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文献和实验酸性磷酸酶金属盐―铅法 酸性磷酸酶(acid phosphatase,ACP)广泛分布于机体各种组织细胞内,主要存在于细胞的溶酶体内.常作为溶酶体标志酶,此外,还存在于内质网和胞质内。在组织退行性变、核酸和蛋白质代谢活动增加时,酸性磷酸酶活性增强。酸性磷酸酶还参与酯类代谢。因此,它在疾病、免疫反应和细胞损伤与修复过程中具有一定生物学意义。 其基本原理是在酸性环境下,底物p―甘油磷酸钠被酸性磷酸酶水解,释放出磷酸,磷酸遇铅离子则生成磷酸铅沉淀,最后与硫化铵作用形成棕褐色硫化铅沉淀。其反应
葡萄糖 -6- 磷酸酶组织化学染色法 葡萄糖-6-磷酸酶(glucose-6―phosphatase,G-6―P)定位于肝、肾、肠黏膜的微体及内质网内。主要有两方面的生理功能:一方面通过水解葡萄糖-6-磷酸释放葡萄糖来控制葡萄糖释放人血的量;另一方面,在一定条件下通过其磷酸转移酶活性合成葡萄糖-6-磷酸。糖尿病患者血糖浓度增高的同时,伴有葡萄糖-6-磷酸酶的磷酸转移酶活性增高,其作用是取代肝内的葡萄糖激酶,使葡萄糖转向糖原合成。铅法:葡萄糖-6-磷酸水解后所释放出磷酸,为硝酸铅所捕获
酸性磷酸酶重氮盐后偶联法: 与碱性磷酸酶相同。重氮化和偶联 反应多在碱性溶液中和低温条件下进行。在酸性溶液中容易分解。所以酶 作用与偶联反应分两步进行。 1)孵育液配制 磷酸―6―苯酰-2-萘钠 25rug 蒸馏水 80ml Wapoll醋酸缓冲液(pH 5.0) 20ml 氯化钠 2g 重氮
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