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文献和实验,最后取 5μL 2000 倍稀释样本到 245μL 标准品&样本稀释液内,做 50 倍稀释,总共稀释 100000 倍; 每步稀释时,取液量不少于 3μL,稀释倍数不超过 100 倍。每步稀释都需混合均匀。 Q3:大小鼠采血容量? A3:根据实验方案所需采血量的要求,我们可以选择不同的采血方式。 鼠尾采血法: 取血量较少时,采用此方法。通常选择剪断尾巴进行采血。亦可不剪尾,用 7-8 号注射针头刺入尾静脉采血。 小鼠每次可取血 0.1mL,大鼠每次可取血 0.2~0.4mL,可多次反复采血
高效液相色谱法分为:液-固色谱法、液-液色谱法、离子交换色谱法、凝胶色谱法。1.液-固色谱法(液-固吸附色谱法)固定相是固体吸附剂,它是根据物质在固定相上的吸附作用不同来进行分配的。①液-固色谱法的作用机制吸附剂:一些多孔的固体颗粒物质,其表面常存在分散的吸附中心点。 流动相中的溶质分子X(液相)被流动相S带入色谱柱后,在随载液流动的过程中,发生如下交换反应: X(液相)+nS(吸附)X(吸附)+nS(液相) 其作用机制是溶质分子X(液相)和溶剂分子S(液相)对吸附剂活性表面的竞争
流式课堂 | 裂红 or 分离液?外周血不同制备方法应用场景
、粒细胞等),需要裂解红细胞;倘若检测的是红细胞,不需要裂解红细胞; ⊙ 如果后续样本不用于流式分析,而是需要培养或者冻存复苏,使用裂红后培养的细胞,活性可能会打折扣。 Ficoll 密度梯度离心法 01 原理 根据细胞的沉降系数差异,借助细胞分离液和离心操作,对细胞进行分离。 02 优点 ⊙ 获得的细胞更纯净,有利于细胞培养后检测胞内因子 ⊙ 可将细胞冻存后再复苏、培养、检测 ⊙ 去除死细胞 03 缺点 ⊙ 步骤复杂,需 30min 以上 ⊙ 取白膜层需要丰富的经验 ⊙ 只能获得淋巴细胞和单核
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