藏过程中的失活常是由于微生物和外源蛋白水解酶作用的结果。 2. 聚合作用 3. 极端pH值 4. 氧
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